Journal
/
Genetics
/
Lentiviral Vector plattform för effektiv distribution av epigenomet-redigeringsverktyg i mänskliga inducerade pluripotenta stamceller-derived sjukdomsmodeller
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Lentiviral Vector plattform för effektiv distribution av epigenomet-redigeringsverktyg i mänskliga inducerade pluripotenta stamceller-derived sjukdomsmodeller

DOI:
10.3791/59241-v

•

13:47 min

•

March 29, 2019

•

, , , , , , , ,
1Department of Neurology,Duke University Medical Center, 2Center for Genomic and Computational Biology,Duke University Medical Center, 3Viral Vector Core,Duke University Medical Center, 4Division of Gynecologic Oncology, Department of Obstetrics and Gynecology,Duke University Medical Center

Chapters

  • 00:04Title
  • 02:01Plasmid Design and Construction
  • 03:20HEK-293T Cells Culturing, Plating, and Transfection
  • 05:15Virus Harvesting and Viral Particles Concentrating
  • 08:16Transduction of MD NPCs
  • 09:48Analysis of Methylation Changes
  • 11:04Results: Assessment of the LV-dCas9-DNMT3A-GFP/Puro Vectors Compared to the Naive GFP Counterpart
  • 12:45Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Riktade DNA epigenomet redigering representerar en kraftfull terapeutisk metod. Det här protokollet beskriver produktion, rening och koncentration av allt-i-ett lentiviral vektorer härbärgerat den CRISPR-dCas9-DNMT3A transgenens för epigenomet redigeringsprogram i mänskliga inducerade pluripotenta stamceller (hiPSC)-härledda nervceller.

Tags

Lentiviral VectorEpigenome EditingHuman Induced Pluripotent Stem CellsDisease ModelsCRISPR/CasAlpha-synucleinGene ExpressionGuide RNAMolecular CloningPlasmid ConstructionNeural Progenitor CellsDNA Methyltransferase (DNMT3A)

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/59241?article_type=v

Systemiska leverans av mikroRNA använda rekombinant Adeno-associerade Virus serotyp 9 neuromuskulära sjukdomar hos gnagare
check_url/59241?article_type=v

En Array-baserad jämförande genomisk hybridisering plattform för effektiv upptäckt av kopia antalet variationer i snabbt Neutron-inducerad Medicago truncatula mutanter
check_url/59241?article_type=v

Ett protokoll för produktionen av integras-brist Lentiviral vektorer för CRISPR/Cas9-medierad gen Knockout i delande celler
check_url/59241?article_type=v

Embryo Mikroskop och Transplantation teknik för Nasonia vitripennis genomet Manipulation
check_url/59241?article_type=v

Högeffektiva gen störningar av murina och mänskliga hematopoetiska stamceller av CRISPR/Cas9
check_url/59241?article_type=v

Lentiviral medieras produktion av transgena möss: en enkel och mycket effektiv metod för direkta studier av grundarna
check_url/59241?article_type=v

En kombinatorisk Single-cell strategi att karaktärisera molekylära och Immunophenotypic heterogenitet av mänskliga stamceller och stamceller populationer
check_url/59241?article_type=v

Isolering, karakterisering och mikroRNA-baserad genetisk modifiering av mänskliga dentala follikeln stamceller
check_url/59241?article_type=v

Endogen Protein taggning i mänskliga inducerade pluripotenta stamceller med CRISPR/Cas9
check_url/59241?article_type=v

Lentiviral medierad gen ljuddämpning i humant Pseudoholmen beredd i låga fästplattor

Read Article