В данном исследовании представлена хирургическая модель хронической ишемии миокарда на свинье, обусловленной прогрессирующим стенозом коронарных артерий, приводящей к нарушению сердечной функции без инфаркта. После ишемии животным проводят аортокоронарное шунтирование без насоса с эпикардиальным размещением коллагенового пластыря, полученного из экзосом, из стволовых клеток. Эта дополнительная терапия улучшает функцию миокарда и восстановление.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Хирургическая модель хронической ишемии миокарда у свиньи, леченная с помощью коллагенового пластыря с экзосомами и аортокоронарного шунтирования без помпы
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Хроническая ишемия миокарда, возникающая в результате прогрессирующего стеноза коронарных артерий, приводит к гибернации миокарда (HIB), определяемой как миокард, который адаптируется к снижению доступности кислорода за счет снижения метаболической активности, тем самым предотвращая необратимое повреждение кардиомиоцитов и инфаркт. Это отличается от инфаркта миокарда, так как HIB имеет потенциал к выздоровлению при реваскуляризации. Пациенты со значительной формой ишемической болезни сердца (ИБС) испытывают хроническую ишемию, что подвергает их риску сердечной недостаточности и внезапной смерти. Стандартным хирургическим вмешательством при тяжелой форме ИБС является аортокоронарное шунтирование (АКШ), но было показано, что это несовершенная терапия, однако не существует дополнительных методов лечения для восстановления миоцитов, адаптированных к хронической ишемии. Для восполнения этого пробела была использована хирургическая модель HIB с использованием свиньи, которая поддается АКШ и имитирует клинический сценарий. Модель предполагает проведение двух операций. Первая операция заключается в имплантации жесткого констриктора диаметром 1,5 мм на левую переднюю нисходящую артерию. По мере роста животного констриктор постепенно вызывает значительный стеноз, что приводит к снижению регионарной систолической функции. Как только стеноз достигает 80%, кровоток и функция миокарда нарушаются, что приводит к HIB. Затем проводится АКШ без насоса с левой внутренней молочной артерией (LIMA) для реваскуляризации ишемизированной области. Животное выздоравливает в течение одного месяца, чтобы обеспечить оптимальное улучшение состояния миокарда перед жертвоприношением. Это позволяет проводить физиологические и тканевые исследования различных групп лечения. Эта животная модель демонстрирует, что сердечная функция остается нарушенной, несмотря на АКШ, что указывает на необходимость новых вспомогательных вмешательств. В этом исследовании был разработан коллагеновый пластырь, встроенный в экзосомы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток (МСК), который может быть хирургически наложен на поверхность эпикарда дистальнее LIMA анастомоза. Материал прилегает к эпикарду, рассасывается и обеспечивает каркас для устойчивого высвобождения сигнальных факторов. Эта регенеративная терапия может стимулировать восстановление миокарда, которое не реагирует только на реваскуляризацию. Эта модель переносится на клиническую арену, предоставляя средства физиологических и механистических исследований в отношении выздоровления при HIB.
Введение
Во всем мире тяжелой формой ИБС страдают более ста миллионов пациентов, и хотя уровень смертности снизился, она остается одной из ведущих причин смерти 1,2. ИБС имеет широкий клинический спектр от инфаркта миокарда (ИМ) до ишемии с сохранением жизнеспособности. Большинство доклинических исследований сосредоточено на инфаркте миокарда, характеризующемся наличием инфаркта ткани, так как его можно изучать на мелких и крупных моделях животных. Однако эта модель не учитывает пациентов с сохраненной жизнеспособностью и поддающихся реваскуляризации. У большинства пациентов, перенесших КШ, отмечается снижение кровоснабжения и ограниченная функция при сохранении вариабельности сократительного резерва и жизнеспособности3. Без лечения у таких пациентов может развиться прогрессирующая сердечная недостаточность и внезапная смерть, особенно при повышенной рабочей нагрузке4. Среди этих пациентов аортокоронарное шунтирование (АКШ) является эффективной терапией, но может не привести к полному функциональному восстановлению5. Важно отметить, что диастолическая дисфункция, которая является маркером худших клинических исходов, не восстанавливается после реваскуляризации, что указывает на необходимость новой адъювантной терапии во время АКШ 6,7. В настоящее время не существует клинически доступных адъювантных вмешательств, применяемых при АКШ для восстановления кардиомиоцитов до полной функциональной способности. Это серьезный терапевтический пробел, учитывая, что у многих пациентов прогрессирует прогрессирующая сердечная недостаточность, несмотря на соответствующую реваскуляризацию8.
