ओस्टियोसारकोमा मॉडल चूहों में पारंपरिक चीनी चिकित्सा के काढ़े सूत्र के लिए नलिका रणनीति
Summary
प्रोटोकॉल एक उदाहरण के रूप में ओस्टियोसारकोमा माउस मॉडल में यिकी जिएड काढ़े के साथ काढ़ा सूत्र और नलिका तकनीक की एक विस्तृत मानकीकरण प्रक्रिया प्रदान करता है। यह पशु संरक्षण का वर्णन करता है और अनुसंधान डेटा की विश्वसनीयता में सुधार करता है, चिकित्सीय प्रभावकारिता और विवो में काढ़े सूत्रों के आणविक तंत्र की जांच के लिए प्रभावी रणनीति प्रदान करता है।
Abstract
काढ़ा सूत्र पारंपरिक चीनी चिकित्सा में सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला खुराक रूप है और ट्रांस-ओरल प्रशासन द्वारा हजारों वर्षों से नैदानिक अभ्यास में लागू किया जाता है, जो रोगियों के विशिष्ट सिंड्रोम के आधार पर त्वरित प्रभाव, आसान अवशोषण और व्यक्तिगत उपचार की विशेषता है। काढ़े सूत्र की गुणवत्ता पारंपरिक चीनी चिकित्सा की नैदानिक प्रभावकारिता के लिए सीधे जिम्मेदार है; इसलिए, व्यक्तिपरक कारकों के कारण काढ़े की गुणवत्ता में अंतर से बचने के लिए काढ़े सूत्र की मानकीकरण प्रक्रिया महत्वपूर्ण है। इस बीच, नैदानिक प्रयोगों को करने की सीमाओं के कारण, चूहों जैसे मानव रोगों वाले छोटे जानवरों को अक्सर चिकित्सा अनुसंधान में चिकित्सीय प्रभावकारिता और विभिन्न हस्तक्षेपों के व्यापक तंत्र का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, जिसमें पारंपरिक चीनी चिकित्सा के लिए काढ़ा सूत्र भी शामिल है। नतीजतन, एक महत्वपूर्ण ट्रांस-ओरल प्रशासन विधि के रूप में, कुशल नलिका तकनीक संभावित अन्नप्रणाली क्षति और दवा रिसाव से बचने के लिए विशेष रूप से महत्वपूर्ण है, जो प्रत्येक मॉडल जानवर को प्रशासित की जा रही दवा की समान मात्रा सुनिश्चित करेगी, जिससे सटीक प्रयोगात्मक परिणाम प्राप्त होंगे। इसके अलावा, काढ़ा सूत्र तैयार करने और कुशल नलिका रणनीति की मानकीकृत विधि पशु कल्याण की रक्षा और उपयोग किए जाने वाले जानवरों की संख्या को कम करने के लिए आवश्यक है। यहां, हमने एक उदाहरण के रूप में ओस्टियोसारकोमा माउस मॉडल में यिकी जिएडू काढ़े के साथ काढ़ा सूत्र और गैवेज तकनीक की एक विस्तृत मानकीकरण प्रक्रिया की सूचना दी। प्रभावकारिता का मूल्यांकन ट्यूमर की मात्रा द्वारा किया गया था। यह प्रोटोकॉल पशु संरक्षण को अधिकतम करेगा और अनुसंधान डेटा की विश्वसनीयता में सुधार करेगा, इसलिए भविष्य में चिकित्सीय प्रभावकारिता और विवो में पारंपरिक चीनी चिकित्सा के लिए काढ़े सूत्र के आणविक तंत्र की जांच के लिए प्रभावी रणनीति प्रदान करेगा।
Introduction
काढ़ा सूत्र पारंपरिक चीनी दवा और तरलऔषधीय दवाओं 1,2 का सबसे अधिक इस्तेमाल किया खुराक रूप है. पारंपरिक चीनी चिकित्सा के काढ़े के फार्मूले को भिगोने के बाद जड़ी-बूटियों को पानी में काढ़ा करके संसाधित किया जाता है, इसके बाद ड्रेग्स को त्यागने के लिए छानने के बाद।
क्योंकि काढ़ा सूत्र नैदानिक आवश्यकताओं के आधार पर individualized किया जा सकता है, विशेष रूप से पारंपरिक चीनी चिकित्सा में सबूत आधारित उपचार की विशेषताओं के साथ लाइन में, ट्रांस मौखिक प्रशासन के माध्यम से इस खुराक फार्म विशिष्ट और अपूरणीय लाभ 3,4 के साथ साल के हजारों के लिए नैदानिक अभ्यास में लागू किया गया है. काढ़े सूत्र की गुणवत्ता सीधे नैदानिक प्रभावकारिता से संबंधित है। इसलिए, काढ़ा सूत्र मानकीकृत काढ़े विधियों के सिद्धांतों के आधार पर तैयार किया जाना चाहिए ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि सक्रिय तत्व अधिकतम रूप से निकाले और संरक्षित हैं3. इस बीच, काढ़े-तैयार दवाएं नैदानिक अभ्यास में उपयोग की जाने वाली कच्ची चीनी जड़ी-बूटियों का मुख्य रूप हैं; निर्धारित काढ़े-तैयार दवाओं के गुणवत्ता मानकों और उत्पादन विधियों को चीनी फार्माकोपिया2 के प्रावधानों का पालन करना चाहिए। इसके अलावा, निर्धारित काढ़े-तैयार दवाओंको गर्म करके एक विशेष दवा बर्तन में काढ़े जाने से पहले कम से कम 30 मिनट के लिए ठंडे पीने के पानी में भिगोया जाना चाहिए। अध्ययनों से पता चला है कि सक्रिय अवयवों के अधिकांश दो बार के लिए decocting द्वारा निकाला जा सकता है, और चिकित्सा संस्थानों में पारंपरिक चीनी दवाओं के