Техника для последовательного Коллекция спинномозговой жидкости из Cisterna Magna в мышь
Summary
Трансгенные (Tg) мышиных моделях AD предоставит прекрасную возможность для исследования, как и почему Ар или тау уровней изменения ликвора по мере прогрессирования заболевания в человеческих пациентов. Здесь мы демонстрируем, изысканный цистерны Magna прокол техника для последовательного отбора проб СМЖ от мыши.
Abstract
Болезнь Альцгеймера (БА) является прогрессирующее нейродегенеративное заболевание, которое характеризуется патологически внеклеточной отложение β-амилоида пептида (Ар) и intraneuronal накопления hyperphosphorylated тау-протеина. Из спинномозговой жидкости (ликвора) находится в непосредственном контакте с внеклеточном пространстве мозга, он обеспечивает отражение биохимических изменений в головном мозге в ответ на патологические процессы. СМЖ от больных AD показывает снижение 42 аминокислотных форме Ар (Aβ42) и увеличение в общем объеме тау-тау и hyperphosphorylated, хотя механизмы, ответственные за эти изменения до сих пор полностью не поняты. Трансгенные (Tg) мышиных моделях AD предоставит прекрасную возможность для исследования, как и почему Ар или тау уровней изменения ликвора, как болезнь прогрессирует. Здесь мы демонстрируем, изысканный цистерны Magna прокол методика отбора проб СМЖ от мыши. Это очень нежный выборки техника позволяет серийные образцы спинномозговой жидкости, которые будут получены из того же мыши на 2-3 интервалами месяц, что значительно минимизирует влияние смешанных между мыши изменчивости в Ар или тау уровней, позволяющих обнаружить тонкие изменения с течением времени. В сочетании с Ар и тау-ELISA, эта методика будет полезна для исследований, направленных на изучение взаимосвязи между уровнем CSF Aβ42 и тау, и их обмен веществ в мозге в модели AD мыши. Исследования в Tg мышей может дать важную проверку, чтобы потенциал CSF Ар или тау уровнях, которые будут использованы в качестве биологических маркеров для мониторинга прогрессирования заболевания, а также для мониторинга влияния терапевтических вмешательств. Как мыши могут быть принесены в жертву и мозги могут быть проверены на предмет биохимических или гистологических изменений, механизмы, лежащие в ликворе изменения могут быть лучше оценены. Эти данные, вероятно, будут информативными для интерпретации человеческой изменения ликвора нашей эры.
Protocol
Discussion
Мы описали высоконадежный протокол для последовательного отбора проб спинномозговой жидкости у мышей без выявляемых загрязнения плазмы.
1. Вся процедура обычно занимает 10 минут на мышь (включая анестезию). Объем СМЖ получены зависит от мыши штаммов. В PS / АПП двойной Tg мышей мы used2, средний объе…
Acknowledgements
Наша работа поддерживается грантами NIH NS048447 и AG017216to KD. Лю Ли хотел бы поблагодарить доктора Хейкки Tanila (Университет Куопио, Куопио, Финляндия) за руководство и поддержку в развитии оригинального протокола.
References
- Liu, L., et al. Longitudinal observation on CSF Abeta42 levels in young to middle-aged amyloid precursor protein/presenilin-1 doubly transgenic mice. Neurobiol Dis. 17, 516 (2004).
- Holcomb, L., et al. Accelerated Alzheimer-type phenotype in transgenic mice carrying both mutant amyloid precursor protein and presenilin 1 transgenes. Nat Med. 4, 97 (1998).
- Lewis, J., et al. Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein. Nat Genet. 25, 402 (2000).
- DeMattos, R. B., et al. Plaque-associated disruption of CSF and plasma amyloid-beta (Abeta) equilibrium in a mouse model of Alzheimer’s disease. J Neurochem. 81, 229 (2002).
- Planel, E., et al. Anesthesia leads to tau hyperphosphorylation through inhibition of phosphatase activity by hypothermia. J Neurosci. 27, 3090 (2007).
- Refolo, L. M., et al. A cholesterol-lowering drug reduces beta-amyloid pathology in a transgenic mouse model of Alzheimer’s disease. Neurobiol Dis. 8, 890 (2001).
