/
/
Sistein Thiols rekombinant proteinler Vitro siteye özgü Glikozilasyon için hedefleme
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:09Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis
- 03:44Uniform 15N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli
- 05:24Purification of Recombinant Protein from E. coli
- 07:50Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis
- 08:48Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein
- 10:11Conclusion
Biyokimyasal ve yapısal analizleri glikozile proteinlerin homojen örnekleri nispeten büyük miktarda gerektirir. Burada, reaktif Cys thiols hedefleyerek bakterilerden saflaştırılmış rekombinant proteinlerin siteye özgü Glikozilasyon için verimli bir kimyasal yöntem mevcut.
