Journal
/
Biochemistry
/
Hög känslighet mätning av transkription faktorn-DNA bindande samhörighet genom konkurrenskraftiga titrering med fluorescensmikroskopi
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
High Sensitivity Measurement of Transcription Factor-DNA Binding Affinities by Competitive Titration Using Fluorescence Microscopy
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Hög känslighet mätning av transkription faktorn-DNA bindande samhörighet genom konkurrenskraftiga titrering med fluorescensmikroskopi

DOI:
10.3791/58763-v

•

06:38 min

•

February 07, 2019

•

, , , ,
1Gene Center and Department of Biochemistry, Center for Protein Science Munich (CIPSM),Ludwig-Maximilians-Universität München

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:00Oligomer Annealing
  • 01:45Gel Preparation
  • 03:35Addition of the Competitor DNA Solution and Image Acquisition
  • 04:41Competitive Titration Assay and the Fitting Procedure
  • 05:17Results: Determining TF-DNA Binding Affinities Using Fluorescence Microscopy
  • 06:07Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Här presenterar vi en nya metoden för att fastställa bindande tillhörighet vid jämvikt och i lösning med hög känslighet i stor skala. Detta förbättrar kvantitativ analys av transkription faktorn-DNA-bindning. Metoden är baserad på automatiserade fluorescens anisotropi mätningar i en kontrollerad leverans system.

Tags

Keywords: Transcription Factor-DNA BindingFluorescence MicroscopyDissociation ConstantCompetitive TitrationAnisotropy MeasurementBinding AffinityProtein-DNA InteractionDNA AnnealingAgarose GelTitration PlateCalibration WellNile Blue Dye

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/58763?article_type=v

Kvantifiering av Bacterial Histidin Kinase-autofosforylering med hjälp av en Nitrocellulosabindningsanalys
check_url/58763?article_type=v

Högupplösande enkelpartikelanalys från elektronkryo-mikroskopi bilder med hjälp av SPHIRE
check_url/58763?article_type=v

Mätning av proteinbindning till F-aktin genom sam-sedimentering
check_url/58763?article_type=v

Fastställande av hög affinitet antikropp-antigenbindning Kinetics med fyra Biosensor Platforms
check_url/58763?article_type=v

Imaging Amyloid vävnader färgas med självlysande konjugerade Oligothiophenes av Hyperspektrala Confocal Microscopy och fluorescens livstid Imaging
check_url/58763?article_type=v

Rab10 fosforylering detektion av LRRK2 aktivitet med SDS-PAGE med en fosfat-bindande tagg
check_url/58763?article_type=v

Analys av β-Amyloid-inducerad avvikelser på Fibrin Clot struktur av spektroskopi och svepelektronmikroskopi
check_url/58763?article_type=v

Fånga och identifiering av RNA-bindande proteiner med hjälp av klick kemi-assisted RNA-interactome Capture (CARIC) strategi
check_url/58763?article_type=v

DNA-sekvens erkännande av DNA-Primase med hög genomströmning Primase profilering
check_url/58763?article_type=v

Hög genomströmning total intern reflektions fluorescens och direkt stokastisk optisk rekonstruktion mikroskopi med ett Fotoniskt chip

Read Article