A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:02Primer Design for PCR Amplification of Gene Flanks
- 02:49Production of OSCAR Constructs
- 05:48Agrobacterium tumefaciens Mediated Transformation (ATMT) of Fungi
- 07:45Deletion Mutant Identification by PCR
- 08:53Results: The OSCAR Method Generates a Gene Deletion Plasmid for Fungi in a Single Reaction
- 10:23Conclusion
Gendeletionsmutanter som alstras genom homolog rekombination är guldstandarden för genfunktionsstudier. OSCAR (One Step Construction av Agrobacterium-Recombination-ready-plasmids) -metoden för snabb generering av deletionskonstruktioner beskrivs. Agrobacterium- medierad svamptransformation följer. Slutligen presenteras en PCR-baserad bekräftelsemetod av gendeletioner i svamptransformanter.
