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Microwaving e Fluorophore-Tyramide para Imunocoloração Multiplex em Adrenals de camundongos − Usando Anticorpos primários conjugados da mesma espécie hospedeira
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JoVE Journal Developmental Biology
Microwaving and Fluorophore-Tyramide for Multiplex Immunostaining on Mouse Adrenals − Using Unconjugated Primary Antibodies from the Same Host Species

Microwaving e Fluorophore-Tyramide para Imunocoloração Multiplex em Adrenals de camundongos − Usando Anticorpos primários conjugados da mesma espécie hospedeira

DOI:
10.3791/60868-v

•

07:37 min

•

February 21, 2020

•

, , ,
1College of Animal Science & Technology,Henan University of Science and Technology, 2Department of Anatomy, Physiology and Pharmacology, College of Veterinary Medicine,Auburn University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:42First Target Protein Staining
  • 03:15Antibody Stripping
  • 03:41Second Target Protein Staining
  • 04:49Fluorescence Microscopy Imaging
  • 05:30Results: Representative Effects of Microwave-Mediated Stripping on Antibody Cross-Reactivity
  • 06:38Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Vários métodos diferentes foram estabelecidos para a imunocoloração multiplex usando anticorpos primários da mesma espécie hospedeira. Aqui, descrevemos o uso de anticorpos mediados por micro-ondas e de fluoroforre-tyramida para bloquear a reatividade cruzada de anticorpos durante a imunocoloração multiplex em seções adrenal de camundongos forjadas fixadas em formalina.

Tags

Keywords: Multiplex ImmunostainingUnconjugated Primary AntibodiesFormalin-fixed Paraffin-embeddedSodium CitratePBSTBlocking SolutionSecondary AntibodyStreptavidin Horseradish PeroxidaseFluorophore-tyramide

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