Создана инновационная модель хронической ишемии миокарда у свиней, поддающаяся АКШ, для имитации клинического опыта ИБС9. Свиньи представляют собой хорошую модель сердечных заболеваний по сравнению с другими крупными животными, поскольку у них нет эпикардиальных мостиковых коллатералей, поэтому стеноз LAD сам по себе приводит к регионарной ишемии10. В этом исследовании были использованы 16-недельные самки свиней йоркширской породы ландрас. В этой модели LAD реваскуляризировали с помощью АКШ без помпы с использованием трансплантата левой внутренней молочной артерии (LIMA) (Дополнительная таблица 1). Чрескожное коронарное вмешательство (ЧКВ) не позволяет вскрыть стеноз, так как констриктор является жестким устройством. Магнитно-резонансная томография сердца (МРТ) используется для оценки глобальной и региональной функции, анатомии коронарных артерий и жизнеспособности тканей. Анализ МРТ сердца показал, что диастолическая функция, характеризующаяся пиковой частотой наполнения (PFR), остается нарушенной, несмотря на АКШ6. Механизм диастолической дисфункции, вероятно, связан с нарушением биоэнергетики митохондрий и образования коллагена при HIB, которые сохраняются после АКШ11.
Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) обеспечивают терапевтическую передачу сигналов через экзосомы для улучшения восстановления миокарда при применении во время АКШ. В этой модели свиней и параллельных исследованиях in vitro было показано, что размещение эпикардиального МСК викрилового пластыря во время КШ восстанавливает сократительную функцию с увеличением ключевых митохондриальных белков, а именно PGC-1α12, важного регулятора митохондриального энергетического метаболизма13. Модель in vitro позволила исследовать механизм передачи сигналов МСК на нарушение функции митохондрий. Экзосомы представляют собой секретируемые стабильные микровезикулы (50-150 нм), которые содержат белок или нуклеиновые кислоты, включая микроРНК (микроРНК)14. Последние данные in vitro свидетельствуют о том, что экзосомы, полученные из МСК, являются важным сигнальным механизмом, необходимым для восстановления митохондриального дыхания.
Экзосомы, полученные из стволовых клеток, являются многообещающими вспомогательными терапевтическими средствами, поскольку они легко доступны, могут быть коммерчески произведены и не имеют этических конфликтов. С учетом клинической трансляции был создан коллагеновый пластырь, в который встроены экзосомы, полученные из МСК, который может быть хирургически пришит к спящему участку миокарда. Было продемонстрировано, что с помощью этого пластыря осуществляется устойчивая доставка экзосом, и он обеспечивает внеклеточную регенеративную терапию с паракринным сигнальным механизмом, который нацелен на восстановление митохондрий и усиливает митохондриальный биогенез15. Эта процедура представляет собой доклиническую модель для изучения влияния терапии, полученной на основе МСК, на улучшение сердечной функции за счет усиления функции митохондрий и уменьшения воспаления во время реваскуляризации и обращения вспять адаптации миоцитов к хронической ишемии.
В данном исследовании показан хирургический метод АКШ с использованием LIMA-LAD анастомоза для обхода области проксимального стеноза LAD, имитирующий стандартное лечение пациентов с ИБС. В качестве дополнительной терапии к АКШ продемонстрировано хирургическое применение на ишемизированном участке миокарда инъекционного коллагенового пластыря, полученного из МСК. Эта хирургическая модель может быть использована для изучения физиологических реакций на паракринный эффект, наблюдаемый при использовании пластыря экзосомы, а также молекулярных механизмов восстановления.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Институциональные комитеты по уходу за животными и их использованию (IACUC) Медицинского центра Миннеаполиса и Университета Миннесоты одобрили все исследования на животных. Были соблюдены действующие рекомендации Национальных институтов здравоохранения (NIH) по использованию и уходу за лабораторными животными.
1. Выделение мезенхимальных стволовых клеток, подготовка и характеристика экзосом
- Выделение мезенхимальных стволовых клеток (МСК), полученных из костного мозга
- Получите 30-50 мл стерильного костного мозга из грудины или большеберцовой кости 20-недельной самки свиньи йоркширской ландрасской породы. Для этого вводят межкостную иглу 15G диаметром 25 мм в грудину или большеберцовую кость и набирают образец в шприц объемом 60 мл с 10 мл гепарина.
ПРИМЕЧАНИЕ: Для получения более подробной информации о сборе костного мозга см. Pittenger et al. и Hocum-Stone et al.12,16. - Короче говоря, пропустите образец костного мозга через трубку Vacutainer CPT с гепарином в течение 30 мин при 1800 x g.
- Снимите охристую оболочку, содержащую мононуклеарные клетки, и промойте сбалансированным солевым раствором Хэнка. Гранулированные мононуклеарные клетки путем центрифугирования и ресуспендирования в питательной среде (10% фетальной бычьей сыворотки [FBS]).
- Перенесите мононуклеарные клетки в колбы с клеточными культурами для роста адгезивов. Выделяют МСК из мононуклеарной фракции по их адгезивной природе.
- В течение 24 ч промывают все не-МСК, оставляя монослой МСК в колбе для культуры тканей. Подтвердите фенотип МСК с помощью проточной цитометрии, обеспечив отрицательную реакцию на CD45, маркер кроветворения, и положительную на CD90 и CD105, маркеры МСК.
- Получите 30-50 мл стерильного костного мозга из грудины или большеберцовой кости 20-недельной самки свиньи йоркширской ландрасской породы. Для этого вводят межкостную иглу 15G диаметром 25 мм в грудину или большеберцовую кость и набирают образец в шприц объемом 60 мл с 10 мл гепарина.
