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A Simple Fluorescence-based Reporter Assay to Identify Cellular Components Required for Ricin Toxin A Chain (RTA) Trafficking in Yeast

Um ensaio simples repórter baseado em fluorescência para identificar componentes celulares necessários para toxina ricina uma cadeia (RTA) o tráfico de levedura

DOI:
10.3791/56588-v

•

09:03 min

•

December 15, 2017

•

,
1Molecular and Cell Biology, Department of Biosciences and Center of Human and Molecular Biology (ZHMB),Saarland University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:46Heterologous Expression of His-tagged RTA in E. coli
  • 02:12Purification of His-tagged RTA via Affinity Chromatography
  • 04:21Yeast Transformation and Cell Wall Removal
  • 05:28GFP Reporter Assay Measurement in 96-well Plates
  • 06:57Results: Assay to Identify Cellular Components Required for RTA Trafficking in Yeast
  • 08:30Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

O manuscrito, descreveremos o uso de um ensaio de repórter de fluorescência baseada em fermento para identificar componentes celulares envolvidos no tráfico e matar processos dos citotóxicos uma subunidade da ricina de toxina da planta (RTA).

Tags

Keywords: Fluorescence-based Reporter AssayRicin Toxin A Chain (RTA)YeastCellular ComponentsTraffickingIntercellular TransportRibosomeCytotoxic SubunitPlasma MembraneCytosomeCell TransformationLB Kanamycin MediumOptical DensityIPTGCentrifugationBinding BufferSonicationAffinity PurificationNickel-based ColumnHIS-tagged RTA

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