Journal
/
Biochemistry
/
MRNA-interaktomfångst från plant protoplaster
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
mRNA Interactome Capture from Plant Protoplasts
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

MRNA-interaktomfångst från plant protoplaster

DOI:
10.3791/56011-v

•

12:29 min

•

July 28, 2017

•

, , ,
1Department of Biology,KU Leuven

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:15In Vivo mRNA-protein Crosslinking by UV Irradiation
  • 02:38Protoplast Lysis Under Denaturing Conditions
  • 03:59mRNP Pull-down and Purification by Oligo-d(T)25 Beads
  • 08:14mRBP Concentration and Protein Assays
  • 10:04Results: Capture of UV-crosslinked mRNA-bound Proteins by Oligo-d(T)25 Beads
  • 11:53Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Här presenterar vi ett interaktivt fångstprotokoll applicerat på Arabidopsis thaliana leaf mesophyll protoplaster. Denna metod beror kritiskt på in vivo UV-tvärbindning och möjliggör isolering och identifiering av växt-mRNA-bindande proteiner från en fysiologisk miljö.

Tags

MRNA InteractomeMRNA-bound ProteomePlant ProtoplastsPost-transcriptional Gene RegulationUV CrosslinkingArabidopsis ThalianaLeaf Mesophyll ProtoplastsMMG SolutionCentrifugation

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Proteinkomplex Affinity Capture från Cryomilled däggdjursceller

Experimentell design för Laser Microdissection RNA-Seq: Lektionerna från en analys av majs Leaf utveckling

En enkel fraktionerad extraktionsmetod för den omfattande analysen av metaboliter, lipider och proteiner från en enda prov

Bestämning av glykogeninnehållet i cyanobakterier

Isolering och respiratoriska mätningar av mitokondrier från Arabidopsis thaliana.

Leaf Spray masspektrometri: En snabb omgivande jonisering teknik för att direkt bedöma metaboliter från växt vävnader

Koffein utvinning, enzymaktivitet och genuttryck av koffein syntas från växten cellsuspensioner

Studera Protein Import till kloroplaster som använder Protoplasts

Fånga och identifiering av RNA-bindande proteiner med hjälp av klick kemi-assisted RNA-interactome Capture (CARIC) strategi

Använda i Vitro fluorescens resonans energiöverföring att studera dynamiken i proteinkomplex på en millisekund tidsskala

Read Article