קיבוע מתלה משופר באמצעות מעיל חולדה בניסויי דיקור חולדות
Summary
כאן, אנו מציגים שיטת קיבוע מתלים משופרת באמצעות מעיל חולדות כדי לשתק חולדות ביעילות במהלך ניסויי דיקור. יתר על כן, המבנה והיישום של מנגנון קיבוע זה, כמו גם הוראות והערכה לשימוש בו בטיפול אלקטרואקופונקטורה, מובהר.
Abstract
במחקר ניסיוני בסיסי בדיקור, חולדות משמשות בדרך כלל כחיות מעבדה. עם זאת, קשה להם לשמור על יציבה קבועה. במהלך הליכי אלקטרואקופונקטורה, אימוביליזציה נכונה של חולדות היא חיונית. כיום נעשה שימוש בשיטות שונות של קיבוע חולדות, כולל קיבוע בהרדמה, קיבוע פלטפורמה גבוהה, קיבוע קשירה וקיבוע עם מעיל חולדה מתוצרת עצמית. עם זאת, שיטות אלה יש מגבלות שלהם, אשר עשויים להשפיע על יעילות ויכולת ההפעלה של הניסוי במידה מסוימת. פרוטוקול זה מציג שיטה להשעיה ותיקון של חולדות באמצעות בגדי חולדות. ראשית, חולדות לבושות במעילי חולדות התואמים את צורת גופן, תוך ניצול העדפתן לחושך ולהתחפרות. פעולת המחט יכולה להתבצע לאחר שהחולדות לבשו בגדי חולדות. כאשר הן מושעות, החולדות דוממות יחסית, מכיוון שגפיהן אינן יכולות לזוז. שיטת קיבוע זו מציעה לא רק יתרונות חסכוניים וידידותיים למשתמש, אלא גם מבטיחה קיבוע יציב ואמין של החולדות במצב רגוע ונוח. זה גם ממזער ביעילות את צריכת הזמן, שטח ניסיוני ומשאבי כוח אדם. בנוסף, שיטה זו מאפשרת חשיפה של רוב נקודות הדיקור המשמשות לדיקור סיני בחולדות. מאמר זה מתרכז בעיקר בהרכב המכשיר, הכולל מעיל חולדה שעוצב במיוחד, מתלה קיבוע מוגבה ומבני החיבור ביניהם. בנוסף, תוצג דוגמה להמחשה כדי להדגים את היישום של שיטת קיבוע תרחיף המבוססת על בגדי חולדות בהליכי דיקור אלקטרואקופונקטורה של חולדות.
Introduction
דיקור סיני הוא טיפול מסורתי המאופיין על ידי מחט בנקודות דיקור ספציפיות או עמדות אחרות כדי למנוע ולטפל במחלות. אלקטרואקופונקטורה משלבת מחטי פיליפורם עם גירוי חשמלי1, המאפשר שליטה מדויקת על כמות הגירוי על ידי התאמת פרמטרים רלוונטיים, ומקדם סטנדרטיזציהשל טיפול בדיקור 2. בשנים האחרונות, המחקר על מנגנוני הדיקור האלקטרואקופונקטורי המשיך להתרחב ולהעמיק 3,4, מה שהוביל לעלייה שנתית במחקרים המתמקדים במנגנוני אלקטרואקופונקטורה5.
במחקר בסיסי על אלקטרואקופונקטורה, חולדות הן החיות הנפוצות ביותר. במהלך טיפול אלקטרואקופונקטורה, על המושתל להישאר ללא תזוזה כדי להבטיח הליך חלק. שלא כמו בניסויים קליניים עם בני אדם, בעלי חיים קטנים המשמשים בניסויים בבעלי חיים אינם יכולים לעקוב אחר פקודות באופן מודע במהלך הליכי אלקטרואקופונקטורה ארוכים של 15-30 דקות. זה מציב בפני החוקרים אתגר עיקרי של השגת קיבעון יציב ואמין. קיבעון לא נכון עלול להוביל לרגשות שליליים כגון חרדה, דיכאון ופחד אצל בעלי חיים6, מה שלא רק מגביר את הסיכון לפגיעה בחולדות ואת הסיכוי להינשך עבור צוות הניסוי, אלא גם משפיע על היציבות והשכנוע של תוצאות המחקר.
