Journal
/
/
Översätta Ribosom Affinity Rening (TRAP) för att undersöka Arabidopsis thaliana Root Development på en celltyp-specifik skala
JoVE Journal
Developmental Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Developmental Biology
Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) to Investigate Arabidopsis thaliana Root Development at a Cell Type-Specific Scale
DOI:

09:41 min

May 14, 2020

, ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:08Propagation and Sterilization
  • 01:36Plating
  • 02:20Tissue Treatment (Optional)
  • 02:51Harvesting
  • 03:39Tissue Grinding and Homogenization
  • 04:39Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing
  • 05:34Immunoprecipitation
  • 06:49Lab Supply Reconditioning
  • 07:38Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment
  • 08:47Conclusion

Summary

Automatic Translation

Translating ribosomaffinitet rening (TRAP) erbjuder möjligheten att dissekera utvecklingsprogram med minimal bearbetning av organ och vävnader. Protokollet ger högkvalitativt RNA från celler riktade med ett grönt fluorescerande protein (GFP)-märkt ribosomal underavdelning. Nedströms analysverktyg, till exempel qRT-PCR eller RNA-seq, avslöjar vävnads- och celltypspecifika uttrycksprofiler.

Related Videos

Read Article