نقدم هنا بروتوكولا لدراسة حركة الأسنان التقويمية (OTM) ، حيث يعمل كنموذج مناسب للتحقيق في آليات تكيف العظام ، وارتشاف الجذر ، واستجابة خلايا العظام للمنبهات الميكانيكية. يوفر هذا الدليل الشامل معلومات مفصلة عن نموذج OTM ، واكتساب التصوير المقطعي المحوسب الدقيق ، والتحليل اللاحق.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تمثل حركة الأسنان التقويمية (OTM) عملية ديناميكية يخضع فيها العظم السنخي للارتشاف في مواقع الضغط والترسب في مواقع التوتر ، التي تنظمها الخلايا الآكلة للعظم وبانيات العظم ، على التوالي. تعمل هذه الآلية كنموذج قيم لدراسة الجوانب المختلفة لتكيف العظام ، بما في ذلك ارتشاف الجذر والاستجابة الخلوية لمحفزات القوة الميكانيكية. يقدم البروتوكول الموضح هنا نهجا مباشرا للتحقيق في OTM ، حيث يحدد 0.35 N كقوة مثالية في نموذج فأر يستخدم زنبركا لولائيا من النيكل والتيتانيوم (NiTi). باستخدام تحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق ، قمنا بقياس OTM من خلال تقييم التناقض في المسافة الخطية عند تقاطع الأسمنت والمينا. تضمن التقييم أيضا تحليلا لارتشاف الجذر الالتهابي الناجم عن تقويم الأسنان ، وتقييم المعلمات مثل كثافة المعادن الجذرية والنسبة المئوية لحجم الجذر لكل حجم إجمالي. يساهم هذا البروتوكول الشامل في تعزيز فهمنا لعمليات إعادة تشكيل العظام وتعزيز القدرة على تطوير استراتيجيات فعالة لعلاج تقويم الأسنان.
المقدمة
إعادة تشكيل العظام هي عملية مستمرة تنظمها الخلايا الآكلة للعظم ، وبانيات العظم ، وخلايا بطانة العظام ، والخلايا العظمية ، وهي ضرورية للحفاظ على سلامة الهيكل العظمي البالغ1،2. مدفوعة في المقام الأول بتمايز ونشاط الخلايا الآكلة للعظم وبانيات العظم ، تتضمن هذه العملية الديناميكية ارتشاف وترسب العظام ، الناجم عن الإجهاد الميكانيكي وتحميل3،4،5.
تلعب التجارب على دورا محوريا في توضيح الآليات البيولوجية والخلوية المعقدة التي تقوم عليها حركة تقويم الأسنان (OTM) 6,7....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تلتزم جميع الإجراءات التزاما صارما بالمعايير الأخلاقية التي وضعتها لجنة الأخلاقيات بجامعة ميناس جيرايس الفيدرالية (رقم 166/2022). قبل كل تجربة ، يكون حساب حجم العينة إلزاميا. استخدم ذكور الفئران من النوع البري C57BL6 / J البالغة من العمر 8-10 أسابيع والتي تزن حوالي 20-30 جم. يجب وضع الفئران في قفص داخل غرفة يتم الحفاظ عليها عند 25 درجة مئوية ، مع الالتزام بدورة مظلمة لمدة 12 ساعة / 12 ساعة. بعد مرفق الملف ، يجب إطعام بنظام غذائي ناعم. يجب أن تشمل المراقبة اليومية تقييمات لوزن الجسم والصحة العامة.
1. إعادة تشكيل العظام السنخية المستحثة ميكانيكيا
- باستخدام كماشة القطع البعيدة ، قم بقص زنبرك NiTi المفتوح 0.25 × 0.76 ب....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
يتيح هذا البروتوكول التحقيق في نموذج ماوس OTM باستخدام زنبرك لولبي NiTi. مع تطبيق قوة 0.35 نيوتن ، كان متوسط مسافة CEJ على جانب التحكم بين الأضراس الأولى والثانية 243.69 ميكرومتر (الشكل 1A ، الخط A) ، بينما تم قياس جانب OTM عند 284.66 ميكرومتر (الشكل 1A ، الخط B). كان الفرق بين OTM وجوانب التحكم 40.97 ميكرومتر (الشكل 1 ب). تم قياس المسافة الخطية بين CEJ بين الأضراس الأولى والثانية من نصف الفك العلوي الأيمن (جانب OTM.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
هنا ، نصف بروتوكولا موحدا مصمما لتوضيح الآليات الخلوية والجزيئية الكامنة وراء إعادة تشكيل العظام أثناء OTM. يتطلب الفهم الشامل لهذه الآليات في الفئران بروتوكولا مخططا بدقة لضمان الدقة والموثوقية 7,11. أظهرت الدراسات التي أجرتها مجموعتنا البحثية أن هذا البروتوكول يقلل بشكل فعال من تباين المشغل من خلال دمج مقياس شد وجهاز مصمم خصيصا ، مما يجعل 0.35 نيوتن القوة المثلى ل OTM في نموذج الماوس4،16،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.
شكر وتقدير
ونود أن نعرب عن خالص تقديرنا للآنسة بياتريس م. زاوكا على إسهامها في الرسم التخطيطي وللسيدة إيلما مارسال دي سوزا على دعمها التقني. J.A.A.A. حاصلة على زمالة ممنوحة من مؤسسة كارلوس شاغاس فيلهو دي أمبارو à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ ، E-26/200.331/2024) ، البرازيل. تم دعم هذه الدراسة من قبل المجلس الوطني للتنمية العلمية والتكنولوجيا (406928/2023-1) ، ومؤسسة أمبارو أ بيسكيزا دو ستادو دي ميناس جيرايس و Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (رمز المالية 001) ، البرازيل. يشكر المؤلفون الأستاذ الدكتور إدواردو إتش إم نونيس من LabBio / UFMG على تحليل التصوير المقطعي بالأشعة السينية.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| أسيتون | سيجما ألدريتش | 67-64-1 | |
| كماشة قطع بعيدة | كوينيلاتو | QO.700.00 | |
| مقياس الدينامومتر | SHIMPO | FGE-5XY | |
| إضاءة الألياف | كول بارمر | N / A | |
| كيتامين | سينتيك | 100477-72-3 | |
| زنبرك NiTi مفتوح 0.25 × 0.76 | لانسر لتقويم الأسنان | ||
| Ø 0.20 مم مستدير من الكروم والنيكل (CrNi) | Morelli | 55.01.208 | |
| سلك تقويم الأسنان المرن الصلب المستدير CrNi & Oslash ؛ 0.50 مم (.020 بوصة) | Morelli | 55.01.050 | |
| سلك التعادل المستدير CrNi & Oslash ؛ 0.20 مم (.008 بوصة) | Morelli | 55.01.208 | |
| مجهر مجسم | Quimis | Q7740SZ | |
| Transbond Plus Self Etcching Primer | 3M | LE-Q100-1004-7 | |
| Weingart Plier | Quinelato | QO.120.00 | |
| Xylazine | Syntec | 23076-35-9 | |
| < قوي >MicroCT Analysis< / قوي> | |||
| Skyscan 1174v2 | Bruker | 1174v2 | |
| Software | |||
| NRecon | Skyscan | N / A | |
| DataViewer | Skyscan | N / A | |
| CTAn | Skyscan | N / A | |
| تقليد | N / A | N |
المراجع
- Kohli, N., et al. Bone remodelling in vitro: Where are we headed?: -A review on the current understanding of physiological bone remodelling and inflammation and the strategies for testing biomaterials in vitro. Bone. 110, 38-46 (2018).
- Epsley, S., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
