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Induzida por drogas Sensibilização de adenililciclase: Racionalização Ensaio e miniaturização para pequenas moléculas e siRNA Triagem Applications
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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Drug-induced Sensitization of Adenylyl Cyclase: Assay Streamlining and Miniaturization for Small Molecule and siRNA Screening Applications
DOI:

09:39 min

January 27, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:37Expansion and Cryopreservation of Assay Ready Cells
  • 02:58Plating Assay Ready Cells
  • 04:15Small Molecule Screening and Persistent Agonist Treatment
  • 05:16Stimulation, Quenching, and Estimation of cAMP Accumulation
  • 07:02Results: Development and Testing of a Cell-based 384 Well Sensitization Assay with Receptor Antagonists
  • 09:12Conclusion

Summary

Automatic Translation

Ativação persistente de inibição G receptores acoplados à proteína resulta em sensibilização da adenilil ciclase sinalização. Para identificar as vias moleculares essenciais, abordagens nonbiased são necessárias, no entanto, esta estratégia requer o desenvolvimento de um ensaio escalável sensibilização AMPc baseado em células. Relata-se um ensaio de sensibilização para a pequena molécula e triagem siRNA.

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