Journal
/
Biochemistry
/
Fånga interaktion kineticsen av en jonkanal Protein med små molekyler av Bio-lager interferometri analysen
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Capturing the Interaction Kinetics of an Ion Channel Protein with Small Molecules by the Bio-layer Interferometry Assay
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Fånga interaktion kineticsen av en jonkanal Protein med små molekyler av Bio-lager interferometri analysen

DOI:
10.3791/56846-v

•

10:41 min

•

March 07, 2018

•

, , ,
1Department of General Surgery, Tongren Hospital,Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, 2Key Laboratory of Systems Biomedicine (Ministry of Education), Institute of Systems Biomedicine,Shanghai Jiao Tong University, 3Hongqiao International Institute of Medicine, Tongren Hospital,Shanghai Jiao Tong University School of Medicine

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:01Affinity Purification of FLAG-tagged hEAG1 Channel Protein from HEK-293 Cells
  • 04:18BCA Assay, Western Blotting, and Labeling the Purified Protein with Biotin for the BLI Assay
  • 06:10Bio-layer Interferometry Assay
  • 08:06Results: Interaction Kinetics of hEAG1 with PIP2 Using the Bio-layer Interferometry Assay
  • 09:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Protokollet här beskriver samspelet mellan renat hEAG1 ion kanal protein med liten molekyl lipid ligand fosfatidylinositol 4, 5-bisphosphate (PIP2). Mätningen visar att BLI kunde vara en potentiell metod för romanen småmolekylär ion kanal ligand screening.

Tags

Keywords: Bio-layer InterferometryBLI AssayIon ChannelProtein-small Molecule InteractionKineticsHEAG1Cell CultureProtein ExpressionPurificationAffinity Chromatography

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/56846?article_type=v

Metod för att identifiera små molekylhämmare av protein-proteininteraktion Mellan HCN1 och TRIP8b
check_url/56846?article_type=v

Visualisering av protein-proteininteraktion i nukleära och cytoplasmiska fraktioner av Co-immunoprecipitation och<em> In Situ</em> Proximity Ligation Assay
check_url/56846?article_type=v

Kraft spektroskopi av enda proteinmolekyler genom en Atomic Force Mikroskop
check_url/56846?article_type=v

Mätning av jonkoncentration i Unstirred gränsskikt med öppna Patch-Clamp pipett: konsekvenser i kontroll av jonkanaler genom vätska rinna
check_url/56846?article_type=v

Jonbyteskromatografi (IEX) kopplat till multi-Angle ljusspridning (MALS) för Protein Separation och karakterisering
check_url/56846?article_type=v

En semi-High-genomströmning anpassning av NADH-kopplad ATPas-analys för screening av småmolekylära hämmare
check_url/56846?article_type=v

En in vitro-analys för enmolekylsavbildning för analys av cap-beroende översättningskinetik
check_url/56846?article_type=v

Mikrokristallelektrondiffraktion av små molekyler
check_url/56846?article_type=v

Identifiera de bindande proteinerna i små ligands med ligands differentialradiella kapillärverkan (DRaCALA)
check_url/56846?article_type=v

A High-Throughput Enzyme-Coupled Activity Assay to Probe Small Molecule Interaction with the dNTPase SAMHD1

Read Article