Summary

एंटीवेनम उत्पादन के लिए टिटियस सेरुलेटस (ब्राजीलियाई पीला बिच्छू) का कैप्टिव रखरखाव और विष निष्कर्षण

Published: October 06, 2023
doi:

Summary

यहां, हम ब्राजील के स्वास्थ्य प्रणाली की मांग को पूरा करने के लिए बाद में बिच्छू एंटीवेनम उत्पादन के लिए जहर प्रदान करने के उद्देश्य से बड़े पैमाने पर टिटियस सेरुलेटस लुत्ज़ और मेलो, 1922 (ब्राजील के पीले बिच्छू) पति के लिए सफल रखरखाव और जहर निष्कर्षण प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं।

Abstract

बिच्छू का जहर कई उष्णकटिबंधीय और उपोष्णकटिबंधीय देशों में एक सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या है। टिटस सेरुलेटस लुत्ज़ और मेलो, 1922 (ब्राज़ीलियाई पीला बिच्छू) ब्राज़ील में प्रति वर्ष लगभग 150,000 विष के मामलों के लिए ज़िम्मेदार हैं, जिनमें से 10% को जीवन-धमकाने वाले विष प्रभावों को दूर करने के लिए एंटीवेनम उपचार की आवश्यकता होती है। इसलिए, हजारों टी. सेरुलेटस व्यक्तियों को विष निष्कर्षण के लिए नियंत्रित कैद की स्थिति में बनाए रखा जाता है, बाद में बिच्छू एंटीवेनम की राष्ट्रीय आपूर्ति के उत्पादन में उपयोग किया जाता है। Instituto Butantan ब्राजील में मुख्य एंटीवेनम-निर्माण प्रयोगशाला है, जो ब्राजील के स्वास्थ्य प्रणाली के लिए बिच्छू एंटीवेनम की लगभग 70,000 शीशियां प्रदान करती है। इस प्रकार, बड़े पैमाने पर, मानकीकृत जहर उत्पादन की सफलता के लिए पशुपालन प्रोटोकॉल और विष निष्कर्षण पद्धतियां महत्वपूर्ण बिंदु हैं। इस लेख का उद्देश्य टी. सेरुलेटस पशुपालन के कैद प्रोटोकॉल का वर्णन करना है, जिसमें पशुपालन दिनचर्या और विष निष्कर्षण प्रक्रियाओं को शामिल करना, अच्छी विनिर्माण प्रथाओं का पालन करना और पशु कल्याण सुनिश्चित करना है। ये प्रथाएं कैद में 20,000 जानवरों के रखरखाव की अनुमति देती हैं, जिसमें एंटीवेनम विनिर्माण मांग के अनुसार मासिक रूप से 3,000 से 5,000 बिच्छुओं की दिनचर्या होती है, जो औसतन 90% सकारात्मक निष्कर्षण प्राप्त करती है।

Introduction

बिच्छू आर्थ्रोपोड हैं जो वर्ग अरचिन्डा से संबंधित हैं, स्कॉर्पियोन्स का आदेश देते हैं, जिसमें लगभग 2,621 प्रजातियां 1,2 शामिल हैं। इन जानवरों की एक विस्तृत भौगोलिक सीमा है और अंटार्कटिका1 को छोड़कर सभी महाद्वीपों पर मौजूद हैं। बिच्छुओं के कारण होने वाले विष के परिणामस्वरूप विश्व स्तर पर हर साल हजारों लोगों की रुग्णता या मृत्यु हो जाती है। 2019 में, यह अनुमान लगाया गया था कि इन जानवरों के कारण 1.2 मिलियन से अधिक दुर्घटनाएं और 3,500 वार्षिक मौतें हुईं। ब्राजील में, मामलों की संख्या तेजी से बढ़ रही है, 100,000 के बाद से प्रति वर्ष 2017 4,5,6 से अधिक मामलों तक पहुंच रही है। पिछले दशकों में ब्राजील में देखे गए अनियंत्रित शहरीकरण, पर्याप्त सीवेज उपचार और कचरे के नियमित संग्रह और निपटान के बिना, पर्यावरणीय क्षरण और जलवायु परिवर्तन से जुड़े, ने आक्रामक बिच्छुओं के प्रसार के लिए स्थितियां प्रदान की हैं, जैसे कि टी। . ब्राजील में लगभग 178 बिच्छू प्रजातियां हैं, लेकिन चिकित्सा महत्व के डंक जीनस टिटस के कारण होते हैं, जिसमें चार प्रजातियां (टी. सेरुलेटस, टी. बाहिएन्सिस, टी. स्टिग्मुरस और टी. ऑब्स्कुरस) चिकित्सा चिंता का विषय हैं, जिसमें टिटियस सेरुलेटस सबसे गंभीर मामलों और मौतों के लिए जिम्मेदार है 7,9.

