A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:18Preparation of Cells and Treatment with Translation Inhibitors
- 02:29Digitonin Extraction and Cell Fixation
- 04:47Fluorescent In situ Hybridization
- 06:21Washing and Mounting the Stained Samples
- 08:08Placental Alkaline Phosphatase and Cytochrome P450-8B1 mRNA ER-association
- 09:50Conclusion
Her beskriver vi en fremgangsmåte for å visualisere endoplasmatiske retikulum-assosierte mRNAer i mammalske vevskultur celler. Denne teknikken involverer den selektive permeabilization av plasmamembranen med digitonin å fjerne cytoplasmatiske innhold etterfulgt av fluorescerende<em> In situ</em> Hybridisering detektere enten bulk poly (A) mRNA eller bestemte transkripsjoner.
