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FRET de alta precisão em nível de molécula única para determinação de estrutura de biomoléculas
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High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination

FRET de alta precisão em nível de molécula única para determinação de estrutura de biomoléculas

DOI:
10.3791/55623-v

•

11:24 min

•

May 13, 2017

•

, , , , ,
1Department of Chemistry,Clemson University, 2Department of Physics and Astronomy,Clemson University, 3Department of Biochemistry and Molecular Biology, Center for Membrane Biology, Graduate School for Biomedical Sciences,University of Texas Health Science Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:07Preparation of Materials
  • 02:57Pulsed Interleaved Excitation-Multiparameter Fluorescence Detection (PIE-MFD) Instrument Setup
  • 06:14Burst Integration Fluorescence Lifetime Analysis of Standards
  • 07:34dsDNA and Protein Sample Measurements and Analysis
  • 09:28Results: Inter-dye Distance Determination in Single Molecules
  • 10:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Um protocolo para experiências FRET de alta precisão no nível de molécula única é apresentado aqui. Adicionalmente, esta metodologia pode ser utilizada para identificar três estados conformacionais no domínio de ligação ao ligando do receptor N-metil-D-aspartato (NMDA). Determinar distâncias precisas é o primeiro passo para construir modelos estruturais baseados em experimentos FRET.

Tags

Keywords: High Precision FRETSingle-moleculeBiomolecule Structure DeterminationFörster Resonance Energy TransferMultiparameter Fluorescence DetectionInterdye Distance MeasurementNMDA ReceptorConformational StatesStructural ModelDynamic Biomolecules

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