Instituto Butantan ब्राजील में मुख्य एंटीवेनम-निर्माण प्रयोगशाला है, जो ब्राजील की स्वास्थ्य प्रणाली के लिए बिच्छू एंटीवेनम की लगभग 70,000 शीशियां प्रदान करती है। संक्षेप में, एंटीवेनम निर्माण में शामिल कदमों में घोड़ों में विष-व्युत्पन्न एंटीजन का टीकाकरण, समृद्ध-एंटीबॉडी प्लाज्मा का संग्रह और शुद्धिकरण शामिल है, जिसके परिणामस्वरूप बिच्छू एंटीवेनम की 5 एमएल शीशियां होती हैं। प्रत्येक शीशी एंटीवेनम के प्रति एमएल कम से कम 1 मिलीग्राम बिच्छू के जहर को बेअसर करने में सक्षम है। आर्थ्रोपोड्स बायोटेरियम औद्योगिक केंद्र का एक अभिन्न अंग है, जो बिच्छू एंटीवेनम के लिए स्रोत सामग्री की आपूर्ति के लिए जिम्मेदार है।

Instituto Butantan में Arthropods Bioterium को मूल रूप से आर्थ्रोपोड्स की प्रयोगशाला का नाम दिया गया था और इसे 1967 में स्थापित किया गया था। हालांकि, यह केवल 1995 में था कि प्रयोगशाला विषैले आर्थ्रोपोड10,11 आवास के लिए समर्पित एक विशेष सुविधा में चली गई। उस समय, बिच्छुओं को बिना किसी नियंत्रित तापमान के 12 मीटर2 के कमरे में रखा गया था और लगभग 13 बाड़ों में वितरित किया गया था, प्रत्येक में अधिकतम 300 जानवर10 थे। वर्षों से जहर की बढ़ती मांग और जानवरों की संख्या में वृद्धि की आवश्यकता के कारण, जहर निष्कर्षण प्रक्रिया में सुधार के साथ, 2016 में एक बड़ा बदलाव हुआ। प्रयोगशाला को इंस्टीट्यूटो बुटांटन के औद्योगिक केंद्र में एकीकृत किया गया था और इसका नाम बदलकर आर्थ्रोपोड्स बायोटेरियम कर दिया गया था। इसके अतिरिक्त, 2016 में, बायोटेरियम एक नई उद्देश्य-निर्मित सुविधा में चला गया। नया बिच्छू कमरा 24 मीटर2 के क्षेत्र को कवर करता है और इसमें लगभग 48 पॉलीप्रोपाइलीन बाड़े होते हैं, प्रत्येक आवास 300 जानवरों तक होता है, जैसा कि चित्र 1 में दिखाया गया है। इसके परिणामस्वरूप कुल 10,000 से 20,000 व्यक्तियों को नियंत्रित कैप्टिव परिस्थितियों में बनाए रखा जाता है, जिसमें पूरे वर्ष भिन्नताएं होती हैं। बिच्छुओं को सख्त पशुपालन प्रोटोकॉल के तहत सावधानीपूर्वक प्रबंधित किया जाता है ताकि उच्च उत्पादन मांगों को पूरा करते हुए और जानवरों की देखभाल के लिए अच्छी प्रथाओं और नैतिक मानकों का पालन करते हुए उनका कल्याण सुनिश्चित किया जा सके। जहर निष्कर्षण के लिए, एक विशिष्ट कमरे को डिजाइन और निर्माण किया गया था, जिसमें दो एयरफ्लो अलमारियाँ थीं जैसा कि चित्र 2 ए में दिखाया गया है। ये अलमारियाँ निष्कर्षण प्रक्रिया के दौरान तकनीशियनों को जहर कणों को साँस लेने से रोकने के लिए सुरक्षा उपायों के रूप में काम करती हैं। किसी भी संदूषण से बचने और उनकी सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए सिंथेटिक एप्रन और FFP2 मास्क सहित तकनीशियनों के लिए व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण (पीपीई) अनिवार्य है।

