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Methodenartikel

Die hypoxische ischämischen Enzephalopathie Model of Perinatal Ischämie

35.9K Aufrufe

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DOI:

10.3791/955

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19. November 2008

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Die postnatale Rattenmodell für hypoxisch-ischämischen Hirn-Trauma ist ein gut etabliertes Modell der menschlichen Neugeborenen hypoxisch ischämischen Enzephalopathie (HIE). In diesem Artikel beschreiben wir das Modell der HIE in postnatalen Rattenjungen.

Zusammenfassung

Hypoxisch-ischämischen Enzephalopathie (HIE) ist die Folge der systemischen Asphyxie auftreten bei der Geburt. Fünfundzwanzig Prozent der Neugeborenen mit HIE entwickeln schweren und dauerhaften neuropsychologischen Spätfolgen, darunter geistige Retardierung, Zerebralparese und Epilepsie. Die Ergebnisse der HIE sind verheerend und permanent, so dass es kritisch zu identifizieren und zu entwickeln, therapeutische Strategien zu Hirnverletzungen bei Neugeborenen reduzieren mit HIE. Zu diesem Zweck hat die neugeborenen Rattenmodell für hypoxisch-ischämischen Hirn-Trauma wurde entwickelt, um diese conditio humana Modell. Die HIE-Modell wurde erstmals von Vannucci et al 1 validiert und ist seitdem intensiv genutzt, um Mechanismen der Hirnschädigung durch perinatale Hypoxie-Ischämie 2 zu identifizieren und zu testen, mögliche therapeutische Interventionen 3,4. Die HIE-Modell ist ein zweistufiger Prozess und umfasst die Ligation der linken Arteria carotis communis durch die Exposition gegenüber einer hypoxischen Umgebung gefolgt. Zerebralen Blutflusses (CBF) in der Hemisphäre ipsilateral zur ligiert Halsschlagader nicht wegen der Sicherheit des Blutflusses über den Kreis der Willis Rückgang, allerdings mit geringeren Sauerstoff-Partialdruck nimmt die CBF in der ipsilateralen Hemisphäre deutlich und führt zu einseitigen ischämischen Schädigung . Die Verwendung von 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) zu färben und zu identifizieren ischämische Hirngewebe wurde ursprünglich für die Erwachsenen-Modelle von Nagetier zerebraler Ischämie 5 entwickelt, und wird verwendet, um das Ausmaß der zerebralen infarctin zu frühen Zeitpunkten bewerten bis zu 72 Stunden nach dem ischämischen Ereignis 6. In diesem Video zeigen wir die hypoxisch-ischämischen Schädigung Modell in postnatalen Rattenhirn und der Auswertung der Infarktgröße mittels TTC-Färbung.

Protokoll

Dieses Protokoll wurde von der Institutional Animal Care und Verwenden Ausschuss an der Stanford University und hält sich an die National Institutes of Health Richtlinien für die Verwendung von Versuchstieren verabschiedet.

Neonatal Rat HIE-Modell

  1. Post-Natal-Tag (PND) 7 Sprague-Dawley Ratten Welpen (Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA) sind voll mit Isofluran (Aerrane, Baxter, Deerfield, IL, 3-4% für Induktions-und 1-2% für Wartung).
  2. Durch einen kleinen Schnitt in den Hals gemacht (Extra Thin Iris Scissors # 14088-10, Fine Science Tools Inc, Foster City, CA) auf der linken Arteria carotis communis (CCA) aussetzen.
  3. D....

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Diskussion

Das Nagetier postnatale HIE-Modell ist ein etabliertes Modell, rekapituliert zerebralen Hypoxie in der perinatalen Periode bei Neugeborenen auftreten. Umfangreiche histologische und immunhistochemische Charakterisierung Studien haben gezeigt, dass die 7 Tage alte Nagetier der analogen Gehirn Reife zu einer dritten Trimester menschlichen Fötus 7 Modell hat. Das Nagetier HIE-Modell wurde sehr informativ für das Verständnis der Mechanismen der Hirnschädigung von perinatalen Hypoxie 2, wo Eingriffe wie Hypothermie wurde mi.......

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Danksagungen

Gefördert durch American Heart Association und March of Dimes.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Sprague-Dawley-RattenwelpenTierCharles River Laboratories
IsofluranChirurgieBaxter Internationl Inc.
8 % Sauerstoff / 92 % StickstoffgasChirurgieAirgas
2,3,5-TriphenyltetrazoliumchloridReagenzSigma-AldrichT8877
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS), pH 7,4ReagenzGIBCO, von Life Technologies
ParaformaldehydReagenzSigma-AldrichP6148

Referenzen

  1. Rice, J. E. 3rd, Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Annals of neurology. 9 (2), 131-141 (1981).
  2. Vannucci, R. C., Vannucci, S. J. Perinatal Hypoxic-Ischemic Brain Damage: Evolution of an Animal Mode....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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