Perfusion hépatique isolée normomère porcine

Joris Blondeel; Nicholas Gilbo; Tine Wylin; Veerle Heedfeld; Diethard Monbaliu

doi:10.3791/65336

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Article de méthode

Perfusion hépatique isolée normomère porcine

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DOI :

10.3791/65336

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9 juin 2023

Joris Blondeel¹^,² , Nicholas Gilbo¹^,² , Tine Wylin¹ , Veerle Heedfeld¹ , Diethard Monbaliu¹^,²

¹Department of Microbiology, Immunology and Transplantation, Laboratory of Abdominal Transplantation, KU Leuven, ²Department of Abdominal Transplant Surgery and Coordination, University Hospitals Leuven

Dans cet article

Résumé

Le modèle porcin de perfusion hépatique normothermique (NMP), décrit ici, peut être utilisé avec succès pour étudier la NMP en tant que stratégie de préservation, outil d’évaluation de la viabilité et plate-forme pour la réparation d’organes. Il a une grande valeur translationnelle, mais il est techniquement difficile et demande beaucoup de main-d’œuvre.

Résumé

Les modèles porcins de perfusion électronique normalisée (NMP) hépatique sont de plus en plus utilisés dans la recherche sur la transplantation. Contrairement aux rongeurs, le foie porcin est anatomiquement et physiologiquement proche de celui de l’homme, avec une taille d’organe et une composition de bile similaires. La NMP préserve le greffon hépatique dans des conditions proches de la physiologie en faisant recirculer un perfusat chaud, oxygéné et enrichi en nutriments à base de globules rouges à travers le système vasculaire hépatique. La NMP peut être utilisée pour étudier les lésions d’ischémie-reperfusion, préserver un foie ex situ avant la transplantation, évaluer la fonction du foie avant l’implantation et fournir une plate-forme pour la réparation et la régénération des organes. Alternativement, la NMP avec un perfusate à base de sang total peut être utilisée pour imiter la transplantation. Néanmoins, ce modèle demande beaucoup de main-d’œuvre, est techniquement difficile et entraîne un coût financier élevé.

Dans ce modèle de NMP porcin, nous utilisons des foies endommagés ischémiques chauds (correspondant au don après mort circulatoire). Tout d’abord, une anesthésie générale avec ventilation mécanique est initiée, suivie de l’induction d’une ischémie chaude en clampant l’aorte thoracique pendant 60 min. Des canules insérées dans l’aorte abdominale et la veine porte permettent de rincer le foie avec une solution de conservation froide. Le sang évacué est lavé à l’aide d’un économiseur de cellules pour obtenir des globules rouges concentrés. Après une hépatectomie, des canules sont insérées dans la veine porte, l’artère hépatique et la veine cave infra-hépatique et connectées à un circuit de perfusion fermé amorcé avec un expanseur plasmatique et des globules rouges. Un oxygénateur à fibres creuses est inclus dans le circuit et couplé à un échangeur de chaleur pour maintenir une pO2 de 70-100 mmHg à 38 °C. La NMP est obtenue par un écoulement continu directement à travers l’artère et via un réservoir veineux à travers la veine porte. Les débits, les pressions et les valeurs des gaz du sang sont surveillés en permanence. Pour évaluer les lésions hépatiques, le perfusat et les tissus sont échantillonnés à des moments prédéfinis ; La bile est recueillie à l’aide d’une canule dans le canal cholédoque.

Introduction

La transplantation hépatique est le seul traitement définitif de l’insuffisance hépatique en phase terminale ; Cependant, son succès est limité par un déséquilibre persistant entre les patients sur la liste d’attente et la disponibilité des organes de donneurs^potentiels1. Afin d’augmenter le nombre de donneurs, les critères de donneurs ont été progressivement élargis au cours de la dernière décennie, notamment l’âge plus avancé des donneurs, la stéatose hépatique et le don après mort circulatoire (DDC)^2,3. Au cours d’une procédure de DDC, le foie souffr....