काढ़े कमरे के प्रशासन के लिए अभ्यास संहिता भी काढ़े दो बार 4,6,7 किया जाना निर्धारित करता है. यदि विशेष चीनी जड़ी बूटी, जैसे कि कठोर बनावट या टॉनिक के साथ, निर्धारित हैं, तो काढ़े का समय बढ़ाने की सिफारिश की जाती है। काढ़े के बर्तन और भंडारण कंटेनर जो सीधे काढ़े के सूत्र के संपर्क में आते हैं, उस कंटेनर से शुरू होते हैं जिसमें निर्धारित काढ़े-तैयार दवाएं भिगोई जाती हैं, रासायनिक रूप से स्थिर होनी चाहिए और पुलाव, चीनी मिट्टी की चीज़ें, कांच और स्टेनलेस स्टील जैसे ढक्कन होने चाहिए। हालांकि, एल्यूमीनियम और साधारण प्लास्टिक उत्पादों का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए, जबकि लोहे और अन्य संक्षारक बर्तनों को संभव रासायनिक प्रतिक्रियाओं से बचने के लिए निषिद्ध किया जाना चाहिए, जो चिकित्सीय प्रभावकारिता को कम करेगा और यहां तक किहानिकारक प्रभाव 4,6,7 उत्पन्न करेगा।
नैदानिक प्रयोगों प्रदर्शन की सीमाओं के कारण, चूहों जैसे मानव रोगों असर छोटे जानवरों, अक्सर चिकित्सा अनुसंधान में उपयोग किया जाता है चिकित्सीय प्रभावकारिता और पारंपरिक चीनी चिकित्सा 8,9 के काढ़े सूत्र सहित विभिन्न हस्तक्षेपों के व्यापक तंत्र का पता लगाने के लिए; हालांकि, मनुष्यों के विपरीत, काढ़े के सूत्रों को हर दिन तैयार किया जाना चाहिए, एक साथ मिलाया जाना चाहिए, और नैदानिक अभ्यास में दिन में 2x ताजा प्रशासित किया जाना चाहिए। पशु स्वेच्छा से आवश्यक खुराक के साथ समय पर अपनी दवाएं लेने में असमर्थ हैं, और पारंपरिक चीनी चिकित्सा से संबंधित अधिकांश पशु प्रयोग वर्तमान में काढ़े के सूत्रों के नली-आधारित मौखिक प्रशासन हैं। विवो पशु प्रयोगों में के लिए इस्तेमाल काढ़ा सूत्रों अग्रिम में तैयार किया जाना चाहिए, aliquoted, -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत औरबस 3,4,10 का उपयोग करने से पहले पिघलना. इसके अलावा, घटिया पशु स्थिरीकरण और नलिका सुई हेरफेर अनावश्यक चोटों और नकारात्मक भावनाओं के जोखिम को बढ़ाते हैं। इसलिए, ट्रांस-ओरल ड्रग डिलीवरी की एक महत्वपूर्ण विधि के रूप में, कुशल नलिका तकनीक विशेष रूप से संभव एसोफेजियल चोट और दवा रिसाव से बचने के लिए महत्वपूर्ण है, इस प्रकार यह सुनिश्चित करना कि प्रत्येक मॉडल जानवर सटीक प्रयोगात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए निर्धारित हर्बल दवा की समान मात्रा प्राप्त करता है। यहां, हम पारंपरिक चीनी चिकित्सा के काढ़े सूत्र के लिए एक गैवेज प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
पारंपरिक चीनी चिकित्सा में निर्धारित जड़ी बूटियों की नैदानिक प्रभावकारिता काफी हद तक प्रशासित खुराक और खुराक के रूप में जुड़ी हुई है; इसलिए, नैदानिक अभ्यास में एक मानकीकृत काढ़ा रणनीति और एक कुशल प्र?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
वर्तमान कार्य (1) राष्ट्रीय प्रकृति विज्ञान फाउंडेशन (81973877 और 82174408), (2) चीन के राष्ट्रीय कुंजी अनुसंधान एवं विकास कार्यक्रम (2020YFE0201600), (3) शंघाई शीर्ष प्राथमिकता अनुसंधान केंद्र निर्माण परियोजना (2022ZZ01009), (4) अस्पताल टीसीएम तैयारी के औद्योगिक परिवर्तन के शंघाई सहयोगी नवाचार केंद्र, और (5) पारंपरिक चीनी चिकित्सा के शंघाई विश्वविद्यालय (2021LK047) के बजट के भीतर अनुसंधान परियोजनाओं।
Materials
| 143B cell line | ATCC | CRL-8303 | osteosarcoma cell line |
| Anesthesia machine | Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd | R500IP | The Equipment of Anesthesia mice |
| Automatic cell counter | Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd | IC1000 | Counting cells |
| BALB/c athymic mice | Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd. | Male | Animal |
| Barbed skullcap herb | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 20230606 | Decoction-ready medicines |
| Basement Membrane Matrix | Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd | 356234, BD, Matrigel | re-suspende cells |
| Centrifuge tube (15 mL) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 430790, Corning | Centrifuge the cells |
| Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm) | RWD Life Science Co., Ltd. | C21014-12 | Component of gastric perfusion device |
| Gauze | Haishi Hainuo Group Co., Ltd. | LC45 | Decoction filter |
| Ginseng | Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd. | 20220704-2 | Decoction-ready medicines |
| Hedyotis diffusa | Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd. | 2023071107 | Decoction-ready medicines |
| isoflurane | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | VETEASY | Anesthesia mice |
| Micro-volume syringe | Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd | 0-50 μL | Inject precise cells into the tibia |
| Phosphate-buffered saline | Beyotime Biotechnology | ST447 | wash the human osteosarcoma cells |
| Rubber bands | Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd. | XPJ | Fixing gauze on the measuring cup |
| Syringe (1 mL ) | Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd. | SBM0040 | Component of gastric perfusion device |
| Trypsin (0.25%) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 25200056, Gibco | trypsin treatment of cells |
References
- Gao, S. Discussion on advantages and improvement of traditional Chinese medicine decoction. Chinese Community Physicians (Comprehensive Edition). (21), 12 (2005).
- Chinese Pharmacopoeia Commission. . Pharmacopoeia of the People’s Republic of China. , (2015).
- An, Y., et al. Interpretation on specification of traditional Chinese medicine decoction. Herald Med. 42 (11), 1648-1652 (2023).
- Chen, S., et al. Research strategies in standard decoction of medicinal slices. China J Chinese Materia Medica. 41 (8), 1367-1375 (2016).
- Luo, F. Effect of soaking traditional Chinese medicine before decoction on active components. Shanghai Yiyao. 40 (9), 63-64 (2019).
- Liu, F., Chen, M. On the standardization of decocting methods of modern decoction. Global Trad Chinese Med. 7 (5), 377-378 (2014).
- Li, X., et al. Influence of decocting times and instrument on the quality of decoction. J Trad Chinese Med. 50 (6), 550-552 (2009).
- Li, X., et al. Herbal decoctosome is a novel form of medicine. Sci China. Life Sci. 62 (3), 333-348 (2019).
- Lan, Y., Hu, Y., Huang, W., Tang, S. Reflections on PK – PD model based on animal experiments for study of Chinese medicine. Lishizen Med Materia Medica Res. 34 (2), 395-397 (2023).
- Li, Y., Bai, M., Song, Y., Guo, H., Miao, M. Research and reflection on standard decoction of Chinese materia medica. Chinese Trad Herbal Drugs. 49 (17), 3977-3980 (2018).
- . Estimating the maximum safe starting dose in initial clinical trials for therapeutics in adult healthy volunteers Available from: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/estimating-maximum-safe-starting-dose-initial-clinical-trials-therapeutics-adult-healthy-volunteers (2005)
- Chang, J., et al. Intratibial osteosarcoma cell injection to generate orthotopic osteosarcoma and lung metastasis mouse models. J Vis Exp. (176), 63072 (2021).
- He, C. Laboratory animal science. , (2006).
- Patten, A. R., Fontaine, C. J., Christie, B. R. A comparison of the different animal models of fetal alcohol spectrum disorders and their use in studying complex behaviors. Fronti Pedia. 2, 93 (2014).
- Jones, C. P., Boyd, K. L., Wallace, J. M. Evaluation of mice undergoing serial oral gavage while awake or anesthetized. J Am Assoc Lab Animal Sci. 55 (6), 805-810 (2016).
- Recena Aydos, L., et al. Nonalcoholic fatty liver disease induced by high-fat diet in C57bl/6 models. Nutrients. 11 (12), 3067 (2019).
