Retrograde Labeling van retinale ganglioncellen door toepassing van fluor-Gold op het oppervlak van Superior colliculus
Summary
Deze video beschrijft de methode van retrograde etikettering van RGC door het toepassen van fluoro-goud (FG) op het oppervlak van superieure colliculus (SC). Techniek omvat het boren van de schedel, opzuigen van de cortex, en het toepassen van gelatine spons over de gehele dorsale oppervlak van de SC.
Abstract
Retinale ganglion cel (RGC) tellen is essentieel om retinadegeneratie evalueren vooral in glaucoom. Betrouwbare RGC etikettering is fundamenteel voor het evalueren van de effecten van een eventuele behandeling. In de rat, is ongeveer 98% van RGC waarvan bekend is dat het project aan de contralaterale superieure colliculus (SC) (Forrester en Peters, 1967). Het toepassen van fluoro-goud (FG) op het oppervlak van SC kan label bijna alle RGC, zodat we kunnen op deze meest kwetsbare netvlies neuron focus in glaucoom. FG wordt ingenomen door het axon terminals van retinale ganglioncellen en bilateraal retrogradely getransporteerd naar de SOMA in het netvlies. Vergelijk met retrograde etikettering van RGC Door FG op stronk van doorsneden oogzenuw voor 2 dagen, is de interferentie van RGC overleven geminimaliseerd. Vergelijk met cresyl violet vlekken die vlekken RGC, amacrine cellen en endotheel van het bloedvat in de retinale ganglion cel laag, deze labeling methode is meer specifiek voor de RGC. Deze video beschrijft de methode van retrograde etikettering van RGC door het toepassen van FG op het oppervlak van SC. De chirurgische procedures omvatten het boren van de schedel, aspiratie van de cortex naar de SC bloot te leggen en het toepassen van gelatine spons over de gehele dorsale oppervlak van SC worden getoond. Nuttige tips voor het vermijden van grote intracraniële bloeden en aspiratie van de SC zijn gegeven.
Protocol
Discussion
- Waarom gebruik maken van deze chirurgische methode om retinale ganglion cellen?
In de rat ongeveer 98% van retinale ganglioncellen (RGC) is bekend dat het project aan de contralaterale superieure colliculus (SC). Toepassing van fluor-goud op het oppervlak van SC kan bijna alle label van het RGC, zodat we kunnen op deze meest kwetsbare netvlies neuron focus in glaucoom. Vergelijk met retrograde etikettering van RGC Door FG op stronk van doorsneden oogzenuw voor 2 dagen, is de interferentie van RGC overleven geminimaliseerd….
Acknowledgements
De auteurs willen graag bedanken voor de steun van National Glaucoom Program van de Amerikaanse Health Assistant Foundation.
References
- Ahmed, A. K. M. F., Dong, K., Sugioka, K., Yamadori, T. Retrograde double labeling of retinal ganglion cells in the newborn and adult albino rat. Neurosci. Protocols. 1, 1-11 (1996).
- Chan, H. C., Chang, R. C. C., Ip, A. K. C., Chiu, K., Yuen, W. H., Zee, S. Y., So, K. F. Neuroprotective effects of Lycium barbarum Lynn on protecting retinal ganglion cells in an ocular hypertension model of glaucoma. Experimental Neurology. 203, 269-273 (2007).
- Forrester, J., Peters, A. Nerve fibers in the optic nerve of rat. Nature. 214, 245-247 (1967).
- Ji, J. Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. W., Hugon, J., So, K. F. CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway. European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).
- Li, R. S., Chen, B. Y., Tay, D. K., Chan, H. H. L., Pu, M. L., So, K. F. Melanopsin-Expressing Retinal Ganglion Cells Are More Injury-Resistant in a Chronic Ocular Hypertension Model. Investigative. Ophthalmology & Visual Science. 47, 2951-2958 (2006).
