La preparazione di 2-dGuo-trattati Organ Culture Timo

Summary

Questo video dimostra la dissezione e la rimozione del timo del feto e la preparazione delle colture ex vivo di 2-dGuo trattati con timo.

Abstract

Nel timo, immaturi CD4 +8 + timociti che esprimono in modo casuale riarrangiati cellule T recettori α-e b-catena di geni sottoposti a selezione di eventi positivi e negativi in ​​base alla loro capacità di riconoscere self-peptide/major complessi di istocompatibilità (MHC) molecole espressa dal timo cellule stromali. L'analisi in vivo del ruolo di cellule stromali del timo durante la selezione intratimica è resa difficile dalla complessità cellulare del microambiente timico in steady-state timo adulto, e dalla mancanza di adeguate strategie di targeting per manipolare l'espressione genica, in particolare, comparti timica stromale. Abbiamo dimostrato che il microambiente timica può essere facilmente manipolate in vitro tramite l'uso di reaggregate culture organo del timo, che permettono la preparazione di lobi timo tridimensionale definito da cellule stromali e linfoidi. Anche se gli altri sistemi in vitro supportano alcuni aspetti di cellule T sviluppo, reaggregate coltura d'organo thymus rimane l'unico sistema in vitro in grado di supportare efficienti MHC di classe I e II-mediata eventi di selezione timocita, e quindi può essere utilizzato come uno strumento efficace per lo studio la regolazione cellulare e molecolare di selezione positiva e negativa nel timo.

Protocol

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