Manipulación de Tuina para reducir la inflamación y la pérdida de cartílago en ratas con artrosis de rodilla
Summary
Presentamos un protocolo para la manipulación de Tuina realizada en ratas con artrosis de rodilla inmovilizada por yeso. Sobre la base de los resultados preliminares, sugirió que la eficacia del método se basaba en la reducción de la inflamación y la pérdida de cartílago.
Abstract
Los ensayos clínicos sugieren que la manipulación de Tuina es eficaz en el tratamiento de la osteoartritis de rodilla (KOA), mientras que se requieren más estudios para descubrir su mecanismo. Por lo tanto, la manipulación de modelos animales de artrosis de rodilla es fundamental. Este protocolo proporciona un proceso estándar para la manipulación de Tuina en ratas KOA y una exploración preliminar del mecanismo de Tuina para KOA. El método de manipulación de presión y amasamiento (un tipo de manipulación Tuina que se refiere a presionar y amasar el área específica de la superficie del cuerpo) se aplica en 5 puntos de acupuntura alrededor de la articulación de la rodilla de ratas. La fuerza y la frecuencia de la manipulación se estandarizaron mediante registros de presión de los dedos, y la posición de la rata durante la manipulación se describe en detalle en el protocolo. El efecto de la manipulación se puede medir mediante pruebas de comportamiento del dolor y hallazgos microscópicos en el sinovial y el cartílago. Las ratas KOA mostraron una mejora significativa en el comportamiento del dolor. La infiltración inflamatoria del tejido sinovial se redujo en el grupo de Tuina y la expresión del factor de necrosis tumoral (TNF)-α fue significativamente menor. En comparación con el grupo control, la apoptosis de condrocitos fue menor en el grupo Tuina. Este estudio proporciona un protocolo estandarizado para la manipulación de Tuina en ratas KOA y pruebas preliminares de que los efectos terapéuticos de Tuina pueden estar relacionados con la reducción de la inflamación sinovial y el retraso de la apoptosis de los condrocitos.
Introduction
La artrosis de rodilla (KOA) es una enfermedad degenerativa que se manifiesta principalmente en dolores articulares. La fibrosis, el agrietamiento, la ulceración y la pérdida de cartílago articular son las principales causas de esta enfermedad1. El KOA tiene una alta prevalencia y puede tener un profundo impacto en la vida diaria de los pacientes, causando discapacidad en casos graves. Entre las personas de 45 a 84 años, la prevalencia de KOA aumenta con la edad, y la prevalencia entre las personas de 85 años y más es del 15%, con predominio en mujeres 2,3. Además, el KOA puede suponer una grave carga económica tanto para el individuo como para la sociedad. Una encuesta mostró que los costos directos de atención médica en KOA per cápita alcanzaron hasta $8,858 ± $5,120 por año4. Con el envejecimiento de la sociedad, el KOA se ha convertido en un problema de salud mundial y en un importante problema social, así como en un tema de actualidad para la investigación científica.
Los estudios basados en la evidencia han demostrado la eficacia de la manipulación de Tuina en el tratamiento de la KOA5. La manipulación de Tuina podría aliviar el dolor y mejorar la disfunción en pacientes con KOA, cuyo mecanismo está relacionado con efectos antiinflamatorios 6,7. Los investigadores encontraron que la manipulación de Tuina inhibió eficazmente la expresión de los factores inflamatorios interleucina (IL)-β y 5-hidroxitriptamina y ralentizó la degeneración del cartílago articular en un modelo KOA de conejo8. Sugirió que Tuina podría promover la circulación sanguínea y el metabolismo en el sitio de la lesión, lo que ayudó a eliminar factores inflamatorios como IL-1, IL-6 y factor de necrosis tumoral (TNF)-α, aliviando así los síntomas clínicos de KOA9. Además, el movimiento pasivo de la articulación a través de la manipulación de Tuina puede promover la penetración y difusión del líquido sinovial en el cartílago articular y mejorar el metabolismo de los nutrientes tisulares10. Otros estudios sugirieron que la manipulación de Tuina puede mejorar efectivamente los índices biomecánicos en pacientes con KOA11. Las manipulaciones aplicadas sobre los tejidos blandos pueden mejorar la distribución del estrés sobre las extremidades y mejorar la función del equilibrio12,13. Al mismo tiempo, con algunas manipulaciones de ajuste articular, también se puede ajustar la alineación de las extremidades inferiores para corregir marchas anormales14,15.