- Получение и характеристика экзосом из мезенхимальных стволовых клеток свиньи
- Посев 1 x 104 H9C2 кардиомиоцитов крыс и культивирование в 1x DMEM+ 10% FBS и 1x Pen/strep. Посев 2 x 104 свиных МСК в продвинутом DMEM + 5% FBS и 1x Pen/strep.
- После того, как обе клеточные линии будут слияться не менее чем на 80%, смените среду на среду с обедненным экзосомами H9C2 и МСК.
- Подвергают кардиомиоциты H9C2 легкой гипоксии (1%O2 в течение 24 ч). Извлеките колбу из гипоксии через 24 ч и пипеткой выпустите среду H9C2.
- Извлеките и выбросьте носитель MSC из колбы MSC. Добавьте очищенную среду H9C2 в колбу MSC. Инкубируют колбу в течение 6 ч в нормоксических условиях (5%СО2, 20%О2 и 37 °С).
- Экстрагируйте экзосомы из совместно культивируемых кондиционированных сред с помощью реагента для изоляции тотальных экзосом в соответствии с инструкциями производителя.
- Проверка идентификации экзосом методом вестерн-блоттинга распространенных экзосомальных белков с антителами к CD-63 (1:1000)17.
- Выполнение анализа отслеживания наночастиц (NTA) для количественной оценки экзосом, а также оценки размера наночастиц и их распределения. Для этого растворяют общий белок (50 мкг) экзосом в 500 мкл PBS, чтобы определить концентрацию и распределение экзосом по размерам с помощью анализатора отслеживания наночастиц.
- Анализируйте данные с помощью программного обеспечения для отслеживания наночастиц.
2. Аортокоронарное шунтирование без помпы
- Подготовка животных
- Взвесьте животное (16-недельную самку йоркширско-ландрасовой свиньи) за 3 дня до назначенной операции. Голодайте животное в течение 12 часов перед операцией, имея доступ к воде во время голодания.
- Вводите бупренорфин в дозе 0,18 мг/кг внутримышечно за 2-4 ч до операции.
- Индукция животного
- Усыпляйте животное, вводя внутримышечно 6,6 мг/кг тилетамина-золазепама/ксилазина.
- Подождите 15 минут, чтобы обеспечить адекватную седацию, оценив тонус челюсти, после чего установите катетер 22G в вену центрального уха.
ПРИМЕЧАНИЕ: Можно рассмотреть другую периферическую вену (например, головную вену), если ушная вена недостаточна. - Наносите офтальмологическую мазь местно на каждый глаз. Вводят 1-2 мг/кг пропофола внутривенно для индукции общей анестезии. Тонус челюсти наиболее достоверно отражает глубину анестезии и должен оцениваться на протяжении всей процедуры.
- Интубируйте животное эндотрахеальной трубкой соответствующего размера.
- Хирургия
- Побрейте грудину и пах животного при подготовке к хирургическому вмешательству.
- Установите искусственную вентиляцию легких на частоту 10-15 вдохов в минуту, кислород 1-4 л/мин и изофлуран 1,0-3,0% по мере необходимости для поддержания глубокой анестезии перед операцией. Проверьте отсутствие глазного или челюстного рефлекса, чтобы подтвердить глубокую анестезию.
- Оборудование для мониторинга положения (электрокардиограмма,СО2 в конце выдоха, частота сердечных сокращений, насыщение кислородом, артериальное давление и температура) на животном.
- Подсоедините внутривенный катетер к пакету с физиологическим раствором или раствором лактата для непрерывного введения поддерживающих жидкостей.
- Подготовьте кожу, используя асептическую технику со скрабом и раствором повидон-йода 3 раза, для адекватной стерильности и минимизации риска инфицирования области хирургического вмешательства.
- Для профилактики аритмий вводят Лидокаин внутрисосудистым путем (нагрузочная доза 2 мг/кг или непрерывная инфузия в дозе 50 мкг/кг/мин).
- Расположите животное спиной и накройте стерильными полотенцами.
- Выполните перерезание левой или правой бедренной артерии для установки артериального катера по методу Зельдингера с последующим подключением катетера к датчику для непрерывного мониторинга артериального давления во время операции.
- Используйте монополярную электрокоагуляцию, чтобы сделать разрез длиной 20 см, простирающийся от грудинной выемки проксимально вниз к ксифоидному отростку дистально, и разрезать слои мышц, подкожно-жировой клетчатки и соединительной ткани до грудины.
- Выполните срединную стернотомию с помощью осциллирующей пилы.
ПРИМЕЧАНИЕ: При повторной стернотомии не следует использовать стандартную пилу, так как она несет в себе более высокий риск повреждения миокарда из-за предыдущих спаек перикарда после процедуры торакотомии слева, выполненной для установки констриктора LAD. - Разделите заднюю грудную пластину с помощью ножниц. Используйте специализированный грудной ретрактор для адекватной визуализации средостения.
- Рассекайте спайки с помощью монополярной электрокоагуляции или ножниц Метценбаума. Осторожно рассеките окологрудинную мышцу и жир, чтобы обнажить левую внутреннюю молочную артерию (LIMA).
