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उलट-चरण तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा सेल मुक्त प्रोटीन संश्लेषण चयापचय का निरपेक्ष क्वांटिफिकेशन
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Absolute Quantification of Cell-Free Protein Synthesis Metabolism by Reversed-Phase Liquid Chromatography-Mass Spectrometry
DOI:

08:06 min

October 25, 2019

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:01Preparation for Aniline Tagging
  • 02:41Labeling Reaction and LC/MS Procedure
  • 06:06Results: Identification and Labeling Results of Metabolites
  • 07:02Conclusion

Summary

Automatic Translation

यहाँ, हम सेल मुक्त प्रोटीन संश्लेषण प्रतिक्रियाओं में केंद्रीय कार्बन और ऊर्जा चयापचय में शामिल 40 यौगिकों की मात्रा निर्धारित करने के लिए एक मजबूत प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं। सेल मुक्त संश्लेषण मिश्रण उलट चरण तरल क्रोमैटोग्राफी का उपयोग कर प्रभावी जुदाई के लिए aniline के साथ derivatized है और फिर समस्थानिक आंतरिक मानकों का उपयोग कर बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा परिमाणित.

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