Figure 1
चित्र 1: आर्थ्रोपोड्स बायोटेरियम के बिच्छू के कमरे का सामान्य दृश्य। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्र 2: कार्य क्षेत्र । () आर्थ्रोपोड्स बायोटेरियम के जहर निष्कर्षण कक्ष का सामान्य दृश्य। (बी) एयरफ्लो कैबिनेट काम की सतह। सभी सामग्रियों और उपकरणों को एयरफ्लो कैबिनेट कार्य सतह के शीर्ष पर तैयार और व्यवस्थित किया जाता है। काला तीर इलेक्ट्रोस्टिम्यूलेटर डिवाइस को इंगित करता है, और लाल तीर संदंश को इंगित करता है। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

आर्थ्रोपोड्स बायोटेरियम में लगभग 90% टी. सेरुलेटस बिच्छू विभिन्न साइटों से उत्पन्न होते हैं, जो इन जानवरों के लिए निगरानी और नियंत्रण कार्यक्रम के हिस्से के रूप में नगरपालिका स्वास्थ्य एजेंटों द्वारा एकत्र किए जाते हैं। बिच्छुओं को शहरी क्षेत्रों में पकड़ा जाता है और फिर एक सहयोगी कार्यक्रम के हिस्से के रूप में इंस्टीट्यूटो बुटानटन भेजा जाता है। T. serrulatus बिच्छू parthenogenetic हैं, जिसका अर्थ है कि जन्म unfertilized अंडे से संतानों के विकास का एक परिणाम के रूप में होता है, विपरीत लिंग12 के एक व्यक्ति की उपस्थिति के बिना. इस प्रकार के प्रजनन के कारण, कुछ जानवर हमारी सुविधा में कैद में पैदा होते हैं और नीचे वर्णित समान पशुपालन प्रोटोकॉल का पालन करते हुए, वयस्क चरण तक पहुंचने तक बनाए रखा जाता है। एक बार जब वे वयस्क अवस्था में पहुंच जाते हैं, तो उन्हें जहर निष्कर्षण दिनचर्या में जोड़ा जाता है। आगमन पर, बिच्छू प्रारंभिक जांच से गुजरते हैं, और अच्छी स्वास्थ्य स्थितियों वाले लोगों को सामूहिक बाड़ों में रखा जाता है जिसमें अधिकतम 350 व्यक्ति होते हैं, जो उनके मूल से विभाजित होते हैं। प्रत्येक बाड़े के लिए, एक नियंत्रण प्रपत्र प्रतिदिन भरा जाता है, जो भोजन की तारीख और पेश किए गए शिकार के प्रकार (क्रिकेट या तिलचट्टा), पानी की आपूर्ति, सफाई प्रक्रियाओं, मृत जानवरों की संख्या और बाड़े के अंदर शेष जीवित लोगों की संख्या पर डेटा प्रदान करता है।

पूर्व-निर्धारित एजेंडे में, जानवरों को विद्युत उत्तेजना के अधीन किया जाता है, और सैकड़ों व्यक्तियों के परिणामस्वरूप जहर को तब लियोफिलिज्ड किया जाता है, जिसके परिणामस्वरूप फ्रीज-सूखे जहर के बैच होते हैं। इस प्रक्रिया से प्राप्त मानकीकृत जहर विनिर्माण प्रक्रिया के हिस्से के रूप में घोड़े के टीकाकरण के लिए नियत है, साथ ही सक्रिय पदार्थ और अंतिम उत्पाद के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए संदर्भ सामग्री प्रदान करने के लिए भी है।

दुनिया में बहुत कम सुविधाएं हैं जो इतनी बड़ी संख्या में बिच्छुओं को रखने और जानवरों के अच्छे विनिर्माण प्रथाओं और नैतिक उपयोग के अनुसार जहर निकालने की मात्रा का प्रदर्शन करने में सक्षम हैं, जैसा कि इंस्टीट्यूटो बुटानटन के आर्थ्रोपोड्स बायोटेरियम में किया गया है। इसलिए, हमारा उद्देश्य बिच्छू रखरखाव प्रोटोकॉल और जहर निष्कर्षण प्रक्रियाओं का वर्णन करना है टी सेरुरुलेटस पति, जो बिच्छू एंटीवेनम के उत्पादन के लिए जहर की आवश्यक मात्रा सफलतापूर्वक प्रदान करते हैं।

