Summary

إجراء جراحة حج القحف لتصوير الدماغ المزمن

Published: February 15, 2008
doi:

Summary

هذا الفيديو وبروتوكول لشرح كيفية زرع زجاج النافذة المغطاة الجمجمة لدى القوارض. ويمكن استخدام هذه المستحضرات لمزمنة في الجسم الحي two الفوتون التصوير من القشرة المخية الحديثة على جداول زمنية لأشهر. ويمكن أيضا استخدامه لأنواع أخرى من التصوير ، والتصوير الضوئي بما في ذلك إشارة جوهرية.

Abstract

تقنيات التصوير أصبحت ذات أهمية متزايدة في دراسة وظائف المخ. من بينها ، برز ثنائي الفوتون المجهري المسح بواسطة أشعة الليزر كطريقة مفيدة للغاية ، لأنه يسمح للدراسة الدماغ سليمة حية. مع الاستعدادات المناسبة ، وهذا الأسلوب يسمح للمراقبة المنطقة القشرية نفس مزمنة ، من دقائق إلى أشهر. في هذا الفيديو ، نظهر استعدادا لتصوير المزمن في الجسم الحي من الدماغ باستخدام اثنين من الفوتون المجهري. كان في البداية هذه التقنية التي بدأها الدكتور كاريل سفوبودا ، وهو الآن في معهد هوارد هيوز الطبي محقق في مزرعة Janelia. ويمكن استخدام مستحضرات مثل واحد هو موضح هنا لتصوير هيكل القشرة المخية الحديثة (على سبيل المثال ، وديناميات الشجيرية ومحواري) ، لتسجيل نشاط الخلايا العصبية باستخدام الكالسيوم الحساسة الأصباغ ، لالقشرية صورة ديناميكية تدفق الدم ، أو للدراسات الذاتية التصوير الضوئي. التصوير العميق للاللحاء الجديد هو ممكن مع أفضل إطار عملية جراحية في الجمجمة. تعمل في ظل ظروف بالغة العقيمة من الممكن تجنب الإصابة بالأمراض ، جنبا إلى جنب مع استخدام العناية القصوى للا تضر الأم الجافية أثناء الجراحة ، سوف يؤدي إلى النوافذ الزجاجية المغطاة ناجحة وطويلة الأمد في الجمجمة.

Protocol

تخدير الفئران مع isoflurane (4 ٪ لتحريض ، 1،5-2 ٪ للجراحة) باستخدام IACUC الإجراءات المعتمدة. من المهم أن تستخدم الذيل و / أو يقرص اصبع القدم من أجل ضمان مخدرا تماما الحيوانية. باستخدام الانتهازي القوارض ، وحلق الشعر من الجزء الخلفي من الر…

Discussion

كما بينا في شريط الفيديو والتكميلية في الأرقام ، وإعداد إطار الجمجمة ، جنبا إلى جنب مع استخدام اثنين من الفوتون المجهري ، هو أداة قوية جدا للدراسة في بنية الجسم الحي وظيفة من وظائف القشرة المخية الحديثة. تقنية يتطلب تدريب صارم لتصبح مألوفة مع التشريح ذات الصلة والإجراءات الجراح…

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Carprofen (Rimadyl) Drug Pfizer    
Isoflurane (Aerrane) Surgery Baxter    
Dexamethasone Drug Baxter    
Ortho-Jet Powder Reagent LANG   To be mixed with the acrylic
Jet-Acrylic Liquid Reagent LANG   To be mixed with Ortho-Jet Powder
Round Glass Cover Slip Tool Electron Microscopy Sciences 72195-05 5 mm diameter
Gelfoam Surgery Pharmacia & Upjohn Co. (Pfizer)    
Titanium bars are custom-made

References

  1. Svoboda, K., Denk, W., Kleinfeld, D., Tank, D. W. In vivo dendritic calcium dynamics in neocortical pyramidal neurons. Nature. 85, 161-165 (1997).
  2. Lendvai, B., Stern, E. A., Chen, B., Svoboda, K. Experience-dependent plasticity of dendritic spines in the developing rat barrel cortex in vivo. Nature. 404, 876-881 (2000).
  3. Trachtenberg, J. T., Chen, B., Knott, G. W., Feng, G., Sanes, J. R., Welker, E., Svoboda, K. Long-term in vivo imaging of experience-dependent synaptic plasticity in adult cortex. Nature. 420, 788-794 (2002).
  4. Portera-Cailliau, C., Weimer, R. M., DePaola, V., Caroni, P., Svoboda, K. Diverse modes of axon elaboration in the developing neocortex. PLoS Biol. 3, (2005).
  5. Holtmaat, A., Wilbrecht, L., Knott, G. W., Welker, E., Svoboda, K. Experience-dependent and cell-type-specific spine growth in the neocortex. Nature. 441, 979-983 (2006).
check_url/680?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Mostany, R., Portera-Cailliau, C. A Craniotomy Surgery Procedure for Chronic Brain Imaging. J. Vis. Exp. (12), e680, doi:10.3791/680 (2008).

View Video