تم وصف نموذج الفأر لاستئصال الكبد الجزئي 2/3 (66٪) جيدا في الأدبيات ، ولكن نادرا ما تم استخدام عمليات استئصال الكبد الممتدة التي تحاكي متلازمة الحجم الصغير بعد زراعة الكبد. وصفنا إجراء استئصال الكبد الممتد بنسبة 78٪ في نموذج فأر ينتج عنه حوالي 50٪ من الفتك بعد الجراحة في الفئران السليمة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يستخدم استئصال الكبد الجزئي 2/3 في الفئران في الأبحاث لدراسة قدرة الكبد على التجدد واستكشاف نتائج استئصال الكبد في عدد من نماذج المرض. في استئصال الكبد الجزئي الكلاسيكي 2/3 في الفئران ، يتم استئصال اثنين من فصوص الكبد الخمسة ، وهما الفص الأيسر والمتوسط الذي يمثل حوالي 66 ٪ من كتلة الكبد ، في كتلة مع بقاء متوقع بعد الجراحة بنسبة 100 ٪. تعتبر عمليات استئصال الكبد الجزئي الأكثر عدوانية أكثر تحديا من الناحية الفنية ، وبالتالي نادرا ما يتم استخدامها في الفئران. طورت مجموعتنا نموذجا للفأر لتقنية استئصال الكبد الممتد حيث يتم استئصال ثلاثة من فصوص الكبد الخمسة ، بما في ذلك الفصوص العلوية اليسرى والمتوسطة واليمنى ، بشكل منفصل لإزالة ما يقرب من 78٪ من إجمالي كتلة الكبد. هذا الاستئصال الممتد ، في الفئران السليمة ، يترك كبدا متبقيا لا يمكنه دائما الحفاظ على التجدد الكافي وفي الوقت المناسب. الفشل في التجديد يؤدي في نهاية المطاف إلى 50 ٪ الفتك بعد العملية الجراحية في غضون 1 أسبوع بسبب الفشل الكبدي الخاطف. يمثل هذا الإجراء لاستئصال الكبد الممتد بنسبة 78٪ في الفئران نموذجا جراحيا فريدا لدراسة متلازمة الحجم الصغير وتقييم الاستراتيجيات العلاجية لتحسين تجديد الكبد والنتائج في إعداد زراعة الكبد أو استئصال الكبد الممتد للسرطان.
المقدمة
نماذج استئصال الكبد الجراحية للفأر والجرذان ، التي تم وصفها لأول مرة في عام 1931 ، هي النماذج التجريبية الأكثر شيوعا المستخدمة لدراسة الأساس الجزيئي لتجديد الكبد. يمكن أن تكون مفيدة أيضا في أبحاث العلوم الانتقالية لاختبار وتطوير استراتيجيات لتحسين النتائج بعد استئصال الكبد الممتد أو زرع ترقيع الكبد دون المستوى الأمثل1،2،3،4. يستلزم استئصال الكبد الجزئي (PH) في الفئران إزالة ما يقرب من 2/3 (66٪) من إجمالي كتلة الكبد (TLM) ، والتي عند إجراؤها على السليمة لها نتائج استثنائية5. الإجراء قصير المدة ، ويمكن استنساخه بسهولة ب....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على الطرق الموضحة في بروتوكول الإجراء هذا من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام (IACUC) في مركز بيث إسرائيل ديكونيس الطبي (BIDMC). تم الانتهاء من جميع التجارب وفقا والامتثال ل IACUC وإرشادات مرفق البحوث الحيوانية BIDMC.
1. إعداد الماوس قبل الجراحة
- حلق بطن الفأر من منتصف القص إلى المنطقة فوق العانة باستخدام كليبرز .