במחקרים קודמים, חוקרים השתמשו לעתים קרובות בקיבוע הרדמה7, קיבוע פלטפורמה גבוהה8, קיבוע קשירה6,9, או קיבוע מעיל חולדה10 לפני פעולות דיקור או אלקטרואקופונקטורה. עם זאת, בהתחשב בהשפעות ההרדמה על הגוף11 ותפקוד המוח12, ובהתחשב בכך שדיקור סיני מבוצע על חולים בהכרה במקרים קליניים, הרדמה עשויה להשפיע במידה מסוימת על תוצאות המחקר. לכן, בהשוואה לקיבוע בהרדמה, קיבוע נוח של חולדות במצב ער הוא אפשרות טובה יותר.
עם זאת, במצב הלא מורדם, גם לשיטות קיבוע שונות יש מגבלות משלהן, כולל חשיפה מוגבלת לדיקור עקב כיסוי מעיל החולדה על חולדות 10, הצורך של לפחות שני פרטים לבצע את הפעולה13, קיבוע לא מתכוונן בגודל14, או מצב הלחץ של חולדות בתנוחה כפויה6. כדי לטפל בבעיות טכניות אלה, עיצבנו מעיל חולדה ומתלה קיבוע המתאים לטיפול בדיקור סיני ברוב חלקי גוף החולדה. זה יכול לעזור לחוקרים לבצע ביעילות הליכי דיקור עם חולדות.
הרציונל מאחורי פרוטוקול זה הוא כדלקמן: ראשית, כיסוי הראש הסגור על מעיל החולדה מנצל את הנטייה הטבעית של החולדות לחושך ולהתחפרות, ובכך מגביל את טווח פעילותן. שנית, חבלי הקשירה ליד מפרקי הגפיים של החולדות מספקים ריסון דחיסה פיזי, ומטילים מגבלות מסוימות על תנועותיהן. עם זאת, חולדות עדיין מסוגלות לקפוץ ולנוע אופקית אפילו בזמן שהן לובשות את הז’קט. לבסוף, מאחר שחולדות אינן יכולות לגעת בקרקע ללא נקודת כוח קבועה כאשר הן משעות, הוספנו מכשיר קיבוע מתלה למעיל החולדות, מה שהגביל עוד יותר את תנועותיהן והבטיח שימור מחטים. הרכב התקן הקיבוע מוצג באיור 1.
איור 1: תרשים סכמטי של מעיל החולדה וקיבוע התלייה. (A) המראה הכללי של מעיל החולדה במבט שטוח. (B) מבט תלת-ממדי על מעיל החולדה. (C) מעיל חולדה מותאם במיוחד עם חתך ליד נקודות הדיקור בראש ובגב. (D) איור של מספר חולדות התלויות בו זמנית על המדף המוגבה. 1: מבט כולל על בד; 2: שקע Forelimb; 3: מוצא גפיים אחוריות; 4: קשירת חבל; 5: חלל שנוצר לאחר תפירה; 6: חתך לחשיפת נקודות דיקור ראש; 7: חתך לחשיפת נקודות דיקור בגב ובמותניים. 8: תנוחת תפרים. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
Protocol
Representative Results
Discussion
אלקטרואקופונקטורה הוכחה כבעלת השפעות טיפוליות טובות על מחלות שונות כגון פגיעה קוגניטיבית 16,17, פגיעה בשריר הלב18 וכאב דלקתי19. כדי להבין את מנגנון הפעולה שלה, נערכו ניסויים בבעלי חיים בעיקר באמצעות חולדות. קיבוע בעלי החיים במהלך ההל?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים רוצים להביע את תודתם לפלטפורמת ציור המחקר המדעי Figdraw של הבית לחוקרים על שסיפקה את החומר ששימש ליצירת איור 2 במאמר זה, עם מזהה רישיון מורשה: URUUO5699e. עבודה זו קיבלה תמיכה ממענקים הניתנים על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81873380, 82074566), הקרן למדעי הטבע של מחוז חוביי (2022CFCO43), ופרויקט הבנייה הלאומי המפורסם של הסטודיו למורשת הרפואה הסינית המסורתית של המנהל הלאומי לרפואה סינית מסורתית ([2022] מס ‘5, [2022] מס ’75).
