I detta protokoll utvecklades en urinrörsstrikturinduktion i Wistar-råttor, följt av urinrörsrekonstruktion med ett buckalt slemhinnetransplantat. En retrograd uretrogram- och laserdopplerbedömning utfördes, vilket validerade uretrarekonstruktion (efter strikturbildning) och transplantatplacering.
Urinrörsrekonstruktion är ett viktigt kompetensområde för urologer. Munslemhinnan anses vara det bästa alternativet när urinrörstransplantation är nödvändig, även om det i vissa fall är olämpligt eller behöver optimeras för att reparera en viss förträngning. Därför är det avgörande att utveckla innovativa procedurer och utvärdera deras förmodade framgång i experimentella modeller för att passa det kliniska behovet. Med detta mål beskriver denna studie ett protokoll där urinrörsförträngning inducerades av diatermi hos Wistar-råttor. Urinrörsrekonstruktion utfördes 1 vecka senare med ett buckalt slemhinnetransplantat, skördat från underläppen och placerat på ett ventralt onlay-sätt. Ett retrograd uretrogram visade en signifikant förbättring av urinrörets diameter efter uretroplastik jämfört med respektive värde efter strikturinduktion. Dessutom bedömdes transplantatplaceringen genom blodperfusionsanalys med hjälp av laserdoppler. Som väntat motsvarade ett mörkblått område det icke-vaskulariserade buckala slemhinnetransplantatet. Denna procedur kan framgångsrikt simulera den normala patofysiologiska processen för urinrörsskada och vävnadsmodulering, såväl som uretral rekonstruktion med hjälp av ett buckalt slemhinnetransplantat på ett reproducerbart sätt, och fungera som grund för framtida forskning baserad på vävnadsteknik eller urinrörstransplantat.
Uretral rekonstruktion är en stor utmaning för urologiska kirurger vid hantering av urinrörsskador i samband med strikturer, trauma eller medfödda defekter1. Med botande avsikt är uretroplastik den bästa behandlingen för de flesta patienter, med långa (>2 cm) och främre urinrörsdefekter som kräver någon form av substitutionsuretroplastik2. Många vävnader har använts som urinrörsersättningar, inklusive hudtransplantationer med full eller delad tjocklek av genitala eller extragenitala områden, blåsväggsslemhinnor eller den utbredda buckala slemhinnan2. Buckala slemhinnetransplantat har flera fördelar, såsom att de kommer från en våt och hårlös miljö, är lätta att skörda, är resistenta mot infektioner, ett tjockt epitel, en minskad sannolikhet för pseudodivertikelbildning och en tunn lamina, vilket möjliggör tidig imbibition och inoskulering3. Till skillnad från klaffar har transplantat ingen blodtillförsel, beroende på mottagarens kärlbädd för att överleva4.
Djurmodeller av transplantat eller flikar har använts i stor utsträckning för att utveckla eller förfina kirurgiska tekniker, studera och förstå vävnadsfysiologi, underliggande mekanismer och orsaker till misslyckande och utvärdera innovativa behandlingsstrategier 5,6. Även om större djur underlättar det tekniska utförandet är gnagare, dvs. råttor och möss, lättare att hantera och underhålla, resistenta mot sjukdomar, mer kostnadseffektiva och, vilket är viktigt, med verktyg för att undersöka molekylära mekanismer, vilket är avgörande för att testa innovativa terapier 5,6. Flera modeller av flikar och transplantat har beskrivits hos råttor som använder olika vävnader, nämligen hud, ben, muskler6, kärl5 och till och med solida organ7. Det finns dock få undersökningar i murina modeller av transplantat för urinrörsrekonstruktion eller vävnadsteknik.
Icke desto mindre är framsteg inom translationell vetenskap beroende av djurmodeller som efterliknar sjukdomar. Hittills har den lokala patofysiologiska miljön inte behandlats, eftersom urinrörsrekonstruktion utförs omedelbart efter dess striktur. Häri syftar denna studie till att utföra en uretral rekonstruktion med hjälp av ett buckalt slemhinnetransplantat i en lokal patofysiologisk miljö. Med detta mål inducerades urinrörsförträngningen 1 vecka före dess rekonstruktion. Denna experimentella modell, som utförs på råttor, gör det möjligt att testa innovativa terapier och undersöka deras molekylära mekanismer och kliniska fördelar i framtiden.
Uretroplastik med buckala slemhinnetransplantat är en viktig hörnsten i urinrörsrekonstruktion. Innovativa metoder bör dock utvecklas för att optimera de som redan beskrivits och etablera nya, såsom vävnadstekniska material och biologiska transplantat, för att minska komplikationer och sjuklighet. Flera procedurer har publicerats för att etablera prekliniska modeller och definiera kirurgiska tekniker. Souza et al.1 genomförde en studie med 12 kaniner från Nya Zeeland. Ett ventralt läng…
The authors have nothing to disclose.
