Journal
/
Genetics
/
En enkel, snabb och kvantitativa analysen till åtgärd reparation av DNA-protein antipyridinantikropp på plasmider transfekterade i däggdjursceller
JoVE Journal
Genetics
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

En enkel, snabb och kvantitativa analysen till åtgärd reparation av DNA-protein antipyridinantikropp på plasmider transfekterade i däggdjursceller

DOI:
10.3791/57413-v

•

11:58 min

•

March 05, 2018

•

,
1Department of Pharmacology,University of Minnesota

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:18Generation of DNA-protein Crosslink Containing Plasmid
  • 06:21Transfection into Mammalian Cells
  • 08:39SSPE-qPCR
  • 10:02Results: Use of Strand-specific Primer Extension Based q-PCR to Quantify the DNA-protein Crosslinks
  • 11:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Målet med detta protokoll är att kvantifiera reparation av definierade DNA-protein antipyridinantikropp på plasmid DNA. Bort plasmider är transfekterade till mottagarens däggdjursceller linjer och lågmolekylärt skördas på flera tid punkter efter transfection. DNA reparation kinetik kvantifieras med hjälp av strand-specifik primer filändelsen följt av qPCR.

Tags

Keywords: DNA-protein CrosslinksPlasmid DNAMammalian CellsDNA RepairTrans-Pacific Primer Extension QPCR AssayAdductsPolymerase BlockingHouse Cell Reactivation8-oxoguanineT4 Polynucleotide KinasePrimer ExtensionPhenol-chloroform Extraction

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/57413?article_type=v

Verktyg för att studera betydelsen av Architectural Protein HMGB1 i behandlingen av Helix snedvrida, Platsspecifik DNA Interstrand tvärbindningar
check_url/57413?article_type=v

En standardmetod att undersöka Hotellets mutagenicitet som en funktion av punktmutation reparation katalyseras av CRISPR/Cas9 och SsODN i mänskliga celler
check_url/57413?article_type=v

Laser Microirradiation att studera In Vivo cellulära svar till enkla och komplexa DNA-skador
check_url/57413?article_type=v

Anpassning av hybridisering fånga av kromatin-associerade proteiner för proteomik för att däggdjursceller
check_url/57413?article_type=v

Formaldehyd-assisted isolering av reglerande element till åtgärd kromatin tillgänglighet i däggdjursceller
check_url/57413?article_type=v

Testning Multicopy plasmider roll i utvecklingen av antibiotikaresistens
check_url/57413?article_type=v

Den replika Set-metoden: En hög genomströmning strategi att kvantitativt mäta Caenorhabditis elegans livslängd
check_url/57413?article_type=v

Genteknik Dictyostelium discoideum celler baserat på urval och tillväxt på bakterier
check_url/57413?article_type=v

Kromatin immunoprecipitation analys med hjälp av Micrococcal nukleaser i däggdjursceller
check_url/57413?article_type=v

Mass Spectrometry-baserad proteomik analyser med hjälp av databasen OpenProt att avslöja nya proteiner översatt från icke-kanoniska öppen läsning ramar

Read Article