Materials
| 75% alcohol | Shandong Lircon medical technology co., ltd | 2002-0059 | Disinfection |
| acupuncture needles | Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. | needling | |
| Adult Sprague-Dawley (SD) rats | Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. | SCXK 2020-0001 | The recipient subjected to fixation |
| an elevated fixation rack | Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research Co., ltd | / | Fix rats |
| Hans electronic acupuncture apparatus | Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd. | HANS-200A | electroacupuncture |
| Medical cotton ball | Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. | 20172142357 | Disinfection |
| Pet electric clipper | Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory | / | Shave the hair of rats |
| Tweezers | Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd | Pinch cotton balls |
References
- Liu, Z., et al. Effect of Electroacupuncture on Urinary Leakage Among Women With Stress Urinary Incontinence: A Randomized Clinical Trial. The Journal of the American Medical Association. 317 (24), 2493-2501 (2017).
- Tsuei, J. J. Recent developments in clinical acupuncture. The American Journal of Chinese Medicine. 11 (1-4), 150-158 (1983).
- Liu, S., et al. Somatotopic Organization and Intensity Dependence in Driving Distinct NPY-Expressing Sympathetic Pathways by Electroacupuncture. Neuron. 108 (3), 436-450 (2020).
- Liu, S., et al. A neuroanatomical basis for electroacupuncture to drive the vagal-adrenal axis. Nature. 598 (7882), 641-645 (2021).
- Li, X., Wei, W., Wang, Y., Wang, Q., Liu, Z. Global Trend in the Research and Development of Acupuncture Treatment on Parkinson’s Disease From 2000 to 2021: A Bibliometric Analysis. Frontiers In Neurology. 13, 906317 (2022).
- Jiang, S., et al. Application Progress of fixation methods for rodents under non anesthesia in acupuncture and moxibustion experiments domestically and abroad. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 40 (12), 1509-1514 (2021).
- Jiang, H. Z., et al. Fixation method in the study of acupuncture intervention on rats. Journal of Shanxi College of Traditional Chinese Medicine. 20 (3), 169-171 (2019).
- Wang, Y., Ning, Y., Wang, P. Y., Yang, Y. Q. Method of Placing a Rat on an Elevated Platform for Acupuncture. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 31 (5), 289-292 (2012).
- Wang, F., Xiong, J., Zeng, F., He, Z. X. A fixation frame for acupuncture and moxibustion of Shu-Mu acupoint combination in rats. Acupuncture Research. 47 (10), 938-940 (2022).
- Tu, S., P, C., Y, Y. H. Fixation method for needle warming moxibustion treatment on swinging rats bound with coat. Chinese Journal of Comparative Medicine. 31 (5), 128-132 (2021).
- Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
- Kiyatkin, E. A., Brown, P. L. Brain and body temperature homeostasis during sodium pentobarbital anesthesia with and without body warming in rats. Physiology & Behavior. 84 (4), 563-570 (2005).
- He, C., Zhang, C., Zhou, S., Fan, Y. Using old meshy cage cover to make a rat fixating device for acupuncture study. Acupuncture Research. 46 (4), 348-350 (2021).
- Li, Y., Lin, N., Huang, Y., Xue, X., Liu, Q. A Newly-made Rat Holder for Convenient Acupuncture Needle Insertion. Acupuncture Research. 41 (5), 466-468 (2016).
- Bielitzki, J. T., Barbee, R. W., Garber, J. . Guide for the care and use of laboratory animals. 85 (3), 963-965 (2011).
- Zheng, X., et al. Electroacupuncture ameliorates beta-amyloid pathology and cognitive impairment in Alzheimer disease via a novel mechanism involving activation of TFEB (transcription factor EB). Autophagy. 17 (11), 3833-3847 (2021).
- Su, X., et al. Effectiveness and Safety of Acupuncture for Vascular Cognitive Impairment: A Systematic Review and Meta-Analysis. Frontiers In Aging Neuroscience. 13, 692508 (2021).
- Wang, Q., et al. Efficacy of electroacupuncture pretreatment for myocardial injury in patients undergoing percutaneous coronary intervention: A randomized clinical trial with a 2-year follow-up. International Journal of Cardiology. 194, 28-35 (2015).
- Zhang, R., Lao, L., Ren, K., Berman, B. M. Mechanisms of acupuncture-electroacupuncture on persistent pain. Anesthesiology. 120 (2), 482-503 (2014).
