Summary

Rhodiola crenulata için Saha Toplama ve Laboratuvar Rutin Tanımlaması

Published: October 27, 2023
doi:

Summary

Burada, Rhodiola Crenulata’nın habitat, bitki morfolojisi, tıbbi özellikler, mikroskobik özellikler ve ince tabaka kromatografisinden tanımlanmasını açıklıyoruz.

Abstract

Tıbbi materyallerin tanımlanması, ilaç güvenliğinin öncülü ve garantisidir. Bilimsel araştırmacıların çoğu, bitkilerin basit, hızlı, etkili ve ucuz tanımlama sürecini tercih etmek zorundadır. Rhodiola crenulata , çoğunlukla Çin’in Tibet, Yunnan ve Sichuan bölgelerinde dağıtılan, yüksek rakımlarda yetişen geleneksel bir Tibet tıbbıdır. Rhodiola crenulate , anti-inflamatuar, anti-hipoksi ve antioksidan özellikler gibi çoklu biyoaktivitelere sahiptir ve gelişme için büyük bir potansiyele sahiptir. Artan pazar talebi ve kaynak içeriğindeki hızlı düşüşle birlikte, Rhodiola crenulata’nın çok sayıda kafası karışmış ürünü insanları rahatsız ediyor. Bu nedenle, bu protokol, rutin laboratuvar testleri ile birlikte sahada Rhodiola crenulata tanımlanması için standart bir süreç sunar. Habitat, mikroskobik özellikler ve ince tabaka kromatografisinin kombinasyonu, şüphesiz Rhodiola crenulata’yı hızlı, verimli ve ekonomik bir şekilde tanımlayacak ve Tibet tıbbının sürekli gelişimine ve tıbbi malzemelerin kalite kontrolüne katkıda bulunacaktır.

Introduction

Bitkisel tıbbın Çin’de uzun bir geçmişi ve zengin uygulama deneyimi vardır ve Shennong’un bitkisel klasiği1’deki ilk sistematik kayıttır. Sıtmaya uygulanan artemisinin keşfi, bitkisel ilaçların gelişimini yeni bir aşama1’e teşvik etti. Bitkisel tıbbın kesin mekanizmasını ortaya çıkarmak için modern bilimsel teknolojinin kullanılması, bitkisel ilaçlara olan kullanım oranını ve talebi artırarak bunun için yeni bir uluslararası pazar açmaktadır 2,3,4. Ancak, bu bir dizi olumsuz etkiye yol açmıştır. Profesyonel olmayanlar, bitkisel ilaçların özelliklerini belirsiz bir şekilde anlamaktadır, bu da bitkisel ilaç kullanımını büyük bir güvenlik riskiyle karşı karşıya bırakmaktadır5.

Rhodiola türünün bitkilerinden biri olan Rhodiola crenulata, esas olarak Tibet, kuzeybatı Yunnan ve Çin’in batı Sichuan’ında yayılış gösterir (Şekil 1)6,7. Rhodiola crenulata “qi’yi canlandırma ve kan dolaşımını teşvik etme, nabzı temizleme ve astımı yatıştırma” işlevi ile hipoksik ilişkili hastalıkların tedavisi için salidrosid, tirosol, gallik asit ve diğer bileşikleri içerir8,9,10,11. Saha araştırması, Rhodiola crenulata’nın 4.000-5.600 m yükseklikte alpin talus bölgelerinde, oluk yamaçlarında ve kaya yarıklarında bulunabileceğini göstermektedir. Yetiştirme ortamı soğuk, güneş ışığı ve yoğun radyasyonla doludur ve alpin çayır ekosistemine aittir. Rhodiola crenulata büyüme alanına göre lameller ve nokta benzeri popülasyonlarda dağılabilir ve gen akışı çapraz tozlaşma yoluyla gerçekleştirilebilir.

Rhodiola cinsinin polen kürtajı, yasadışılık kazısı ve yozlaşmış ekolojik çevre, Rhodiola crenulata’yı nesli tükenmekte olan bir türhaline getirmektedir 6,12. Rhodiola crenulata’nın yüksek tıbbi değeri göz önüne alındığında, sahte ürünlerin piyasaya akması bekleniyor. Bu makale, Rhodiola crenulata habitatını ve bazı uygun laboratuvar tanımlama yöntemlerini sunmaktadır. İlk olarak, Rhodiola crenulata’nın büyüme ortamını ve tıbbi özelliklerini gözlemledik. İkinci olarak, tıbbi tozun mikro yapısı mikroskopla gözlendi. Son adım kilit noktadır. Rhodiola crenulata’nın temsili bileşenleri, bu bileşenlerin belirli bir maddedeki farklı adsorpsiyon veya çözünme özelliklerine göre ayrıldı ve tanımlandı. Tıbbi bitkilerin DNA tabanlı kimlik doğrulama veya metabolomik analiz yöntemleri karmaşık ve pahalıdır13. Bu temel, kullanışlı ve ekonomik yöntemler, Rhodiola crenulata’yı hızlı bir şekilde tanımlayabilir.