- После того, как LIMA обнажится латерально от края грудины, осторожно отделите его от грудной стенки с помощью тупого рассечения с помощью электрокоагуляционного наконечника. Используйте LIMA в качестве скелетизированного трансплантата.
- Начинают рассечение на уровне3-го межреберья. Осторожно приподнимите левую границу грудины для оптимальной визуализации.
- Используйте мягкое вытяжение адвентиции, чтобы обнажить артериальную и венозную ветви LIMA. Обрежьте ветви со стороны LIMA с помощью гемоклипсов и прижгите сторону грудной стенки ветвей.
ПРИМЕЧАНИЕ: Необходимо соблюдать осторожность, чтобы не прижигать зажим на LIMA, так как это может привести к сужению канала. - После того, как начальный сегмент LIMA был мобилизован, продолжайте диссекцию проксимально к уровню подключичной вены и дистально до бифуркации LIMA.
- После завершения диссекции вводят гепарин внутривенно в дозе 100-300 ЕД/кг. Подождите 3 мин после введения гепарина.
- Через 3 мин обрежьте дистальный конец LIMA, непосредственно перед уровнем бифуркации LIMA, и разделите канал. Зашейте дистальный конец свободной шелковой шовной стяжкой 2-0.
- Подготовьте проксимальный конец для черенкования. Визуально проверьте качество потока, дав трансплантату кровоточить в течение нескольких секунд.
- Осторожно зажмите дистальный конец кабелепровода LIMA атравматическим бульдожьим зажимом, чтобы избежать кровотечения. Вскрыть перикард с помощью перевернутой буквы Т, сделав разрез примерно 5-6 см. Наложите швы размера 3-0 на перикард для вытяжения с обеих сторон разреза.
- Стабилизируйте LAD с помощью силиконовых ретракционных лент и тканевого стабилизатора, который крепится к грудинному ретрактору. Сделайте артериотомию в артерии LAD дистальнее стеноза (вызванного констрикторной лентой) с помощью 11-лопастных и удлините ножницами по радужной оболочке.
- Установите коронарный шунт соответствующего размера в LAD. Выполните анастомоз LIMA to LAD с помощью нерассасывающегося шовного материала 7-0 с использованием техники шунтирования без помпы. Отпустите бульдожий окклюдер на LIMA и подтвердите гемостаз.
- Приготовление пластыря из экзосом, полученного из мезенхимальных стволовых клеток (МСК)
- После успешного выделения экзосом из МСК суспендировать примерно 3 x 108 экзосом в 3 мл физиологического раствора и добавить в коллагеновую губку.
- Доведите 3 мл суспензии экзосом до комнатной температуры при температуре около 22 °C в течение 10 минут. Поместите 2 рассасывающиеся губки для коллажа (каждая размером 1,27 см x 2,54 см) в чашку Петри среднего размера.
- Используйте шприц объемом 5 мл с иглой 18G для аккуратного перемешивания суспензии экзосом. Медленно нанесите пипеткой 1,5 мл суспензии на каждую коллагеновую губку и подождите 5 минут для полного впитывания.
- Размещение пластыря экзосомы
- Поместите губку с экзосомами вверх ногами на область гибернации сердца, которая является эпикардом передней перегородки в распределении LAD.
- Аккуратно положите две губки, чтобы покрыть область сердца, находящуюся в спячке. Используйте одну полилактиновую сетку размером 3,5 см x 1,0 см, чтобы покрыть каждую коллагеновую губку.
- Пришейте сетку к эпикарду тонкими прерывистыми швами 7-0.
- Установка плевральной дренажной трубки
- Поместите плевральную дренажную трубку через отдельный колото-резаный разрез рядом с нижней стороной стернотомического разреза. Осторожно поместите плевральную дренажную трубку на переднюю часть сердца.
- После того, как трубка будет на месте, наложите шов 3-0 с помощью горизонтального матрасного шва, чтобы обеспечить закрытие раны после удаления трубки.
- Плевральная дренажная трубка поддерживается до полного закрытия грудной клетки.
- Закрытие грудной клетки
- Приблизите грудину с помощью нерассасывающихся швов по схеме в виде восьмерки. Вводят 1 мг/кг бупивакаина внутримышечно по всей длине разреза.
ПРИМЕЧАНИЕ: Шов используется вместо проволоки, чтобы избежать помех при МРТ-визуализации. - Закройте слои мышц и кожи стандартным способом, используя рассасывающийся шов 2-0 и 3-0 соответственно.
- Выполните задержку дыхания и отсасывание, чтобы удалить весь воздух из грудной полости. Внимательно следите за давлением в дыхательных путях аппарата ИВЛ и поддерживайте давление в пределах 15-22 мм рт.ст., а по завершении отпустите его.
- После того, как весь воздух будет откачан, извлеките плевральную дренажную трубку, закрыв рану с помощью шовного шва. Нанесите клейкий клей местно, чтобы закрыть разрез грудины.
- Приблизите грудину с помощью нерассасывающихся швов по схеме в виде восьмерки. Вводят 1 мг/кг бупивакаина внутримышечно по всей длине разреза.
