نعرض هنا لدينا وسيلة لعزل الماوس البشرة الجذعية العصبية قمة الخلايا (EPI - NCSC). الأسلوب الذي ينطوي على تشريح المسام الدقيقة ضئيلة للغاية ، وعزل انتفاخ placeing عليه في زراعة الأنسجة. EPI - NCSC بدء الهجرة من explants انتفاخ على الطبقة التحتية في غضون 3 -- 4 أيام.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (EPI - NCSC) الثقافات
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
EPI - NCSC هي من مخلفات العصبية الجنينية للقمة في مكان غير أخلاقي ، وانتفاخ في بصيلات الشعر. هم الخلايا الجذعية multipotent التي لديها خاصية فسيولوجية لتوليد مجموعة واسعة من أنواع الخلايا المختلفة ، بما في ذلك الخلايا العصبية ، الخلايا العصبية الداعمة ، وخلايا العضلات الملساء والعظام / خلايا الغضاريف والخلايا الصباغية. EPI - NCSC يمكن الحصول عليها بسهولة في الجلد وشعر كما يمكن عزل السكان نقية للغاية من الخلايا الجذعية. هذا الفيديو يوفر بروتوكول مفصلة لإعداد الماوس EPI - NCSC الثقافات من بصيلات ضئيلة للغاية. إزالة لوحة من الخط الطولي ماوس الكبار ، وتشريح بصيلات الطولي. المسام تقطع طوليا ثم في وقت لاحق وبشكل مستعرض فوق وتحت منطقة انتفاخ. إزالة انتفاخ من كبسولة الكولاجين وضعت في لوحة الثقافة. EPI - NCSC بدء الهجرة من انتفاخ explants 3 إلى 4 أيام في وقت لاحق.
البروتوكول
تشريح من الانتفاخ من الكبار المسام الشارب ماوس
- نحن نستخدم 10 أسابيع إلى 6 أشهر من العمر الفئران. الفئران الأصغر الغلة غالبا ما تكون أكثر الخلايا. الموت ببطء والفأر حيوان تغرق بالكامل في خليط من betadine 01:01 (محلول اليود) وبيروكسيد الهيدروجين (المتوفر من الصيدلية) لحوالي 3 دقائق.
- بخ كامل الماوس ، لا سيما في منطقة الوجه ، مع الايثانول 75 ٪ ، وحمل الماوس لمجهر تشريح هود في التدفق الصفحي.
- تشريح منصات الطولي ، وتجنب القطع بعناية في بصيلا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
بحكم قدرتها على الهجرة ، ويمكن أن تكون معزولة EPI - NCSC كما يبلغ عدد سكانها نقية للغاية من الخلايا الجذعية ، التي يمكن توسيعها في المختبر. كبقايا الجنينية في موقع الكبار ، EPI - NCSC المرشحين يحتمل أن تكون جذابة بالنسبة لمستقبل العلاجات البديلة للخلية ، الهندسة الطبية و / أو الطب التجديدي. لقد اختبرنا EPI - NCSC في نموذج الفأر من اصابات الحبل الشوكي ، حيث أنها تظهر الصفات المرغوب فيه. من خلال التعبير الجيني التنميط التي LongSAGE (www.ncbi.nlm.nih.gov / الجغرافية ، سلسلة عدد GSE4680) أظهرنا ذلك ، كما .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
شكر وتقدير
بدعم من : USPHS منح NS38500 ، المعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية ، المعاهد القومية للصحة بالولايات المتحدة الأمريكية ، التكنولوجيا الطبية الحيوية التحالف جنوب شرق ويسكونسن ، Milwauke ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ بريون Riesch مؤسسة الشلل ، وميلووكي ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ ترتيب الشقيق النسور ، والغرب الأوسط الفصل ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ الوطنية لاصابة النخاع الشوكي الرابطة ، الفصل ميلووكي ، الولايات المتحدة الأمريكية ، شمال شرق انكلترا معهد الجذعية الخليوي ، جامعة نيوكاسل في المملكة المتحدة.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المراجع
- Sieber-Blum, M., Grim, M., YF, H. u, Szeder, V. Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle. Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).
- Sieber-Blum, M., Grim, M. The adult hair follicle - cradle for pluripotent neural crest stem cells. Birth Defects....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
