जीर्ण ब्रेन इमेजिंग के लिए एक Craniotomy सर्जरी प्रक्रिया
Summary
यह वीडियो और प्रोटोकॉल का प्रदर्शन कैसे एक गिलास कवर कृन्तकों में कपाल खिड़की समाविष्ट करने के लिए. ये तैयारियाँ दो photon महीने के समय के तराजू पर neocortex के इमेजिंग vivo में जीर्ण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. यह भी इमेजिंग ऑप्टिकल आंतरिक संकेत इमेजिंग सहित अन्य प्रकार के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Abstract
इमेजिंग तकनीक के अध्ययन मस्तिष्क समारोह में तेजी से महत्वपूर्ण होते जा रहे हैं. उनमें से दो फोटोन लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी एक अत्यंत उपयोगी तरीका के रूप में उभरा है, क्योंकि यह जीना बरकरार मस्तिष्क के अध्ययन की अनुमति देता है. उचित तैयारी के साथ, इस तकनीक का एक ही cortical क्षेत्र के अवलोकन लंबे समय की अनुमति देता है मिनट से महीने के लिए. इस वीडियो में, हम दो photon माइक्रोस्कोपी का उपयोग कर मस्तिष्क के vivo इमेजिंग में जीर्ण के लिए एक तैयारी दिखाते हैं. इस तकनीक शुरू डा. कैरेल SVOBODA, जो अब फार्म Janelia एक हॉवर्ड ह्यूजेस मेडिकल इंस्टीट्यूट अन्वेषक है ने बीड़ा उठाया है. यहाँ दिखाया गया है एक तरह तैयारी neocortical संरचना (उदाहरण के लिए, वृक्ष के समान और axonal गतिशीलता), इमेजिंग के लिए इस्तेमाल किया जा कैल्शियम के प्रति संवेदनशील रंगों का उपयोग, छवि cortical रक्त प्रवाह की गतिशीलता के लिए, या आंतरिक ऑप्टिकल इमेजिंग अध्ययन के लिए neuronal गतिविधि रिकॉर्ड कर सकते हैं. Neocortex के दीप इमेजिंग इष्टतम कपाल विंडो सर्जरी के साथ संभव है. सबसे बाँझ संक्रमण से बचने के संभव शर्तों के तहत आपरेटिंग, चरम देखभाल का उपयोग करने के लिए सर्जरी के दौरान dura मेटर नुकसान नहीं के साथ साथ, सफल और लंबे समय से स्थायी गिलास कवर कपाल खिड़कियों में परिणाम देगा.
Protocol
Discussion
जैसा कि हम वीडियो में और अनुपूरक आंकड़े, कपाल विंडो तैयारी, दो photon माइक्रोस्कोपी के उपयोग के साथ संयुक्त में पता चला है, और neocortex की संरचना और समारोह के vivo में अध्ययन के लिए एक बहुत शक्तिशाली उपकरण है. तकनीक प्रासंग?…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Carprofen (Rimadyl) | Drug | Pfizer | ||
| Isoflurane (Aerrane) | Surgery | Baxter | ||
| Dexamethasone | Drug | Baxter | ||
| Ortho-Jet Powder | Reagent | LANG | To be mixed with the acrylic | |
| Jet-Acrylic Liquid | Reagent | LANG | To be mixed with Ortho-Jet Powder | |
| Round Glass Cover Slip | Tool | Electron Microscopy Sciences | 72195-05 | 5 mm diameter |
| Gelfoam | Surgery | Pharmacia & Upjohn Co. (Pfizer) |
References
- Svoboda, K., Denk, W., Kleinfeld, D., Tank, D. W. In vivo dendritic calcium dynamics in neocortical pyramidal neurons. Nature. 85, 161-165 (1997).
- Lendvai, B., Stern, E. A., Chen, B., Svoboda, K. Experience-dependent plasticity of dendritic spines in the developing rat barrel cortex in vivo. Nature. 404, 876-881 (2000).
- Trachtenberg, J. T., Chen, B., Knott, G. W., Feng, G., Sanes, J. R., Welker, E., Svoboda, K. Long-term in vivo imaging of experience-dependent synaptic plasticity in adult cortex. Nature. 420, 788-794 (2002).
- Portera-Cailliau, C., Weimer, R. M., DePaola, V., Caroni, P., Svoboda, K. Diverse modes of axon elaboration in the developing neocortex. PLoS Biol. 3, (2005).
- Holtmaat, A., Wilbrecht, L., Knott, G. W., Welker, E., Svoboda, K. Experience-dependent and cell-type-specific spine growth in the neocortex. Nature. 441, 979-983 (2006).
