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Correspondência de contraste detergente em experimentos de espalhamento pequeno ângulo nêutrons para análise estrutural de proteínas de membrana e modelagem do Ab Initio
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Contrast-Matching Detergent in Small-Angle Neutron Scattering Experiments for Membrane Protein Structural Analysis and Ab Initio Modeling
DOI:

10:27 min

October 21, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:54Determine Neutron Contrast Match Points and Necessary Contrast for Protein Measurement
  • 02:05Express and Purify the Membrane Protein of Interest
  • 03:25Collect SANS Data and Reduce SANS Data from 2D Image to 1D Plot
  • 04:48Analyze Data for Structural Parameters of the Scattering Particle
  • 07:06Create Ab Initio Models from the SANS Data
  • 08:17Results: Visualization of the Experimental SANS Envelope and Overlay with High-resolution Model using PyMOL
  • 09:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este protocolo demonstra como obter um modelo de baixa resolução ab initio e detalhes estruturais de uma proteína de membrana detergente-solubilizado em solução usando dispersão de nêutrons de ângulo pequeno com correspondência de contraste do detergente.

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