/
/
Parallel forhør af β-Arrestin2 Rekruttering til Ligand Screening på en GPCR-wide Scale ved hjælp af PRESTO-Tango Assay
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Introduction
- 00:43Primary Screening: Poly-L-Lysine Plate Preparation
- 01:25Primary Screening: Cell Culture and Plate Seeding
- 02:22Primary Screening: DNA Plate Preparation and Transfections
- 03:35Primary Screening: Cell Stimulation and Luminescence Reading
- 04:26Secondary Screening: Cell Seeding and Transfections
- 05:59Secondary Screening: Half Log Dose-Curve Drug Plate Preparation and Luminescence Reading
- 07:16Results: Representative Primary Screening Hit Identification and Secondary Screening Dose-Curve Responses
- 08:23Conclusion
Da GPCR'er er attraktive mål for lægemidler, er GPCR ligandscreening således nødvendig for identifikation af blyforbindelser og for undersøgelser af forældreløs eller sjældne børn. Mod disse bestræbelser, beskriver vi PRESTO-Tango, en open source ressource platform, der anvendes til samtidig profilering af forbigående β-arrestin2 rekruttering på ca 300 GPCRs ved hjælp af en TEV-baseret reporter assay.