- Послеоперационный уход после операции
- Постепенно отучайте животное от аппарата искусственной вентиляции легких по мере закрытия разреза кожи. Убедитесь, что животное способно самопроизвольно дышать, и защитите рефлексы, прежде чем отключать животное от анестезиологического оборудования.
- Удалите эндотрахеальную трубку после того, как убедитесь, что животное способно защитить свои дыхательные пути. Накройте разрез кожи стерильной и неприлипшей повязкой с мазью с антибиотиком, чтобы свести к минимуму инфекцию в области хирургического вмешательства.
- Продолжайте контролировать жизненно важные показатели, включая частоту сердечных сокращений, частоту дыхания, температуру тела каждые 15 минут, пока животное не сможет удерживать свое положение без посторонней помощи.
- Следите за тем, чтобы животное не оставлялось без присмотра до тех пор, пока оно не сможет поднимать и удерживать голову и не сможет стоять без посторонней помощи. Мелоксикам вводят в дозе 0,2 мг/кг подкожно перед транспортировкой животного в отделение восстановления.
- Транспортируйте животное в реабилитационное отделение, когда животное стабильно. Держите повязку на месте операции на разрезе до 3-го послеоперационного дня. Замените повязку, если она испачкалась.
- Продолжайте следить за уровнем боли, разрезом кожи и общим самочувствием животного в течение первых 5 дней после операции. При необходимости вводят половину дозы мелоксикама (0,1 мг/кг) один раз в сутки при прорывной боли.
- В течение первых 5 дней после операции животное должно находиться в одиночном помещении, пока разрезы не заживают, чтобы снизить риск инфицирования места операции другим животным. Верните животное в групповое содержание через 5 дней.
- Сообщайте о любых осложнениях или изменениях в состоянии животного (лихорадка, асцит, потеря веса, отсутствие аппетита и т. д.) ветеринарному врачу или соответствующему персоналу.
3. Коронарография с использованием бедренного доступа
- Закрепите животное на операционном столе в спинном положении лежа. Начинайте искусственную вентиляцию легких со скоростью 10-15 вдохов в минуту. Установите кислород на 2-4 л/мин, изофлуран на 1% и 4% по мере необходимости для поддержания глубокой плоскости анестезии.
- Поместите провода ЭКГ на конечность животного, чтобы контролировать сердечный ритм. Оцените животное на глубину анестезии. Считайте, что животное находится под глубоким наркозом, когда глазной или челюстной рефлекс отсутствует.
- Очистите область груди и шеи скрабом с повидон-йодом, а затем накройте животное полотенцами.
- Доступ к бедренной артерии через хирургический разрез и обнажение бедренной артерии и вены. Сделайте продольный разрез 1-2 мм лезвием No 11 в бедренной артерии и канюлируйте артерию с помощью интродьюсерной оболочки 11 Fr в просвет сосуда.
- После получения доступа продвигают катетер для проведения коронарографии для оценки анатомической проходимости трансплантата LIMA-LAD.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
После реваскуляризации проводится коронарография для оценки стеноза LAD (более 80%) и проходимости трансплантата LIMA-LAD (рис. 1). Через четыре недели после операции реваскуляризации и установки коллагенового пластыря с экзосомами проводится МРТ сердца для оценки систолической и диастолической функции сердца в покое и при нагрузке с использованием инфузии низких доз добутамина в дозе 5 мкг/кг/мин. Систолическая функция анализируется путем измерения толщины стенки в процентах (толщина стенки...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В этом исследовании представлена первая модель хронически ишемизированного миокарда у свиней, в которой было показано, что лечение коллагеновым пластырем, полученным из МСК, нагруженным экзосомами, во время хирургической реваскуляризации восстанавливает диастолическую и систолическую функцию при инотропной стимуляции, потенциально за счет целенаправленного восстановления митохондрий. Ранее было продемонстрировано, что в крупной животной модели HIB диастолическая и систолическая функции, измеренные с помощью МРТ сердца, о...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Эта работа была поддержана VA Merit Review #I01 BX000760 (RFK) из Соединенных Штатов Америки (США). Грант Министерства по делам ветеранов BLR&D и гранта Министерства по делам ветеранов США #I01 BX004146 (TAB). Мы также выражаем признательность за поддержку Института сердца Лиллехей при Университете Миннесоты. Содержание этой работы не отражает точку зрения Министерства по делам ветеранов Правительства Соединенных Штатов Америки.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 5 Ethibond | Ethicon | MG46G | Шовный материал |
