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Metabolische Markierung der neu transkribierten RNA für High Resolution Gene Expression Profiling von RNA Synthese, Verarbeitung und Decay in Zellkultur
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Biology
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JoVE Journal Biology
Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA for High Resolution Gene Expression Profiling of RNA Synthesis, Processing and Decay in Cell Culture
DOI:

11:00 min

August 08, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:44Metabolic Labeling with 4-thiouridine
  • 03:05Thiol-specific Biotinylation of Newly Transcribed RNA
  • 05:09Separation of Labeled and Unlabeled RNA Using Streptavidin-coated Magnetic Beads
  • 07:00Recovery of Newly Transcribed RNA
  • 08:17Results: Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA
  • 10:25Conclusion

Summary

Automatic Translation

Zelluläre Gesamt-RNA ein Template für die Untersuchung schlechte kurzfristige Änderungen in der RNA-Synthese und Zerfall sowie die Kinetik der RNA-Prozessierung. Hier beschreiben wir metabolische Markierung der neu transkribierten RNA mit 4-Thiouridin gefolgt von Thiol-spezifische Biotinylierung und Aufreinigung von neu transkribierten RNA ermöglicht, diese Einschränkungen zu überwinden.

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