Disseksjon og gradering av ovarieutvikling hos hunninsekter av villtype

Summary

Protokollen demonstrerer en enkel og enkel disseksjonsmetode, egnet for villtype trekkende hunninsekter fanget med lyskasterfeller. Denne teknikken kan betydelig klargjøre den samme arten ved å sammenligne både reproduktive vev, nemlig parringssekk og ovarieutvikling av villtype kvinnelige insekter.

Abstract

Trekkende utgjør alvorlige utfordringer for matproduksjon og sikkerhet over hele verden. De vandrende kan overvåkes og fanges ved hjelp av lyskasterfeller. En av de viktigste teknikkene for vandrende skadedyrprognoser er å identifisere trekkartene. Men i de fleste tilfeller er det vanskelig å få informasjonen bare ved utseende. Derfor kan bruk av kunnskap ervervet ved systematisk analyse av det kvinnelige reproduktive systemet bidra til å forstå den kombinerte anatomiske morfologien til eggstokkparringssekken og eggstokkutviklingsgraderingen av villtype trekkende insekter fanget med søkelysfeller. For å demonstrere anvendeligheten av denne metoden ble ovarieutviklingsstatus og eggkornutviklingsstadier direkte vurdert i Helicoverpa armigera, Mythimna separata, Spodoptera litura og Spodoptera exigua for ovarieanatomien, og eggstokkparringssekkene ble studert i Agrotis ipsilon, Spaelotis valida, Helicoverpa armigera, Athetis lepigone, Mythimna separata, Spodoptera litura, Mamestra brassicae og Spodoptera exigua, for å utforske deres relasjoner. Dette arbeidet viser den spesifikke disseksjonsmetoden for å forutsi trekkinsekter av villtype, og sammenligner det unike reproduktive systemet til forskjellige trekkende insekter. Deretter ble begge vevene, nemlig eggstokkene og parringssekkene, undersøkt nærmere. Denne metoden bidrar til å forutsi dynamikken og den strukturelle utviklingen av reproduktive systemer i villtype kvinnelige trekkinsekter.

Introduction

Migrasjon av insekter spiller en viktig rolle i populasjonsdynamikken i global insektfordeling for insekter som Helicoverpa armigera – bomullsbollormen, Mythimna separat – den orientalske hærormen, Spodoptera litura – taro larven, Spodoptera exigua – bete armyworm, som har blitt rapportert som alvorlige i Kina ^1,2,3,4. De lange reiseavstandene, sesongmessige bevegelser, høy fecundity av trekkende og økologiske faktorer har medført store vanskeligheter i prediksjon, prognose og kontroll av disse⁵. Overvåking av er nødvendig for å avdekke tilpasningsevne og atferdsendringer som letter trekkende i henhold til klimaendringer eller syklus⁶. For å opprettholde vekst, reproduksjon og overlevelse har insekter oppnådd sekvensiell tilpasningsevne under evolusjonen; Denne serien av adaptivt liv har generert mange endringer i reproduksjonssystemet, for eksempel migrasjonsstrategi som fører til kontroll av ovarieutvikling i den lange migrasjonsprosessen.

Ovarieutvikling er vanlig i trekkende, noe som påvirker veksten av befolkningen⁷. Derfor har eggstokkutvikling vært et hett tema for vandrende skadedyrforskning i lang tid. En rekke studier har ført til flere indikatorer for utvikling av eggstokkene og klassifiseringsstrategier. Hittil har flere metoder blitt brukt til å analysere eggstokkutvikling, for eksempel Loxostege sticticalis – engmøllovarieutviklingen som inkluderer det første fjærstadiet, den tidlige gyteperioden, gyteperioden og slutten av oviposisjon⁸. Noen forskere deler eggstokknivåer på grunnlag av eggeplommefargeutvikling i trekkende lepidopteriske , som S. exigua – betearmyworm, Pseudaletia unipuncta – den sanne hærormen, og Cnaphalocrocis medinalis – risbladmappen, etc.9,10,11,12. I tidligere studier ble ovarieutviklingsnivåene for, som bomullsbollorm og risbladrulle, delt inn i fem stadier: eggeplommeavsetningsstadium, eggkornmodenhetsstadium, moden venter på fødsel, topp ovogeneseperiode og sluttgytestadium^13,14. Den ovarieutviklingen av den europeiske maisboreren ble delt inn i seks utviklingsstadier: eggeplommeavsetningsstadium, eggmodning, pre-eggavsetning, toppgytestadium og sluttgytestadium¹⁵.