Vi tackar João Leitão, chef för radiologiavdelningen vid Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, och Catia Fernandes, tekniker vid radiologiavdelningen vid Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, för deras samarbete vid realiseringen av uretrogram.
Atipamezole | OrionPharma | ANTISEDAN (atipamezole) is indicated for the reversal of the sedative and analgesic effects. | |
Buprenorphine | RichterPharma | Buprenorphine is a derivative of the opioid alkaloid thebaine that is a more potent (25-40 times) and longer lasting analgesic than morphine. | |
Carl Zeiss Opmi-1 FC Surgical Stereo Microscope | Carl Zeiss Microscopy, Germany | OPMI 1 FC from ZEISS symbolizes quality, precision and reliability. The manual system is easy to use and delivers high fidelity images with the legendary ZEISS optics. | |
Carprofen | Zoetis | Carprofen is a non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) of the propionic acid class. | |
Catheter 22 G. x 1'' | B Braun | Introcan Safety | IV Catheter of fluorinated ethylene propylene (FEP) with firmer construction for arterial access. |
Enrofloxacin | Bayer | Enrofloxacin is a fluoroquinolone antibiotic. | |
Fentanyl | Braun | 3644960 | Fentanyl is a powerful synthetic opioid analgesic. |
Flumazenil | Fresenius Kabi | Benzodiazepine antagonist is used for the complete or partial reversal of the sedative effects caused by benzodiazepines. | |
High temperature cautery | Fiab | F7244 | Disposable cautery, sterile, high temperature (1200 °C), 28 mm fine tip. |
Instillagel gel | Farco-pharma | Cellulose-based lubricant with local anaesthetic and disinfecting properties. | |
Iopromide | Bayer | Non-ionic injectable contrast medium, with iodine. | |
Laser Doppler imaging system (perfusion imager moorLDI2-HIR and dedicated software) | MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, UK | 5710 | The angiogenesis models uses Laser Doppler imaging to assess blood perfusion in the hind limbs, one of which is ligated surgically. Dedicated measurement and comparison software allows the definition of regions of interest for blood flow assessment on the ischaemic versus non-ischaemic limb to establish a "reperfusion ratio" which can be assessed as often as needed and over a number of days on the same subject. |
Lubrithal Eye Gel | Dechra | Eye gel used in animals for prevention of dry eyes during anaesthesia. Lubricating and moisturising action on cornea and conjunctiva. | |
Male Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) rats | Charles River Laboratories, Spain | Twelve to fourteen-week-old | |
Metedomidin | Virbac | 037/01/07RFVPT | Medetomidine is a synthetic drug used as surgical anesthetic. |
Midazolam | Labesfal | Benzodiazepine medication is used for anesthesia and procedural sedation. | |
Monoplan Angiography System | Philips Medical Systems | Azurion 7 M20 | A stationary diagnostic fluoroscopic x-ray system specifically designed to optimize the capability of users to visually and quantitatively evaluate the anatomy and function of blood vessels of the heart, brain and other organs, as well as the lymphatic system. |
Mosquito forceps | Henry Schein | 102-4346 | Hartman-Mosquito Hemostatic Forcep Curved 3-1/2" Stainless Steel |
Needle Holder | Henry Schein | 100-2570 | Needle holder Mayo-Hegar, stainless steel, 14 cm |
Ophtalmic Needle Holder | Asico | AE-6143 | Needle holder barranquer most delicate without lock |
Pentobarbital Sodium | Ecuphar | Pentobarbital Sodium is the sodium salt of pentobarbital used for euthanasia. | |
Pointed Forceps | Aesculap | BD335R | Microforceps, 0.30 mm tip |
Polysorb 6.0 | Medtronic (Covidien) | UL-101 | Coated Synthetic Absorbable Suture aimed to reduce the inflammatory reaction in tissues, followed by gradual encapsulation of the suture by fibrous connective tissue. |
Providone-Iodine | Mylan | Povidone-iodine 10% is an antiseptic drug, used as a disinfectant before and after surgery. | |
Scalpel Blade nº11 | B Braun | BB511 | Carbon steel, sterile |
Spring Scissor | Henry Schein | 600-4826 | Surgical scissors 31 castroviejo |
Surgical Forceps | Aesculap | BD33R | Microforceps, 0.20mm tip |
Surgical Scissor | Aesculap | MA873R | Micro Iris Scissor, curved shrap tips |
SurgiPro 7.0 | Medtronic (Coviden) | VP-702-X | Non-Absorbable Monofilament Polypropylene Suture indicated for use in general soft tissue ligation. |