Summary

Isolering av tidiga hematopoetiska stamceller från Murine gulesäcken och årsstämma

Published: June 27, 2008
doi:

Summary

Denna video visar hur man mikro-dissekera gulesäcken och aorta-gonad-mesonephros regionen från embryon och använda flödescytometri för att sortera hematopoetiska stamceller.

Abstract

I musen embryot, inträffar tidigt blodbildningen samtidigt i flera organ, vilket inkluderar gulesäcken och stora kroppspulsådern-gonad-mesonephros regionen. Dessa regioner är avgörande för att blodet systemet i embryon och leder till en eventuell förflyttning av stamceller i lever hos foster och utveckling av vuxna stamceller i bonemarrow. Tidig hematopoetiska stamceller kan isoleras från dessa organ genom microdissection av embryot följt av flödescytometrisk sortering för att få en mer ren befolkning. Det är fortfarande oklart hur dessa stamceller bidra till foster och vuxna stamceller pool. Dessutom undersöker vårt labb hur tidigt stamceller funktionellt skiljer sig från foster och vuxna hematopoetiska stamceller. Vidare vårt labb sorters olika populationer av hematopoetiska stamceller och testa deras funktionella roll i samband med en rad olika genetiska modeller. I den här videon visar vi mikro-dissektion förfarande vi vanligen använder och även visa resultatet av en typisk FACS plotfter isolera dessa sällsynta populationer, är det möjligt att utföra en rad olika funktionella analysmetoder inklusive: koloni analyser och benmärgstransplantation.

Protocol

Dissektion och isolering av tidiga hematopoetiska stamceller från murina gulesäcken och aorta-gonad-mesonephros regionen Före start är det viktigt att ha alla reagenser och verktyg som behövs för förfarandet: Saxar Tång, storlek 4, och kirurgisk kvalitet böjd spets pincett, Storlek 5 / 45 (tillval) 30 gauge nålar med spruta 35mm och 100mm petriskålar PBS med 10% och 20% fetalt bovint serum och slutligen, kollagenas …
check_url/789?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Morgan, K., Kharas, M., Dzierzak, E., Gilliland, D. G. Isolation of Early Hematopoietic Stem Cells from Murine Yolk Sac and AGM. J. Vis. Exp. (16), e789, doi:10.3791/789 (2008).

View Video