| # 40 лезвие машинки для стрижки | Oster | 078919-016-701 | Удалить волосы с мест проведения операции |
| 0 Vicryl | Ethicon | J208H | Шовный материал |
| 1 мл Шприц | Medtronic/Covidien | 1188100777 | Введение инъекционных средств |
| 1" медицинская лента | Medline | MMM15271Z | Обезопасить рану перевязочные и внутривенные катетеры |
| 1000 мл 0,9% Натрия хлорид | Baxter | 2B1324X | Жидкость для внутривенного вливания 12 |
| мл Шприц | Medtronic/Covidien | 8881512878 | Введение инъекционных средств |
| 18 г иглы | BD | 305185 | Введение инъекционных средств |
| 20 г иглы | BD | 305175 | Введение инъекционных средств |
| 20 мл Шприц | Medtronic/Covidien | 8881520657 | введения инъекционных средств |
| 2-0 Vicryl | Ethicon | J317H | Шовный материал |
| 250 мл 0,9% физиологического раствора | Baxter | UE1322D | Заместительная жидкость для внутривенного введения |
| 3 мл Syinge | Medtronic/Covidien | 1180300555 | Введение инъекционных средств |
| 3-0 Vicryl | Ethicon | VCP824G | Шовный материал |
| 36" Трубки контроля давления | Смита s Medical | MX563 | Connect арт. Линия к преобразователю |
| 4,0 мм ID эндотрахеальная трубка | Medline | DYND43040 | Установить дыхательные пути для гибернации |
| 4-0 Tevdek II Strands | Deknatel | 7-922 | Шов для фиксации констриктора вокруг LAD |
| 48" Трубки контроля давления | Смита s Medical | MX564 | Connect арт. Линия к преобразователю |
| 500 мл 0,9% Хлорид натрия | Baxter | 2B1323Q | Доставка лекарств, Предоставление тумана для воздуходувки Mister |
| 6 mL Шприц | Medtronic/Covidien | 1180600777 | Введение инъекционных агентов |
| 6,0 мм ID эндотрахеальной трубки | Mallinckrodt | 86049 | Создание дыхательных путей для Revasc, MRI и заделки |
| 6,5 мм ID эндотрахеальной трубки | Medline | DYND43065 | Создание дыхательных путей для Revasc, MRI и концевой |
| 6-дюймовой напорной трубки | Смита s Medical | MX560 | Collect костный мозг |
| 60 мл Шприц | Medtronic/Covidien | 8881560125 | Введение инъекционных препаратов |
| 7,0 мм ID эндотрахеальной трубки | Medline | DYND43070 | Создание дыхательных путей для реваска, МРТ и заделки |
| 7-0 Prolene | Ethicon | M8702 | Шовный материал |
| Advanced DMEM (1X) | ThermoFisher Scientific | 12491023 | |
| Салфетки для приготовления алкоголя | MedSource | MS-17402 | Дезинфицирующее средство для кожи |
| Amicon Ultra-15 Центробежный фильтрующий блок | Millipore Sigma | UFC910024 | |
| Наркозный аппарат | Drager Fabious | Trio | поддерживает общую анестезию |
| Наркозный аппарат + аппарат искусственной вентиляции легких | DRE Dräger- Fabius Tiro | DRE0603FT | Доставить кислород и ингалянт пациенту |
| Монитор для анестезии | Phillips Intellivue | MP70 | Многопараметрический для безопасности пациента |
| Набор артериальных катетеров | Arrow | ASK-04510-HF | Феморальный катетер для мониторинга артериального давления |
| Искусственные слезы | Rugby | 0536-1086-91 | Смазывайте глаза для предотвращения высыхания роговицы |
| Bair Hugger | 3M | Model 505 | Система подогрева пациента |
| Базовая упаковка | Medline | DYNJP1000 | Стерильные простыни и чехол |
| для стола Пробирки для сбора крови - зеленый верх | Fisher Scientific | 02-689-7 | Сбор образцов крови микросферы |
| Blower Mister | Kit Medtronic/Covidien | 22120 | Очищает хирургическое поле для сосудистого анастомоза |
| BODIPY TR Ceramide | ThermoFisher Scientific | D7540 | |
| Игла для костного мозга - 25 мм 15 ga IO игла | Vidacare | 9001- VC-005 | Сбор костного мозга |
| Костный воск Medline | ETHW31G | Гемостаз разрезанной кости | |
| Bovie Cautery наконечник | Covidien | E2516 | Гемостаз |
| Бупивикаин | Pfizer | 00409-1161-01 | Местный анестетик |
| Бупренорфин 0,3 мг/мл | Sigma Aldrich | B9275 | Предоперационный анальгетик для процедур выживания |
| Cell Скребки | Corning | 353085 | |
| цефазолин 1 гр | Pfizer | 00409-0805-01 | Антибиотик |
| Плевральная дренажная трубка | Covidien | 8888561043 | Откачивает воздух из грудной полости |
| Cloroprep | Becton Dickenson | 260815 | Хирургическая подготовка кожи CPT |
| трубка | BD | 362753 | МСК выделение из костного мозга |
| Delrin Constrictor | U of MN | Custom Made Создает | стеноз LAD |
| Dermabond | Ethicon | DNX12 | Кожный клей |
| DMEM (1X) Dulbecco's Modified Eagle Medium, HEPES | ThermoFisher Scientific | 12430062 | |
| Добутамин 12,5 мг/мл Pfizer | 00409-2344-01 | Повышает артериальное давление и частоту сердечных сокращений во время второго микросферного сбора крови | |
| Прокладки для ЭКГ | DRE | 1496 | Монитор сердечного ритма |
| Истощенный экзосомами FBS | ThermoFisher Scientific | A2720801 | |
| Falcon Одноразовые полистирольные серологические пипетки, стерильные, 10 мл | Fisher Scientific | 13-675-20 | |
| Интродьюсер бедренных и сонных артерий | Cordis- J& J | 504606P | канюли бедренной и сонной артерии |
