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Eletroforese em Gel de Poliacrilamida azul Nativo (BN-PAGE) para Análise de Complexos Multiproteicos de Lisados ​​Celular
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Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis (BN-PAGE) for Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates

Eletroforese em Gel de Poliacrilamida azul Nativo (BN-PAGE) para Análise de Complexos Multiproteicos de Lisados ​​Celular

DOI:
10.3791/2164-v

•

12:03 min

•

February 24, 2011

•

, ,
1Spemann Graduate School of Biology and Medicine (SGBM),University of Freiburg, 2Centre for Biological Signalling Studies (bioss) and Biology III, Faculty of Biology,University of Freiburg, 3Department of Molecular Immunology,Max-Planck-Institute of Immunology and Epigenetics

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:21Introduction
  • 01:58Preparation of Dialyzed Cell Lysate
  • 04:48Pouring of Blue Native-gels
  • 07:04Separation of Dialyzed Cell Lysate by Blue Native-PAGE
  • 07:53Second Dimension SDS-PAGE
  • 09:25Representative Results for Blue Native-PAGE Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates
  • 11:18Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Neste vídeo, descrevemos a caracterização de complexos multiprotein (PPM) por eletroforese em gel de poliacrilamida nativo azul (BN-PAGE). Em uma primeira dimensão, dialisadas lisados ​​celulares são separados por BN-PAGE para identificar PPM individual. Em uma segunda dimensão SDS-PAGE, PPM de interesse são subdivididos para analisar os seus constituintes por immunoblotting.

Tags

Blue Native Polyacrylamide Gel ElectrophoresisBN-PAGEMultiprotein ComplexesCell SignallingProtein-protein Interaction NetworksNative ConditionsResolutionGel FiltrationSucrose Density UltracentrifugationMPC SizeCompositionRelative AbundanceHydrodynamic Size And ShapePolyacrylamide MatrixCellular LysatesLysate DialysisFirst Dimension BN-PAGESecond Dimension SDS-PAGE

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