Protocol

Rhodiola crenulata Çin’in Sichuan Eyaleti, Ganzi Tibet Özerk İli, Zhuoda Kar Dağı, Ganzi İlçesi’nden (N 31.44570°, D 99.96086°, 4892 m) toplandı. Bitkiler, Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Etnik Tıp Okulu’nda Profesör Yi Zhang tarafından gerçek olarak doğrulandı. 1. Rhodiola crenulata koleksiyonu Rhodiola crenulata’nın habitat haritasını fotoğraflayın. Rhodiola crenulata’nın tüm bitkisi…

Representative Results

Bu deneysel protokol, sahada Rhodiola crenulate’ın tanımlanmasını ve toplanmasını açıklar. Rhodiola crenulate , yüksek rakımlarda alpin talus bölgelerinde, oluk yamaçlarında ve kaya yarıklarında yaşama eğilimindedir. Rhodiola crenulate’in habitatı, bütün bitkisi, çiçeği ve yaprakları Şekil 2’de gösterilebilir. Rhodiola crenulate kırmızımsı kahverengi bir köksapa sahiptir (Şekil 3A). Tıbbi tozun…

Discussion

Dünyada 90’dan fazla Rhodiola bitkisi türü vardır ve tüm türlerin %60’ından fazlası Çin’de bulunur, Rhodiola crenulata, Rhodiola rosea, Rhodiolas achalinensis ve Rhodiola algida17 dahil olmak üzere yaygın olanlar. Çin Farmakopesi’nin (2020) ilk bölümünde kaydedilen Rhodiola crenulata, yüksek irtifalarda yetişen geleneksel bir Tibet tıbbıdır. Rhodiola crenulata için pazar talebi her yıl artmaktadır, bu nedenle kaynağın doğru ku…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81973569, 82274207 ve 82104533), TCM Chengdu Üniversitesi’nin Xinglin Akademik Araştırma Teşvik Projesi (XKTD2022013) ve Ningxia Temel Araştırma ve Geliştirme Programı (2023BEG02012) tarafından desteklenmiştir.

Materials

0.22 μm millipore filter Millipore SLGP033RB
Automatic sampling machine CAMAG ATS 4
Chloral hydrate Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd ST1002
Chromatographic sample bottles Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd C0000008
Conical flask Sichuan Shubo Co., Ltd 1121
Cover glass Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd 10211818c
Dissecting needle Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd BY-5026
Electronic balance SHIMADZU ATX124
Ethyl acetate Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd 2022120901
Formic acid Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd 2021110801
Gallic acid Chengdu Herbpurify Co., Ltd M-017
Glycerol Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd 10010618
High speed  crusher Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd FW-100
Methanol Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd 20230108
Microscope Chongqing Oprec Nistrument Co.,  Ltd B203
Microscope slide Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd 7105P-G
Oven Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd DHG-8145
Pharmacopoeia sieve Hangzhou Xingrun sieve factory 572423281330
Pipette Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd 120302008
Salidroside Chengdu Herbpurify Co., Ltd H-040
Saturate tank  Yancheng Liegu Technology Co., Ltd 10*20 P-1
Silica gel plate Yantai Jiangyou Silica Gel Development  Co., Ltd HSG20211227
Trichloromethane Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd 20221013-1
Tweezer  Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd 130302027
Tyrosol Chengdu Herbpurify Co., Ltd L-042
Ultrasound equipment Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd SB-8200DTS
Volumetric pipet Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd 120301006

References

  1. Zhang, J., et al. Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health. Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964 (2021).
  2. Yin, R., et al. The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson’s Disease. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331 (2021).
  3. Li, F. S., Weng, J. K. Demystifying traditional herbal medicine with modern approach. Nature Plants. 3, 17109 (2017).
  4. da Fonseca, L. R., et al. Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential. The Scientific World Journal. 2020, 6598434 (2020).
  5. Aziato, L., Antwi, H. O. Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study. BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142 (2016).
  6. Tao, H., et al. Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study. Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).
  7. Wang, Y., et al. The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome. Food & Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).
  8. Xie, N. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240 (2022).
  9. Wang, X., et al. Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling. Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).
  10. Ma, D., et al. Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis. Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345 (2022).
  11. Wang, X., et al. Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1α/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway. Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801 (2019).
  12. d’Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia. Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38 (2014).
  13. Sánchez, M., González-Burgos, E., Divakar, P. K., Gómez-Serranillos, M. P. DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS). Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601 (2020).
  14. . Rhodiola renulata (Hook.fil & Thomson) H.Ohba Available from: https://www.gbif.org/species/4200529 (2023)
  15. . Plant + data center Available from: https://www.iplant.cn/ (2023)
  16. . Chinese virtual herbarium Available from: https://www.cvh.ac.cn/ (2023)
  17. Cunningham, A. B. There "ain’t no mountain high enough"?: The drivers, diversity and sustainability of China’s Rhodiola trade. Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379 (2020).
  18. Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC. Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).
  19. Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics. Molecules. 25 (18), 4062 (2020).
  20. Zhao, W., et al. HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China. PloS One. 9 (11), 112869 (2014).
  21. Yu, Y. Y. Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).
  22. Lv, X. M. Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC. China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).
  23. Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. & Thomson) H.Ohba. Molecules. 26 (23), 7383 (2021).
  24. Ma, D., et al. Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species. Molecules. 26 (22), 6855 (2021).
  25. Li, X. H., et al. Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics. Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).
  26. Liu, Y., et al. Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes. Chinese Medicine. 10, 28 (2015).
check_url/65947?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Wang, J., Xie, N., Li, M., Su, J., Hou, Y., Zhang, Y., Wang, X. Field Collection and Laboratory Routine Identification of Rhodiola crenulata. J. Vis. Exp. (200), e65947, doi:10.3791/65947 (2023).

View Video