| , фетальная сыворотка крупного рогатого скота, инактивированная при нагревании, Gibco FBS | ThermoFisher Scientific | 16140089 | |
| Flo-thru 1.0 | Baxter | FT-12100 | используется для анастомоса LIMA to L |
| Flo-thru 1.25 | Baxter | FT-12125 | FT-12125 |
| Flo-thru 1.5 | Baxter | FT-12150 | FT-12150 |
| Flo-thru 2.0 | Baxter | FT-12200 | FT-12200 |
| GlutaMAX Добавка | ThermoFisher Scientific | 35050061 | |
| Машинка для стрижки волос | Oster | 078566-011-002 | Удалить волосы с мест операций |
| Helistat коллагеновая губка | McKesson | 570973 1690ZZ | Губка для встраивания экзосом |
| Heparin | Pfizer | 0409-2720-03 | Антикоагулянтные |
| гистологические банки | Fisher Scientific | 316-154 | Формалин для образцов тканей |
| HyClone Характерная фетальная бычья сыворотка (FBS) | Цитива | SH30071.03 | |
| Hypafix | BSN Medical | 4210 | Безопасная раневая повязка и внутривенные катетеры |
| Изофлуран | Сигма Олдрич | CDS019936 | Общий анестетик-ингалянт |
| Внутривенная трубка для воздуходувки Mister | Carefusion | 42493E | Адаптируется к внутривенным жидкостям для воздуходувки/Mister |
| Jelco 18 ga Внутривенный катетер | Smiths medical | 4054 | Внутривенный доступ в Revasc, MRI и Term |
| Lidocaine 2% | Pfizer | 00409-4277-01 | Местная анестезия/антиарртимическая |
| Ligaclips | Ethicon | MSC20 | Хирургические скобы для разбора LIMA |
| Длинное лезвие для ларингоскоп | DRE | 12521 | Позволяет визуализировать трахею для интубации |
| Мелоксикам 5 мг/мл | Boehringer Ingelheim | 141-219 | Послеоперационный анальгезирующий |
| микросферический насос | Соберите образцы крови у интродьюсера бедренной кости | ||
| Monopolar Cautery | Covidien | Valleylab™ FT10 | Гемостаз |
| Nanosight NS 300 | Malvern Panalytical | MAN0541-03-EN | |
| NTA 3.1.54 программное обеспечение | Malvern Panalytical | MAN0520-01-EN-00 | |
| OPVAC Synergy II | Terumo Cardiovascular System | 401-230 | Сердечный позиционер и стабилизатор |
| Кислородный баллон E баллон | различные | различные различные | Используется для воздуходувки Mister, если наркозный аппарат не имеет вспомогательного расходомера |
| PBS, pH 7.2 | ThermoFisher Scientific | 20012050 | |
| Пенициллин-стрептомицин-неомицин (PSN) Смесь | антибиотиков ThermoFisher Scientific | 15640055 | |
| Pigtail 145 катетер 6 French | Boston Scientific | 08641-41 | Измерение давления LV |
| Преобразователь | давления различный | Необходимо адаптироваться к монитору анестезии | Монитор прямого артериального давления |
| Пропофол | Диприван | 269-29 | Индукционный агент |
| Ронкуроний | Mylan | 67457-228-05 | Нервно-мышечный блокатор |
| SR Бупренорфин 10 мг/мл | Abbott Labs | NADA 141-434 | Послеоперационный анальгетик |
| стерильный физиологический раствор 20 мл | Fisher Scientific | 20T700220 | Промывка для внутривенных катетеров |
| Стернальная пила/пила для вскрытия | Thermo Fisher | 812822 | Используется для вскрытия грудной полости |
| Стоп-краны | Smith Medical | MX5311L | 2 для подключения к свиному хвосту |
| Сукцинилхолин 20 мг/мл | Pfizer | 00409-6629-02 | Нервно-мышечный блокатор |
| Всасывание трубка | Medline | DYND50223 | |
| Контейнер для всасывания | Medline | ||
| Хирургический набор с ретрактором грудной клетки | различные | Смотрите список пакетов | Бедренный разрез и срединная стернотомия |
| Хирургические инструменты | различные | Смотрите список пакетов | Бедренные и сонные срезы и стернотомия |
| Хирургический пружинный зажим | Прикладной медицинский | A1801 | Зажим конец LIMA после снятия |
| Шприцевой насос | Harvard | Delivery IV Добутамин инфузионный | |
| SYTO RNASelect Зеленый флуоресцентный клеточный краситель - 5 мМ раствор в ДМСО | Millipore Sigma | S32703 | |
| Telazol 100 мг/мл | Fort Dodge | 01L60030 | Предоперационное седативное средство |
| Telpha pad | Covidien | 2132 | Стерильная повязка на рану |
| Таймер | Время сбора образцов крови | ||
| Общий реагент для выделения экзосом ( из сред для клеточных культур) | ThermoFisher Scientific | 4478359 | |
| Колба для культуры тканей TPP, T75, фильтрующий колпачок с 0,22 мкМ ПТФЭ | ThermoFisher Scientific | TP90076 | |
| мазью с тройным антибиотиком | Johnson & Johnson | 23734 | Наружное применение |
| Викрил сетка | Ethicon | VKML | Пластырь для применения эпикардиальных клеток |
| Vortex | Mix микросферы | ||
| Ксилазин 100 мг/мл | Vedco | 468RX | Предоперационное успокоительное/обезболивающее |
Ссылки
- Dai, H., et al. Global, regional, and burden of ischaemic heart disease and its attributable risk factors, 1990-2017: results from the Global Burden of Disease Study 2017. European heart journal. Quality of care & clinical outcomes. 8 (1), 50-60 (2022).
