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La reconstitución de los nucleosomas con histonas hermanas marcadas con isótopos diferencialmente
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Reconstitution of Nucleosomes with Differentially Isotope-labeled Sister Histones
DOI:

09:26 min

March 26, 2017

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:03Reconstitution of a Histone Octamer with Differentially Isotope-labeled and Asymmetrically-modified Histone H3
  • 03:20Tandem Affinity Purification of Reconstituted Octamer
  • 05:28Nucleosome Reconstitution
  • 07:07Results: Generation of Differentially Isotope-labeled Nucleosomes for Investigating Cross-talk Mechanisms
  • 08:58Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este protocolo describe la reconstitución de los nucleosomas que contienen histonas hermana marcados con isótopos diferencialmente. Al mismo tiempo, los nucleosomas asimétricamente después de la traducción modificados pueden ser generados después de usar una copia de la histona premodified. Estas preparaciones se pueden utilizar fácilmente para estudiar los mecanismos de modificación de diafonía, simultáneamente en ambos histonas hermanas, mediante el uso de la espectroscopia de RMN de alta resolución.

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