- تحفيز التخدير العام مع 1-4 ٪ إيزوفلوران في 100 ٪ الأكسجين. عند التخدير ، ضع الفأر مستلقيا في المجال الجراحي مع وسادة تدفئة تحته. قبل إجراء شق ، اضغط بإحكام على إصبع القدم للتأكد من غياب منعكس الدواسة (إذا كان موجودا ، فسوف يستجيب). اضبط مستوى التخدير حسب الحاجة لتحقيق حالة من الت....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
من المتوقع أن يؤدي استئصال الكبد الممتد الناجح بنسبة 78٪ إلى وفيات بنسبة 50٪ في غضون أسبوع واحد في الفئران البالغة السليمة التي تتراوح أعمارها بين 8-12 أسبوعاو 16. عند إجراء ذلك بشكل صحيح ، من المتوقع الحد الأدنى من فقدان الدم. يمكن التحكم في النزيف المتبقي الذي يستمر عن طريق الضغط اليدوي. غالبا ما تحدث الوفاة المحيطة بالجراحة في غضون 24 ساعة من الجراحة بسبب أخطاء فنية. تشمل الأعطال الفنية إصابة غير مقصودة للأوعية الدموية الكبيرة مما يسبب نزيفا مستعصيا أثناء العملية. نزيف كبير بعد العملية الجراحية.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
لإجراء عملية استئصال الكبد الممتدة بنسبة 78٪ بنجاح مما تسبب في فتك بنسبة 50٪ في الفئران ، من الأهمية بمكان أن يتم استئصال كل فص كبد بدقة. لا يمكن تحقيق هذا المستوى من الكفاءة والدقة إلا إذا تم تنفيذ الإجراء بشكل متكرر. يختلف منحنى التدريب بين المشغلين ولكنه يتطلب عادة 3-6 أشهر من الممارسة. إن استئصال الكبد الذي يزيل أقل من 78٪ من TLM سيؤدي إلى ارتفاع معدلات البقاء على قيد الحياة ، في حين أن استئصال الكبد الذي يزيل أكثر من 78٪ من TLM سيؤدي إلى مزيد من الفتك. كل استئصال الفص يمثل تحديا ، وإن لم يكن بنفس القدر.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
لا يوجد تضارب في المصالح للإفصاح عنه.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من خلال منح NIH R01 DK063275 و HL086741 إلى CF. PB و TA حاصلان على زمالة NRSA من منحة التدريب NHLBI T32 HL007734.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 2 × 2 شاش | Covidien | 2146 | الجراحة: تشريح |
| 5-O خياطة نايلون أحادية الشعيرات | واحة | 50-118-0631 | الجراحة: إغلاق الجلد |
| 5-O خياطة الحرير | أدوات العلوم الدقيقة | 18020-50 | الجراحة: ربط فص الكبد |
| 5-O خياطة فيكريل | الإيثيكون | NC9335902 | الجراحة: إغلاق جدار البطن |
| ملقط | أدسونجراحة برينتري العلمية | FC028 | : تشريح |
| مسحات الكحول (2) | BD | 326895 | مطهر |
| بوبرينورفين تركيبة ممتدة المفعول | Zoopharm | N / A | Analgesia |
| Cordless Trimmer | Braintree Scientific | CLP-9868-14 | حلاقة |
| ملقط منحني | Braintree Scientific | FC0038 | الجراحة: تشريح |
| Hemostat | Braintree Scientific | FC79-1 | الجراحة: تشريح |
| Isoflurane التخدير المستنشق | باترسون البيطري | RXISO-250 | التخدير العام |
| (2 فتحة) (2) | برينتري العلمية | ACD-001 | : لعقد مباعدات صغيرة |
| مثبت مغناطيسي (4 فتحات) ؛ | Braintree Scientific | ACD-002 | : لعقد ضاغطات صغيرة |
| Microscissors | Braintree Scientific | SC-MI 151 | الجراحة: تشريح |
| صينية العمليات | Braintree Scientific | ACD-0014 | الجراحة: لإنشاء مجال جراحي ؛ |
| بوفيدون اليود 10٪ مشرط مطهر (2) | مطهر | MDS093901ZZ Medline | |
| (15 شفرة) | أسبن الجراحية | 371615 | الجراحة: تشريح |
| مقص حاد (منحني) | برينتري العلمية | SC-T-406 | : تشريح |
| مقص حاد (مستقيم) | برينتري العلمية | SC-T-405 | : |
| صغير أدوات تطبيق القطن ذات الرؤوس | فيشر Scientific | 23-400-118 | الجراحة: تشريح |
| ملقط الأنسجة (مستقيم × 2) | Braintree Scientific | FC1001 | : تشريح |
| وسادة الاحترار (18 × 26 بوصة) | Stryker | TP 700 | الاحترار |
| Stryker | TP 700 | ||
| ضام مقبض سلك الاحترار (2) ؛ | برينتري العلمية | ACD-005 | : لتسهيل التعرض للتجويف البريتوني |
| التخدير الحيواني الصغير Xenotec Isoflurane | Braintree Scientific | EZ-108SA | التخدير العام: يحتوي على جهاز vaborizer ووحدة التحكم Isoflurane ، وغرفة الحث ، ومنظم / خرطوم ، وقناع الوجه (M) |
المراجع
- Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28 (1), 3-11 (2008).
- Higgins, G., Anderson, R. Experimental pathology of the liver I. Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