Videre har insekter av samme slekt forskjellige utviklingsstadier, for eksempel ovarieutviklingsnivåer av Spodoptera frugiperda – høstarmyworm – faller inn i fire nivåer: eggeplommeavsetningsstadium, moden venter på levering, topp ovi-positivitet og sluttgytestadium¹⁶. På den annen side har eggstokkutviklingen i Spodoptera exigua – betemoten – fem nivåer: gjennomsiktig, vitellogenese, modning av egg, eggfrigivelse og sen eggleggingsnivå¹⁷.

Tidligere studier kan bare klassifisere utvikling fra enkelt til flere eggstokkutviklingsnivåer ved hjelp av fargemodenhet av eggeplomme, oviposisjon og eggutvikling, men klassifisering kan ikke gjøres basert på anatomi i reproduktive systemet. Utviklingen av en eggstokk basert på morfogeneseanatomien er et mindre studert område. Her ble disseksjonsmetoden designet for å forutsi trekkende hunner i populasjonen ved hjelp av to eggstokkvevstyper, for å utarbeide deres reproduktive dynamikk basert på den anatomiske morfogenesen til -ovarieutviklingsstadiet og parringssekken – noe som gir direkte bevis for å skille trekkende villtypehunner.

Noen studier har funnet at trekkende Noctuidae insektarter ofte ble fanget av lyskastere¹⁸. Eggstokken til de fleste trekkende Noctuidae-insektarter er i de tidlige utviklingsstadiene i den første fasen av migrasjonen, og eggstokknivået øker med vandringsfremgangen. I denne studien beskrives disseksjonsmetoden for ovarieutviklingsgrader, for å studere de to reproduktive vevene til forskjellige kvinnelige populasjonsskadegjørere, fanget av søkelys. Denne metoden fremmer ikke bare forskningen for å forstå trekkdynamikken, men også fasiliteter innen insektklassifisering, insektfysiologistudie, skadedyrsprediksjon og prognoser for kvinnelige skadedyrsarter.

Protocol

MERK: Vær oppmerksom på sikkerhetsmålinger før du fanger trekkinsekter av vill type, det anbefales å bruke sikkerhetsutstyr (hansker, langermede skjorter og vernebriller). Slå også av fellen når den ikke er i bruk for å unngå andre sikkerhetsfarer og overoppheting av lyset. Det er viktig å følge sikkerhetsprotokoller før disseksjon, for eksempel bruk av hansker, vernebriller og laboratoriefrakk for å forhindre eksponering for kroppsvæsker og kjemikalier. 1. Fangst av innva…

Representative Results

Utvikling av eggeneOvennevnte protokoll ble brukt til å analysere utviklingen av egg i eggstokken. For dette formålet ble egg for det første klassifisert generelt i fire stadier for å skille tidlig og modent stadium av eggutvikling blant alle arter, for eksempel bollworm, armyworm, taro larve og betemølle. Her ble det tidlige stadium av fjæring (melkehvitt gjennomsiktig stadium) observert. Figur 2A viser at eggstokkene ennå ikke har begynt å utvikle seg, eggstokk…

Discussion

Ovarieanalysemetoder brukes rutinemessig i plantevern, for å belyse bevegelsen av insektflukt og populasjon for prognoser 19,20,21 og for å utdype de fysiologiske variasjonene hos insekter. Det har blitt lagt merke til at den unike migrasjonen og den raske spredningsevnen til vanlige i landbruket, som bollworm, armyworm, taro larve og betemøll, gjør det vanskelig for prediksjon fra andre regioner. Noen studier betraktet …

Materials

Digital camera	Canon ( China ) co., LTD	EOS 800D
Dropper	Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Ethanol absolute (99.7%)	Shanghai Hushi Laboratory Equipmentco., LTD
Forceps	Vetus Tools co., LTD	ST-14
GT75 type halogen headlamp (1000 W)	Shanghai Yadeng Industry co., LTD
Helicoverpa armigera, Mythimna separate, Spodoptera litura, Spodoptera exigua	Jiyang district, Jinan city, Shandong province, China
Measuring cylinder, beaker, flask	Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Net bag	Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD		0.5 m
Net cages	Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD		30 cm x 30 cm
Petri dishes	Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD		60 mm diameter