JoVE Encyclopedia of Experiments
Investigación sobre el cáncer
0 views • 3:18 min • April 30th, 2023
- Una administración intrabronquial administra un agente experimental a un pulmón en particular. Primero, fije un ratón anestesiado a una tabla de plástico en posición supina y canule la tráquea con un catéter extendido. Para canular el pulmón derecho distal, gire la tabla a 30 grados y guíe el catéter paralelo a la línea media del ratón hasta que sienta resistencia.
Administre el agente experimental en el catéter. Luego, con un gotero, dispense aire para eliminar el agente del catéter. Retire el catéter y mantenga el ratón en su posición durante 30 segundos. Coloque al ratón en una jaula para que se recupere.
Para administrar agentes experimentales en el pulmón izquierdo distal después de la canulación intratraqueal, gire la tabla de plástico a menos 74 grados. Avance suavemente el catéter hacia el bronquio principal izquierdo. Gire la placa a menos 30 grados para permitir la asistencia gravitacional para la administración de agentes experimentales. Suministrar más volumen del agente experimental en proporción al lóbulo pulmonar izquierdo que tiene un área más grande. Con un gotero, dispense aire y retire el catéter. Mantenga el mouse en su posición durante 30 segundos, luego colóquelo en una jaula para recuperarse.
El siguiente protocolo muestra la administración de colorante azul de Evans a través de la administración intrabronquial para la deposición selectiva en un pulmón de ratón.
- Para la canulación lobular selectiva del pulmón derecho distal, después de la intubación intratraqueal, gire la tabla de plástico 30 grados y guíe el cubo del catéter en paralelo a la línea media del ratón hasta la profundidad adecuada basada en el peso como se indica en la tabla. Con una punta de carga de gel, administre 20 microlitros de tinte azul Evans al 0,3% en el catéter, seguido de 1 a 2 alícuotas de 100 microlitros de aire mediante un gotero de vidrio. A continuación, retire el catéter y mantenga el ratón en posición durante 30 segundos antes de colocar al animal sobre una manta térmica con seguimiento hasta la recuperación completa.
Para la canulación lobar selectiva del pulmón izquierdo distal, después de la intubación intratraqueal, gire la tabla de plástico menos 74 grados y avance suavemente el catéter hacia el bronquio del vástago principal izquierdo mientras ejerce una presión modesta a 90 grados hacia abajo y hacia el sujetalibros. Después de canular los segmentos pulmonares inferiores izquierdos, gire la tabla de plástico menos 30 grados y administre 40 microlitros de tinte azul Evans al 0,3% con una punta de carga de gel. A continuación, administre de 1 a 2 100 a 300 microlitros de alícuotas de aire a través de un gotero de vidrio y retire el catéter para permitir que el ratón se recupere como se ha demostrado.
Este artículo detalla un protocolo para la administración intrabronquial de agentes experimentales en ratones, centrándose en técnicas de cannulación selectiva de lóbulos para los pulmones derecho e izquierdo. El método implica la colocación precisa de un catéter y la administración de agentes como el colorante azul de Evans.
La administración intrabronquial permite dirigir con precisión agentes experimentales a lóbulos pulmonares específicos, lo que favorece la reducción de riesgos mecanicistas en modelos de enfermedades pulmonares. Esta técnica mejora la confianza predictiva al disminuir la variabilidad en la deposición del agente, lo cual es fundamental para la validación de dianas en la investigación respiratoria. El método favorece la continuidad traslacional desde el descubrimiento hasta los estudios preclínicos al proporcionar dosis reproducibles y específicas por lóbulo.
El método apoya la biología de descubrimiento al permitir la comprobación de hipótesis mediante la administración selectiva en lóbulos pulmonares, posicionándolo al inicio del continuo de descubrimiento para la validación de dianas.
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Last updated: 29 August 2026