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Interrogatorio parallelo del reclutamento di z-Arrestin2 per lo screening dei ligandi su una scala a livello GPCR utilizzando PRESTO-Tango Assay
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Chapters
- 00:05Introduction
- 00:43Primary Screening: Poly-L-Lysine Plate Preparation
- 01:25Primary Screening: Cell Culture and Plate Seeding
- 02:22Primary Screening: DNA Plate Preparation and Transfections
- 03:35Primary Screening: Cell Stimulation and Luminescence Reading
- 04:26Secondary Screening: Cell Seeding and Transfections
- 05:59Secondary Screening: Half Log Dose-Curve Drug Plate Preparation and Luminescence Reading
- 07:16Results: Representative Primary Screening Hit Identification and Secondary Screening Dose-Curve Responses
- 08:23Conclusion
Dato che i GPCR sono interessanti obiettivi drogabili, lo screening dei ligandi GPCR è quindi indispensabile per l'identificazione dei composti di piombo e per gli studi di deorfanotrizzazione. A fronte di questi sforzi, descriviamo PRESTO-Tango, una piattaforma di risorse open source utilizzata per la profilazione simultanea del reclutamento transitorio di z-arrestin2 a circa 300 GPCR utilizzando un test reporter basato su TEV.
