Journal
/
Genetics
/
En enkel, rask og kvantitative analysen mål reparasjon av DNA-protein krysskoblinger på plasmider transfekterte i pattedyrceller
JoVE Journal
Genetics
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

En enkel, rask og kvantitative analysen mål reparasjon av DNA-protein krysskoblinger på plasmider transfekterte i pattedyrceller

DOI:
10.3791/57413-v

•

11:58 min

•

March 05, 2018

•

,
1Department of Pharmacology,University of Minnesota

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:18Generation of DNA-protein Crosslink Containing Plasmid
  • 06:21Transfection into Mammalian Cells
  • 08:39SSPE-qPCR
  • 10:02Results: Use of Strand-specific Primer Extension Based q-PCR to Quantify the DNA-protein Crosslinks
  • 11:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Målet med denne protokollen er å tallfeste reparasjon av definerte DNA-protein krysskoblinger på plasmider DNA. Lesioned plasmider er transfekterte i mottakerens pattedyr linjer og lav-molekylær vekt høstes ved flere tid poeng etter hva. DNA reparasjon kinetics er kvantifisert benytter strand-spesifikke primer forlengelsen etterfulgt av qPCR.

Tags

Keywords: DNA-protein CrosslinksPlasmid DNAMammalian CellsDNA RepairTrans-Pacific Primer Extension QPCR AssayAdductsPolymerase BlockingHouse Cell Reactivation8-oxoguanineT4 Polynucleotide KinasePrimer ExtensionPhenol-chloroform Extraction

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/57413?article_type=v

Verktøy for å studere rollen til Architectural Protein HMGB1 i behandlingen av Helix forvrenge, Site-spesifikke DNA Interstrand tverrbindinger
check_url/57413?article_type=v

En Standard metode for å undersøke stedet genetisk virkning som en funksjon av punkt mutasjon reparasjon katalysert av CRISPR/Cas9 og SsODN i menneskeceller
check_url/57413?article_type=v

Laser Microirradiation å studere i Vivo mobilnettet Svar å enkle og komplekse DNA skade
check_url/57413?article_type=v

Tilpasning av hybridisering erobringen av Chromatin-assosiert proteiner for Proteomikk til pattedyrceller
check_url/57413?article_type=v

Formaldehyd-assistert isolering av regulatoriske elementer for å måle Chromatin tilgjengelighet i pattedyrceller
check_url/57413?article_type=v

Testing Multicopy plasmider rolle i utviklingen av antibiotikaresistens
check_url/57413?article_type=v

Metoden sett replika: En høy gjennomstrømming tilnærming til kvantitativt mål Caenorhabditis elegans levetid
check_url/57413?article_type=v

Genteknologi Dictyostelium discoideum cellene basert på valget og vekst på bakterier
check_url/57413?article_type=v

Kromatin Immunutfelling analysen bruke Micrococcal Nukleaser i pattedyrceller
check_url/57413?article_type=v

Masse massespektrometri-baserte Proteomikk analyser bruker OpenProt databasen å avsløre romanen proteiner oversatt fra ikke-kanoniske åpent lesing rammer

Read Article