Stratégie de gavage pour la formule de décoction de la médecine traditionnelle chinoise chez les souris modèles d’ostéosarcome
Summary
Le protocole fournit un processus de standardisation détaillé de la formule de décoction et de la technique de gavage avec la décoction de Yiqi Jiedu dans le modèle murin d’ostéosarcome comme exemple. Il décrit la protection des animaux et améliore la fiabilité des données de recherche, fournissant des stratégies efficaces pour étudier l’efficacité thérapeutique et les mécanismes moléculaires des formules de décoction in vivo.
Abstract
La formule de décoction est la forme posologique la plus couramment utilisée en médecine traditionnelle chinoise et appliquée dans la pratique clinique depuis des milliers d’années par administration trans-orale, qui se caractérise par un effet rapide, une absorption facile et un traitement individualisé basé sur les syndromes spécifiques des patients. La qualité de la formule de décoction est directement responsable de l’efficacité clinique de la médecine traditionnelle chinoise ; Par conséquent, le processus de normalisation de la formule de décoction est important pour éviter les différences de qualité de décoction causées par des facteurs subjectifs. Pendant ce temps, en raison des limites de la réalisation d’expériences cliniques, les petits animaux porteurs de maladies humaines, tels que les souris, sont souvent utilisés dans la recherche médicale pour explorer l’efficacité thérapeutique et les mécanismes complets de différentes interventions, y compris la formule de décoction pour la médecine traditionnelle chinoise. Par conséquent, en tant que méthode d’administration trans-orale importante, la technique de gavage qualifié est particulièrement importante pour éviter les dommages potentiels à l’œsophage et le déversement de médicaments, ce qui garantira une quantité égale de médicament administrée à chaque animal modèle, conduisant à des résultats expérimentaux précis. De plus, la méthode standardisée de préparation de la formule de décoction et la stratégie de gavage qualifiée sont nécessaires pour protéger le bien-être des animaux et minimiser le nombre d’animaux utilisés. Ici, nous avons rapporté un processus de standardisation détaillé de la formule de décoction et de la technique de gavage avec la décoction de Yiqi Jiedu dans un modèle murin d’ostéosarcome comme exemple. L’efficacité a été évaluée par le volume tumoral. Ce protocole maximisera la protection des animaux et améliorera la fiabilité des données de recherche, fournissant ainsi des stratégies efficaces pour l’étude future de l’efficacité thérapeutique et des mécanismes moléculaires de la formule de décoction pour la médecine traditionnelle chinoise in vivo.
Introduction
La formule de décoction est la forme posologique la plus couramment utilisée de la médecine traditionnelle chinoise et des médicaments liquides 1,2. La formule de décoction de la médecine traditionnelle chinoise est traitée en décoctant les herbes dans de l’eau après avoir été trempées, puis filtrées pour éliminer la lie.
Parce que la formule de décoction peut être individualisée en fonction des besoins cliniques, en particulier en fonction des caractéristiques du traitement fondé sur des preuves dans la médecine traditionnelle chinoise, cette forme posologique par administration trans-orale est appliquée dans la pratique clinique depuis des milliers d’années avec des avantages spécifiques et irremplaçables 3,4. La qualité de la formule de décoction est directement liée à l’efficacité clinique. Par conséquent, la formule de décoction doit être préparée selon les principes des méthodes de décoction standardisées afin de garantir que les ingrédients actifs sont extraits et protégés au maximum3. Pendant ce temps, les médicaments prêts à la décoction sont la principale forme d’herbes chinoises brutes utilisées dans la pratique clinique ; les normes de qualité et les méthodes de production des médicaments prescrits prêts à la décoction doivent être conformes aux dispositions de la pharmacopée chinoise2. De plus, les médicaments prescrits prêts à la décoction doivent être trempés dans de l’eau potable froide pendant au moins 30 minutes avant d’être décoctés dans un pot pharmaceutique spécial en chauffant5. Des études ont montré que la plupart des ingrédients actifs peuvent être extraits par décoction deux fois, et le Code de pratique pour l’administration des salles de décoction des médecines traditionnelles chinoises dans les établissements médicaux prescrit également que la décoction doit être faite deux fois 4,6,7. Si des herbes chinoises spéciales, telles que celles à texture dure ou toniques, sont prescrites, il est recommandé de prolonger le temps de décoction. Les ustensiles de décoction et les récipients de stockage qui entrent directement en contact avec la formule de décoction, à partir du récipient dans lequel les médicaments prescrits prêts à décocter sont trempés, doivent être chimiquement stables et avoir des couvercles, tels que des casseroles, de la céramique, du verre et de l’acier inoxydable. Cependant, les produits en aluminium et en plastique ordinaire ne doivent pas être utilisés, tandis que le fer et autres ustensiles corrosifs doivent être interdits pour éviter d’éventuelles réactions chimiques, qui réduiront l’efficacité thérapeutique et même produiront des effets nocifs 4,6,7.
