Summary

Marquage rétrograde de cellules ganglionnaires de la rétine par l'application de fluoro-or sur la surface du colliculus supérieur

Published: June 17, 2008
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Summary

Cette vidéo décrit la méthode de marquage rétrograde de RGC en appliquant fluoro-or (FG) sur la surface du colliculus supérieur (CS). Technique consiste à percer le crâne, l'aspiration du cortex, et en appliquant une éponge de gélatine sur la surface dorsale entière de SC.

Abstract

Cellules ganglionnaires rétiniennes (CGR) de comptage est essentiel d'évaluer la dégénérescence rétinienne notamment dans le glaucome. Fiable étiquetage CJR est fondamentale pour évaluer les effets de tout traitement. Chez le rat, environ 98% des CGR est connu pour des projets à l'controlatéral colliculus supérieur (CS) (Forrester et Peters, 1967). Application fluoro-or (FG) sur la surface de l'étiquette SC peut presque tout le CGR, de sorte que nous pouvons nous concentrer sur ce neurone rétinien plus vulnérables dans le glaucome. FG est repris par les terminaisons axonales des cellules ganglionnaires de la rétine et au niveau bilatéral transporté par voie rétrograde à son soma dans la rétine. Comparer avec marquage rétrograde de RGC en mettant FG au moignon du nerf optique sectionné pendant 2 jours, l'ingérence de la survie du CJR est minimisé. Comparer avec coloration violet de crésyl que CGR taches, les cellules amacrines et de l'endothélium des vaisseaux sanguins dans la couche des cellules ganglionnaires de la rétine, cette méthode d'étiquetage est plus spécifique à la CJR. Cette vidéo décrit la méthode de marquage rétrograde de RGC en appliquant FG sur la surface du SC. Les procédures chirurgicales comprennent le forage du crâne; aspirer le cortex pour exposer le SC et en appliquant une éponge de gélatine sur la surface dorsale entière de SC sont présentés. Conseils utiles pour éviter une hémorragie intracrânienne et l'aspiration de la SC ont été donnés.

Protocol

Anesthésier le rat par injection intra-péritonéale de la kétamine (80mg/kg) et de xylazine (8mg/kg) (rapport de volume à 02h01). Appliquer une pommade stérile lubrifiant oculaire pour éviter le dessèchement de la cornée pendant la chirurgie. Rasez les poils de tête (de l'œil au niveau de l'oreille) et fixer la tête sur la scène la tête par une tête de pince et fixer ses incisives dans la barre d'incisive. Désinfectée la zone d'opération avec une solution de povidone iodée à 10%, s…

Discussion

  1. Pourquoi utiliser cette méthode chirurgicale pour la numération des cellules ganglionnaires rétiniennes?

    Chez le rat environ 98% des cellules ganglionnaires de la rétine (CJR) sont connus pour des projets à l'controlatéral colliculus supérieur (CS). Application fluoro-or sur la surface de l'étiquette SC peut presque tout le CGR, de sorte que nous pouvons nous concentrer sur ce neurone rétinien plus vulnérables dans le glaucome. Comparer avec marquage rétrograde de RGC en mettant FG au moignon du nerf opt…

Acknowledgements

Les auteurs tiennent à remercier pour le soutien de National Glaucome Programme de la Fondation américaine adjointe de la santé.

References

  1. Ahmed, A. K. M. F., Dong, K., Sugioka, K., Yamadori, T. Retrograde double labeling of retinal ganglion cells in the newborn and adult albino rat. Neurosci. Protocols. 1, 1-11 (1996).
  2. Chan, H. C., Chang, R. C. C., Ip, A. K. C., Chiu, K., Yuen, W. H., Zee, S. Y., So, K. F. Neuroprotective effects of Lycium barbarum Lynn on protecting retinal ganglion cells in an ocular hypertension model of glaucoma. Experimental Neurology. 203, 269-273 (2007).
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Cite This Article
Chiu, K., Lau, W., Yeung, S., Chang, R. C., So, K. Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells by Application of Fluoro-Gold on the Surface of Superior Colliculus. J. Vis. Exp. (16), e819, doi:10.3791/819 (2008).

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