Protocol

अकशेरुकी जानवरों से जुड़े प्रोटोकॉल को जानवरों के अनुमोदन के उपयोग और देखभाल पर इंस्टीट्यूटो बुटानटन की समिति से छूट दी गई है। हालांकि, यहां वर्णित बिच्छुओं का रखरखाव नैतिक मापदंडों का पालन करता है, औ…

Representative Results

प्रत्येक प्रक्रिया के लिए तीस मानक परिचालन प्रक्रियाएं (एसओपी) विकसित की गईं, जो तकनीशियनों के बीच प्रक्रियाओं की पुनरावृत्ति और गुणवत्ता मानकों के अनुपालन को सुनिश्चित करती हैं। निष्कर्षण प्रक्रि?…

Discussion

वर्णित विधियों का अनुप्रयोग हमें बड़ी संख्या में रखने की अनुमति देता है टी सेरुलेटस व्यक्तियों और हमें वार्षिक विष उत्पादन के लिए आवश्यक बिच्छुओं की संख्या की लगातार भविष्यवाणी देता है। इस तरह, ह?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

कोई नहीं

Materials

Carboard sheet NA NA
Egg tray NA NA cardboard 36 places egg trays
Electro stimulator device Instituto Butantan ART-FV-01 Internally designed for the venom extraction 
Kraft paper NA NA regular kraft paper
Making tape NA NA White masking tape (24 mm x 50 m)
Polyproplene container NA NA 70 L Polypropylene box (H – 35 cm, W – 35.5 cm, L – 72 cm)
Polyproplene tray NA NA Polypropylene tray (H – 3.0 cm, W – 18.5 cm, L – 30 cm)
Self-adhesive plastic NA NA

References

  1. Polis, G. A. . The biology of scorpions. , (1990).
  2. Lacerda, A. B., et al. Scorpion envenomation in the state of São Paulo, Brazil: Spatiotemporal analysis of a growing public health concern. PLoS One. 17 (4), 0266138 (2022).
  3. Reckziegel, G. C., Pinto, V. L. Scorpionism in Brazil in the years 2000 to 2012. Journal of Venomous Animals and Toxins Including Tropical Diseases. 20, 46 (2014).
  4. Guerra-Duarte, C., et al. Scorpion envenomation in Brazil: Current scenario and perspectives for containing an increasing health problem. PLoS Neglected Tropical Diseases. 17 (2), 0011069 (2023).
  5. Pimenta, R. J. G., et al. Selected to survive and kill: Tityus serrulatus, the Brazilian yellow scorpion. PLoS One. 14 (4), e0214075 (2019).
  6. Lacerda, A. B., et al. Detection of areas vulnerable to scorpionism and its association with environmental factors in São Paulo, Brazil. Acta Tropica. 230, 106390 (2022).
  7. Torrez, P. P. Q., Dourado, F. S., Bertani, R., Cupo, P., França, F. O. d. e. S. Scorpionism in Brazil: exponential growth of accidents and deaths from scorpion stings. Journal of the Brazilian Society of Tropical Medicine. 52, 20180350 (2019).
  8. Amado, T. F., et al. Vulnerable areas to accidents with scorpions in Brazil. Tropical Medicine & International Health. 26 (5), 13561 (2021).
  9. Brasil, Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. . Manual de diagnóstico e tratamento de acidentes por animais peçonhentos. , (2001).
  10. Candido, D. M., Lucas, S. Maintenance of scorpions of the genus Tityus Koch (Scorpiones, Buthidae) for venom obtention at Instituto Butantan, São Paulo, Brazil. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases. 10 (1), 000100007 (2004).
  11. Lucas, S. O. Laboratório de Artrópodes do Instituto Butantan e os aracnídeos peçonhentos. História Ciências Saúde Manguinhos. 10 (3), 000300011 (2003).
  12. Braga-Pereira, G. F., Santos, A. J. Asexual reproduction in a sexual population of the Brazilian yellow scorpion (Tityus serrulatus, Buthidae) as evidence of facultative parthenogenesis. The Journal of Arachnology. 49 (2), (2021).
check_url/65737?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Chiariello, T. M., Candido, D. M., Oliveira, R. N., Auada, A. V. V., Hui Wen, F. Captive Maintenance and Venom Extraction of Tityus serrulatus (Brazilian Yellow Scorpion) for Antivenom Production. J. Vis. Exp. (200), e65737, doi:10.3791/65737 (2023).

View Video