A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:34Day 1: Viral Infection and Preparation of Buffers
- 02:56Day 2, Phase 1: Cell Lysis and Ultracentrifugation
- 04:01Day 2, Phase 2: Ultracentrifugation
- 07:35“Ghost” DNA Precipitation
- 09:56Representative Results
- 11:51Conclusion
We beschrijven het proces van het isoleren van hoge zuiverheid herpesvirus nucleocapside DNA van geïnfecteerde cellen. De uiteindelijke DNA veroverd op oplossing is van de hoge concentratie en zuiverheid, waardoor het bij uitstek geschikt voor high-throughput sequencing, high fidelity PCR-reacties, en transfecties om nieuwe virale recombinanten te produceren.
Tags
Viral DNANucleocapsidsHost Cell ContaminantsDownstream ApplicationsViral Genome SequencingHost DNA RemovalViral Recombinant StrainsPurified PlasmidLinear Viral DNAExtractionsDensity-based CentrifugationPurified Viral CapsidsCellular ProteinsOD260/280 RatioYields Of Viral DNALong-term StorageHigh-throughput SequencingHigh Fidelity PCR ReactionsTransfections
