/
/
ترجمة تنقية التقارب الريبوسم (TRAP) للتحقيق في تطوير جذر Arabidopsis thaliana على مقياس نوع الخلية الخاصة
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Introduction
- 01:08Propagation and Sterilization
- 01:36Plating
- 02:20Tissue Treatment (Optional)
- 02:51Harvesting
- 03:39Tissue Grinding and Homogenization
- 04:39Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing
- 05:34Immunoprecipitation
- 06:49Lab Supply Reconditioning
- 07:38Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment
- 08:47Conclusion
ترجمة تنقية تقارب الريبوسوم (TRAP) يوفر إمكانية تشريح البرامج التنموية مع الحد الأدنى من معالجة الأعضاء والأنسجة. ينتج البروتوكول عن الحمض النووي الريبي عالي الجودة من الخلايا المستهدفة ببروتين فلورسنت أخضر (GFP) يسمى وحدة فرعية من الريبوزيوم. تكشف أدوات التحليل المصب، مثل qRT-PCR أو RNA-seq، عن ملفات تعريف التعبير الخاصة بنوع الأنسجة والخلايا.
