Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
Interstitiellt væsketrykk eller IFP er kraften som utøves av væsken i mellomrommene mellom cellene i et vev. Først bedøver du en tumorbærende mus med 2% isofluor blandet med oksygen og immobiliserer den på den beregnede tomografien eller CT-IFP-robotplattformen. Nå, injiser i den laterale halevenen til en mus med liposomer innkapslet med et kontrastmiddel for å visualisere svulsten. Returner dyret til buret og la det gjenopprette.
Mellom 48 og 72 timer etter injeksjon, sikre den bedøvede musen på CT-IFP-plattformen og velg noen få jevnt fordelte posisjoner på svulsten for måling av IFP. Skyll deretter IFP-systemnålen med en heparin saltløsning før innsetting. Ta nålen på den valgte posisjonen og sett den inn i tumorvevet.
Nå skaffe bilder i alle posisjoner og måle Internett-leverandøren ved hjelp av programvaren. IFP i svulsten er vanligvis høy på grunn av sin tette natur, unormale blodkar og defekt lymfesystem. Dette kan føre til opphopning av liposomer i tumorperiphery. I følgende protokoll vil vi demonstrere teknikken for å måle IFP i en solid svulst.
For å måle IFP, tape dyret på CT-IFP robotplattformen, slik at svulsten er immobilisert og tilgjengelig for CT-IFP robotsystemet. Få en anatomisk mikro CT-skanning som nettopp demonstrert, og last deretter inn de preneedle innsettingsdataene i CT-IFP-robotjusteringsprogramvaren og juster vinduet og nivået for å visualisere svulsten. Klikk på kanten av svulsten i et hvilket som helst bilde, etterfulgt av valg av en annen kantplassering på den tilstøtende siden av svulsten.
Programvaren vil beregne en rekke posisjoner langs en lineær linje mellom de to punktene. Velg deretter x-, y- og z-koordinatene for en serie på fem til åtte jevnt fordelte posisjoner fra listen. Skyll deretter IFP-systemnålen med en saltvanns heparinløsning og angi de første forhåndsbestemte nåleposisjonene i XYZ-koordinatvinduene i CT-IFP-robotkontrollprogramvaren.
Trykk på Go-knappen for å flytte roboten til ønsket sted. Deretter klikker du knappen Sett inn nål for å sette nålen inn i vevet for hver nålposisjon i sin tur. Klyp og slipp PE-20-slangen for å bekrefte en god væskekommunikasjon mellom IFP-nålen og vevet, og vær oppmerksom på at IFP-målingen øker og går tilbake til forklemmingsverdien på IFP-oppkjøpsprogramvaren. Til slutt, få en anatomisk CT-skanning med nålen satt inn, klikk på Tilbake nål-knappen på slutten av skanningen for å fjerne nålen fra vevet.