- Tsao, C. W., et al. Heart Disease and Stroke Statistics-2022 Update: A Report From the American Heart Association. Circulation. 145 (8), e153-e639 (2022).
- Rahimtoola, S. H. The hibernating myocardium. American Heart Journal. 117 (1), 211-221 (1989).
- Canty, J. M. Jr, Fallavollita, J. A. Hibernating myocardium. Journal of Nuclear Cardiology. 12 (1), 104-119 (2005).
- Page, B. J., et al. Revascularization of chronic hibernating myocardium stimulates myocyte proliferation and partially reverses chronic adaptations to ischemia. Journal of the American College of Cardiology. 65 (7), 684-697 (2015).
- Aggarwal, R., et al. Persistent diastolic dysfunction in chronically ischemic hearts following coronary artery bypass graft. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 165 (6), e269-e279 (2023).
- Olsen, F. J., et al. Prognostic Value and Interplay Between Myocardial Tissue Velocities in Patients Undergoing Coronary Artery Bypass Grafting. The American Journal of Cardiology. 144, 37-45 (2021).
- Virani, S. S. Heart Disease and Stroke Statistics-2021 Update: A Report From the American Heart Association. Circulation. 143 (8), e254-e743 (2021).
- Hocum Stone, L., et al. Surgical Swine Model of Chronic Cardiac Ischemia Treated by Off-Pump Coronary Artery Bypass Graft Surgery. Journal of Visualized Experiments:JoVE. (133), e57229(2018).
- White, F. C., Carroll, S. M., Magnet, A., Bloor, C. M. Coronary collateral development in swine after coronary artery occlusion. Circulation Research. 71 (6), 1490-1500 (1992).
- Righetti, A., et al. Interventricular septal motion and left ventricular function after coronary bypass surgery: evaluation with echocardiography and radionuclide angiography. The American Journal of Cardiology. 39 (3), 372-377 (1977).
- Hocum Stone, L. L., et al. Recovery of hibernating myocardium using stem cell patch with coronary bypass surgery. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 62 (1), e3-e16 (2021).
- Puigserver, P., Spiegelman, B. M. Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator 1 alpha (PGC-1 alpha): transcriptional coactivator and metabolic regulator. Endocrine Reviews. 24 (1), 78-90 (2003).
- Henning, R. J. Cardiovascular Exosomes and MicroRNAs in Cardiovascular Physiology and Pathophysiology. Journal of Cardiovascular Translational Research. 14 (2), 195-212 (2021).
- Chen, Y., Liu, Y., Dorn, G. W. 2nd. Mitochondrial fusion is essential for organelle function and cardiac homeostasis. Circulation Research. 109 (12), 1327-1331 (2011).
- Pittenger, M. F., Martin, B. J. Mesenchymal stem cells and their potential as cardiac therapeutics. Circulation Research. 95 (1), 9-20 (2004).
- Campos-Silva, C., et al. High sensitivity detection of extracellular vesicles immune-captured from urine by conventional flow cytometry. Scientific Reports. 9 (1), 2042(2019).
- Hocum Stone, L. L., et al. Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 153 (3), 582-590 (2017).
- Stone, L. L. H., et al. Mitochondrial Respiratory Capacity is Restored in Hibernating Cardiomyocytes Following Co-Culture with Mesenchymal Stem Cells. Cell Medicine. 11, 2155179019834938(2019).
- Lamy, A., et al. Skeletonized vs Pedicled Internal Mammary Artery Graft Harvesting in Coronary Artery Bypass Surgery: A Post Hoc Analysis From the COMPASS Trial. JAMA Cardiology. 6 (9), 1042-1049 (2021).
- Shim, J. K., Choi, Y. S., Yoo, K. J., Kwak, Y. L. Carbon dioxide embolism induced right coronary artery ischaemia during off-pump obtuse marginalis artery grafting. European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 36 (3), 598-599 (2009).
- Aklog, L. Future technology for off-pump coronary artery bypass (OPCAB). Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery. 15 (1), 92-102 (2003).
- Hou, D., et al. Radiolabeled cell distribution after intramyocardial, intracoronary, and interstitial retrograde coronary venous delivery: implications for current clinical trials. Circulation. 112 (9 Suppl), I150-I156 (2005).
- Gallet, R., et al. Exosomes secreted by cardiosphere-derived cells reduce scarring, attenuate adverse remodelling, and improve function in acute and chronic porcine myocardial infarction. European Heart Journal. 38 (3), 201-211 (2017).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
