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Mise en œuvre de patch clamp en direct et microscopie de fluorescence pour surveiller propriétés fonctionnelles des fraîchement isolés PKD épithélium
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Implementing Patch Clamp and Live Fluorescence Microscopy to Monitor Functional Properties of Freshly Isolated PKD Epithelium
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Mise en œuvre de patch clamp en direct et microscopie de fluorescence pour surveiller propriétés fonctionnelles des fraîchement isolés PKD épithélium

DOI:
10.3791/53035-v

•

08:46 min

•

September 01, 2015

•

, , , , ,
1Department of Physiology,Medical College of Wisconsin, 2Department of Integrative Biology & Pharmacology,University of Texas Health Science Center at Houston

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:14Isolation of Renal Cysts and Connecting Tubules/Collecting Duct Segments
  • 05:02Single Channel Patch-clamp Electrophysiology
  • 05:32Ratiometric Epifluorescence Measurement of Intracellular Calcium Concentration in the Epithelial Cells
  • 06:55Results: Effect of Benzamil Treatment and ATP in the Cystic Cells of PCK Rats
  • 08:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Les canaux ioniques exprimés dans l'épithélium tubulaire rénal jouent un rôle important dans la pathologie de la maladie polykystique des reins. Nous décrivons ici les protocoles expérimentaux utilisés pour effectuer l'analyse et le niveau de calcium intracellulaire mesures patch-clamp dans l'épithélium kystique fraîchement isolées à partir de reins de rongeurs.

Tags

Patch ClampLive Fluorescence MicroscopyPolycystic Kidney DiseasePKDARPKDIon ChannelsCalcium SignalingEpithelial MonolayerEx Vivo AnalysisPCK RatSprague Dawley RatNative SettingEpithelial IsolationImmunostainingPrimary CultureBiochemical Assays

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