En raison des limites de la réalisation d’expériences cliniques, les petits animaux porteurs de maladies humaines, tels que les souris, sont souvent utilisés dans la recherche médicale pour explorer l’efficacité thérapeutique et les mécanismes complets de différentes interventions, y compris la formule de décoction de la médecine traditionnelle chinoise 8,9 ; Cependant, contrairement aux humains, les formules de décoction doivent être préparées tous les jours, mélangées et fraîchement administrées 2 fois par jour en pratique clinique. Les animaux ne sont pas en mesure de prendre volontairement leurs médicaments à temps avec la dose requise, et la plupart des expériences animales liées à la médecine traditionnelle chinoise sont actuellement l’administration orale par gavage des formules de décoction. Les formules de décoction utilisées pour les expériences in vivo sur les animaux doivent être préparées à l’avance, aliquotes, stockées à -20 °C et décongelées juste avant utilisation 3,4,10. De plus, l’immobilisation des animaux et la manipulation des aiguilles par gavage augmentent le risque de blessures inutiles et d’émotions négatives. Par conséquent, en tant que méthode importante d’administration transorale de médicaments, la technique de gavage qualifié est particulièrement importante pour éviter d’éventuelles lésions œsophagiennes et un déversement de médicament, garantissant ainsi que chaque animal modèle reçoit une quantité égale de médicaments à base de plantes prescrits pour obtenir des résultats expérimentaux précis. Ici, nous fournissons un protocole de gavage pour la formule de décoction de la médecine traditionnelle chinoise.
Protocol
Representative Results
Discussion
L’efficacité clinique des herbes prescrites en médecine traditionnelle chinoise est largement associée à la dose administrée et à la forme posologique ; Par conséquent, l’établissement d’une stratégie de décoction standardisée et d’un processus d’administration qualifié sont nécessaires dans la pratique clinique, ainsi que pour améliorer la fiabilité des résultats expérimentaux.
Dans cette étude, nous avons d’abord fourni une stratégie détaillée pour la décoct…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les travaux actuels sont soutenus par des subventions de la (1) National Nature Science Foundation (81973877 et 82174408), (2) National Key R&D Program of China (2020YFE0201600), (3) Shanghai Top Priority Research Center construction project (2022ZZ01009), (4) Shanghai Collaborative Innovation Center of Industrial Transformation of Hospital TCM Preparation, et (5) Research Projects Within Budget of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (2021LK047).
Materials
| 143B cell line | ATCC | CRL-8303 | osteosarcoma cell line |
| Anesthesia machine | Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd | R500IP | The Equipment of Anesthesia mice |
| Automatic cell counter | Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd | IC1000 | Counting cells |
| BALB/c athymic mice | Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd. | Male | Animal |
| Barbed skullcap herb | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 20230606 | Decoction-ready medicines |
| Basement Membrane Matrix | Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd | 356234, BD, Matrigel | re-suspende cells |
| Centrifuge tube (15 mL) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 430790, Corning | Centrifuge the cells |
| Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm) | RWD Life Science Co., Ltd. | C21014-12 | Component of gastric perfusion device |
| Gauze | Haishi Hainuo Group Co., Ltd. | LC45 | Decoction filter |
| Ginseng | Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd. | 20220704-2 | Decoction-ready medicines |
| Hedyotis diffusa | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 2023071107 | Decoction-ready medicines |
| isoflurane | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | VETEASY | Anesthesia mice |
| Micro-volume syringe | Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd | 0-50 μL | Inject precise cells into the tibia |
| Phosphate-buffered saline | Beyotime Biotechnology | ST447 | wash the human osteosarcoma cells |
| Rubber bands | Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd. | XPJ | Fixing gauze on the measuring cup |
| Syringe (1 mL ) | Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd. | SBM0040 | Component of gastric perfusion device |
| Trypsin (0.25%) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 25200056, Gibco | trypsin treatment of cells |
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