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CRISPR-Cas9-기반 게놈 엔지니어링 선택한 Proviral 통합 사이트와 에이즈-1 감염에 대 한 Jurkat 기자 모델을 생성 하
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites
DOI:

14:27 min

November 14, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:42Choice of Targeted Locus, Guide RNA (gRNA), and Targeting Vector Design
  • 03:08CRISPR-Cas9-based Targeting of Jurkat Cells
  • 04:36Generation of Clonal Lines and Screening for Correct Targeting
  • 07:50Screening of Single-cell Clones by Flow Cytometry and PCR
  • 11:46Results: Screening and Analysis of Single-cell Clones for Correct Reporter Integration
  • 13:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

우리는 선택 된 게놈 사이트에 proviral 통합 정리 에이즈-1 감염에 대 한 새로운 체 외 모델의 생성에 대 한 게놈 엔지니어링 워크플로우를 제시. 에이즈-파생 된 기자 들의 CRISPR Cas9 중재, 사이트별 게놈 조작에 의해 촉진 된다. 단일 셀 클론 세대, 심사, 그리고 올바른 대상 확인에 대 한 자세한 프로토콜 제공 됩니다.

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