Journal
/
Biochemistry
/
Enkelt Liposom målinger for studiet af Proton-pumpe membran enzymer ved hjælp af elektrokemi og fluorescerende mikroskopi
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Single Liposome Measurements for the Study of Proton-Pumping Membrane Enzymes Using Electrochemistry and Fluorescent Microscopy

Enkelt Liposom målinger for studiet af Proton-pumpe membran enzymer ved hjælp af elektrokemi og fluorescerende mikroskopi

DOI:
10.3791/58896-v

•

12:15 min

•

February 21, 2019

•

, ,
1School of Biomedical Sciences & the Astbury Centre for Structural Molecular Biology,University of Leeds, 2Department of Chemistry and Nano-Science Center,University of Copenhagen

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:28Preparation of a Lipid/UQ-10/FDLL Mix
  • 01:26Reconstitution of Cytochrome bo3
  • 05:06Fabrication of Semi-Transparent Gold Electrodes and Modification of the Gold Surface with Self-Assembled Monolayer (SAM)
  • 06:07Electrochemical Testing of Proteoliposomes Activity
  • 07:46Detection of Enzymatic Proton Pumping by Fluorescence Microscopy
  • 09:44Results: Liposome Identification and pH Change
  • 11:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Vi præsenterer her, en protokol for at studere den molekylære mekanisme af proton translokation over lipid membraner af enkelt Liposomer, ved hjælp af cytokrom bo3 som et eksempel. Kombinere elektrokemi og Fluorescens mikroskopi, pH-ændringer i lumen af enkelt blærer, der indeholder én eller flere enzym, kan registreres og analyseres individuelt.

Tags

Keywords: Single LiposomeProton-pumpingMembrane EnzymesElectrochemistryFluorescent MicroscopyCytochrome BO3Escherichia ColiUbiquinone 10FDLLMOPS BufferHPTSOGP SurfactantPolystyrene Microbeads

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/58896?article_type=v

High-throughput screening af Carbohydrate-nedbrydende enzymer ved hjælp Novel Uopløseligt kromogene substrat Assay Kits
check_url/58896?article_type=v

Single-molekyle Super-resolution Imaging af Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphat i plasmamembranen med Novel fluorescerende prober
check_url/58896?article_type=v

Brug Stillads Liposomer at Rekonstituer Lipid-proksimal protein-protein interaktioner<em> In vitro</em
check_url/58896?article_type=v

High-resolution single particle analyse fra elektronkryo-mikroskopi billeder ved hjælp af SPHIRE
check_url/58896?article_type=v

High Precision FRET på enkeltmolekyliveau for biomolekylstrukturbestemmelse
check_url/58896?article_type=v

Protein Film infrarød elektrokemi demonstrerede for undersøgelse af H2 Oxidation af en [NiFe] Hydrogenase
check_url/58896?article_type=v

Et fluorescens udsving spektroskopi Assay af Protein-Protein interaktioner på celle-celle kontakter
check_url/58896?article_type=v

Produktion af dynein og Kinesin motor ensembler på DNA origami nanostrukturer til observation af et enkelt molekyle
check_url/58896?article_type=v

Visualisering af Diffusional Dynamics of Gold Nanorods på cellemembran ved hjælp af Single Nanoparticle Darkfield Mikroskopi
check_url/58896?article_type=v

Enkeltcelleanalyse af transskriptionsaktive alleler efter enkeltmolekyle FISH

Read Article