A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Title
- 01:16Culture and Maintenance of HPrEC Cells in 2D
- 02:30Labeling HPrEC with BrdU, CFSE, or Far Red Pro-dyes
- 03:24Prostasphere Formation in the 3D Basement Membrane Culture System
- 04:27Isolation of the CFSE Label-retaining Prostate Stem Cells by FACS Sorting
- 06:45Results: Evaluation of the Sphere Based Label-retaining Assay
- 08:03Conclusion
Met behulp van humane primaire prostaat Epitheelcellen, rapporteren we een nieuwe biomarker-vrije methode van functionele karakterisering van stam-achtige cellen door een spheroid-gebaseerde label-retentie test. Een stap-voor-stap protocol wordt beschreven voor BrdU, CFSE of far Red 2D Cell labeling; driedimensionale spheroid-formatie; Label-behoud stam-achtige celidentificatie door immunocytochemie; en isolatie door FACS.