El mecanismo de acción de la manipulación de Tuina en el tratamiento de la KOA aún no se ha explorado, por lo que es necesario un estudio experimental. La clave para la aplicación de Tuina en animales de experimentación es la estandarización de los métodos de modelado, fijación animal e intervención16. El método de modelización determina si el animal de experimentación puede exhibir las características de la enfermedad. Mientras tanto, los métodos de fijación apropiados pueden facilitar la intervención de la manipulación de Tuina y reflejar mejor el efecto de Tuina. La estandarización de los métodos de intervención es la parte más difícil de la manipulación de Tuina. En 2010, el sistema básico de estándares chinos de acupuntura mencionó los estándares de puntos de acupuntura para animales de experimentación, proporcionando la posibilidad de operaciones de acupuntura y Tuina en experimentos con animales17. Sin embargo, todavía hay dificultades para estandarizar la manipulación de Tuina. Existen múltiples tipos de manipulación de Tuina18. La elección de la manipulación específica depende principalmente de la enfermedad a tratar y de las teorías terapéuticas que prefiera el intérprete. En el estudio de Tuina para KOA, se ha prestado más atención a la manipulación de presión de puntos (presionar los puntos de acupuntura específicos con el pulgar o el codo), la manipulación de empuje de Yizhichan (una manipulación de empuje moviendo el pulgar) y la manipulación de presión y amasamiento (que se refiere a presionar y amasar el área específica de la superficie del cuerpo con el dedo o la palma de la mano)19. La manipulación de prensa y amasamiento es una de las manipulaciones de Tuina más utilizadas, que combina el prensado y el amasamiento para mover el tejido subcutáneo20. La manipulación de la presión y el amasamiento aplicados en los puntos de acupuntura puede promover la circulación sanguínea y aliviar el dolor y representa el efecto terapéutico de Tuina en KOA19.
En este protocolo, se describirá en detalle la operación de manipulación de prensa y amasado en ratas KOA, incluyendo los puntos de acupuntura seleccionados, la intensidad y frecuencia de la manipulación y la posición corporal de la rata, con el fin de proporcionar una referencia para futuras investigaciones.
Protocol
Representative Results
Discussion
Este estudio proporciona un protocolo para la manipulación de Tuina en ratas KOA. A través de pruebas de comportamiento al dolor y hallazgos histomorfológicos, sugirió que tal serie de manipulación de Tuina aplicada a ratas KOA podría reducir la inflamación sinovial y la apoptosis del cartílago, lo que podría ser una referencia de la manipulación de Tuina en modelos animales de KOA.
Hay varios procedimientos críticos durante el protocolo. En primer lugar, es importante elegir un mé…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por el Proyecto de Construcción de Especialidades Clínicas Críticas de Shanghái (Número de subvención: Shslczdzk04001); el programa de vela de la Comisión de Ciencia y Tecnología de Shanghái (número de subvención: 22YF1444300); Proyectos dentro del presupuesto de la Universidad de Medicina Tradicional China de Shanghái (Número de subvención: 2021LK091).
Materials
| absolute ethanol | Supelco | PHR1070 | For making specimen |
| ALMEMO admeasuring apparatus | ahlborn | 2450-1 | For Mechanical Withdrawal Threshold test |
| Anti-Digoxin antibody | Sigma-Aldrich | SAB4200669 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Anti-IL-1 beta | abcam | ab283818 | For HE stain IHC or TUNEL |
| DAB Substrate kit | Solarbio | DA1010 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Denture base materials | Shanghai New Century | 20000356 | For model making |
| eosin | bioswamp | PAB180016 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Finger pressure recordings | Suzhou Changxian Optoelectronic Technology | CX1003w | For Tuina manipulation |
| formic acid solution | Sigma-Aldrich | 695076 | For decalcification |
| H2O2 | Sigma-Aldrich | 386790-M | For HE stain IHC or TUNEL |
| hematoxylin | bioswamp | PAB180015 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Isoflurane | Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company | S10010533 | For gas anesthesia |
| neutral resins | bioswamp | PAB180017 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Paraformaldehyde Fix Solution | Sigma-Aldrich | 100496 | For histology |
| PBS | Sigma-Aldrich | P3813 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Plantar Test Apparatus | IITC Life Science | / | For Paw Withdrawal Latency test |
| plaster of Paris bandage | WANDE | 20150023 | For model making |
| Proteinase K | Sigma-Aldrich | 124568 | For HE stain IHC or TUNEL |
| TNF Alpha Monoclonal antibody | Proteintech | 60291-1-Ig | For HE stain IHC or TUNEL |
| TUNEL | Servicebio | GDP1042 | For HE stain IHC or TUNEL |
| Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | For making specimen |
| xylene | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | For making specimen |
References
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